Electroporation Method for In Vivo Delivery of Plasmid DNA in the Adult Zebrafish Telencephalon

Tamara Durovic; Jovica Ninkovic

doi:10.3791/60066

طريقة الكهربائي في الجسم الحيوي تسليم الحمض النووي بلازميد في Telencephalon حمار وحشي الكبار

JoVE Journal
Developmental Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Developmental Biology

Electroporation Method for In Vivo Delivery of Plasmid DNA in the Adult Zebrafish Telencephalon

طريقة الكهربائي في الجسم الحيوي تسليم الحمض النووي بلازميد في Telencephalon حمار وحشي الكبار

Full Text

10,319 Views

06:02 min

September 13, 2019

DOI: 10.3791/60066-v

Tamara Durovic^1,2, Jovica Ninkovic^1,3,4

¹Institute of Stem Cell Research,Helmholtz Zentrum München, ²Graduate School of Systemic Neurosciences,Ludwig Maximilian University, ³Department of Cell Biology and Anatomy, Biomedical Center,Ludwig Maximilian University, ⁴Munich Cluster for Systems Neurology (SyNergy)

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

المعروضة هنا هي طريقة الكهربائي لتسليم الحمض النووي بلازميد وتسمية الخلايا ependymoglial في telencephalon حمار وحشي الكبار. هذا البروتوكول هو وسيلة سريعة وفعالة لتصور وتتبع الخلايا الأيبندية الفردية ويفتح إمكانيات جديدة لتطبيق الكهربائي على مجموعة واسعة من التلاعبات الوراثية.

يسمح هذا البروتوكول بتسمية خلايا ependymoglial الفردية في تيلينسيففالون سمك الحمار الوحشي لتمكين مراقبتها على المدى الطويل ، وكذلك التلاعب بمسارات محددة بطريقة مستقلة عن الخلايا. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بتسمية خلية واحدة بطريقة سريعة وفعالة ، بالإضافة إلى تحرير الجينات والتلاعب في مسار الإشارة بطريقة مستقلة عن الخلايا. هذه الطريقة تسمح للتحقيق في أسئلة بيولوجيا الخلية الأساسية، على سبيل المثال، حول delamination الخلية، والحفاظ على التوازن الظهاري، وتماثل انقسام الخلايا.

ابدأ باستخدام جهاز سحب الإبرة لإعداد الشعيرات الدموية الزجاجية. استخدام نصائح microloader لملء شعري الزجاج المعدة مع عشرة ميكرولترات من حل plasmid. ثم اضغط على القائمة تغيير الشعرية "على جهاز الحقن للسماح الإبرة ليتم تحميلها في حامل إبرة.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos