توفير الإثراء البيئي المجدي وقياس الكورتيزول اللعاب في الخنازير التي تقع علي الأرضيات المضلعة

يوضح هذا البروتوكول كيفيه توفير الإثراء البيئي ذي المغزى العملي لخنازير التي يتم إيواؤها علي الأرضيات المضلعة خلال المراحل المختلفة من حياتهم ، وكيفيه جمع عينات اللعاب بطريقه غير الغازية لقياس تركيزات الكورتيزول, كمؤشر حيوي للإجهاد الحاد.

في هذا الفيديو سوف نبين كيفية توفير الإثراء البيئي العملي الهادف للخنازير التي تقع على أرضية مضلعة خلال المراحل المختلفة من حياتهم وكيفية جمع عينات اللعاب. ويمكن زرع بروتوكولات الإثراء البيئي بسهولة في أي مزرعة الخنازير تقريبا، ويمكن أن تحسن من رفاهية الحيوان. يتم أخذ عينات اللعاب بشكل غير تلقائي ويمكن استخدامه لقياسات الكورتيزول لتقييم الإجهاد أو لقياس المؤشرات الحيوية الأخرى.

لبدء هذا الإجراء تعليق مواد التخصيب في القلم farrowing قبل أن يتم نقل البذر في ذلك. لكل قلم فاروجينغ إعداد قطعتين من الجوت وقطعتين من 100 في المئة الطبيعية غير الملونة حبال القطن كل ما يقرب من متر واحد طويلة. ربط الجوت والحبال القطنية إلى قضبان القلم من انها في الوسط السماح اثنين من نهايات الحرة من كل قطعة أن تعلق نحو الأرض.

يجب أن يكون ارتفاع عقدة الجوت وحبل القطن أقل من كتف البذر بينما الغايات الحرة فوق الأرض. بعد ولدت الخنازير شنق الجوت والحبال القطنية بحيث تكون قابلة للوصول لكل من زرع وانها الخنازير في مكان آمن. عادة، عندما تكون المواد قابلة للوصول لكلا الخنازير يقلد سدودهم من سن مبكرة جدا.

ويمكن أيضا توفير الورق الممزق كإثراء بيئي إضافي للبذرات والخنازير من خلال نشرها على الأرض المضلعة. لكل قلم إعداد قطعة من 100 في المئة الطبيعية غير الملونة حبل القطن التي هي متر واحد طويلة مع التأكد من إعداد قطعة واحدة على الأقل لكل عشرة خنازير. ربط حبال القطن إلى سلسلة معلقة من السقف أو إلى عقد شنقا.

ضع الحبال في وسط المنطقة النشطة من القلم بالقرب من المغذية والشاربين وبعيدًا عن جدار القلم للسماح بالوصول 360 درجة. شنق الحبال في الارتفاع الذي يسمح للخنازير للوصول بسهولة مع أفواههم. عادة، يجب أن تكون العقدة أقل من كتف الخنزير في حين أن نهايات الحبال الحرة يجب أن تكون فوق الأرض دون لمسها.

بالإضافة إلى حبال القطن توفير عصي السيليكون القابلة للمضغ. الجهاز المستخدم يحتوي على أربعة عصي للمضغ مما يسمح لأربعة خنازير على الأقل للتفاعل معه في وقت واحد. شنق جهاز المضغ مع سلسلة من السقف للسماح للحركة يتأرجح.

ضع الجهاز في وسط المنطقة النشطة من القلم مع التأكد من أن نهاية عصي السيليكون على ارتفاع 10 إلى 20 سنتيمتر فوق الأرض. أولاً، تزويد كل قلم بقش موضوع في رف. شنق رفوف القش على ارتفاع الذي يمكن الوصول إليه لجميع الخنازير.

عادة ما يكون أقل من مستوى الكتف وإرفاقها بالحائط مع سهولة الوصول لأكبر عدد ممكن من الخنازير. تأكد من رف مليئة تماما مع القش في البداية. يمكن إضافة كمية صغيرة من القش الطازج كل يوم إلى ثلاثة أيام.

بدلا من ذلك، إعادة ملء الرف عندما يكون فارغا الذي يحدث عادة كل سبعة إلى عشرة أيام. كبديل للرفوف القش يمكن توفيرها في سلال. خطة لأخذ عينات اللعاب لنفس الوقت من اليوم لتجنب التحيز كما يتغير إفراز الكورتيزول على طول اليوم بسبب إيقاع circadian الفسيولوجية أو بسبب التغذية.

عادة ما يكون أخذ العينات أسهل قبل التغذية ويفضل قبل التغذية الثانية من اليوم. في خطة تغذية libitum الإعلانية لنفس الوقت من اليوم. إعداد قطعة واحدة من غير الملونة 100 في المئة من القطن حبل لكل 12 إلى 15 الخنازير.

ربط الحبل بالقرب من وسط القلم بعيدا عن جدران القلم. تأكد من أن الحبل المستخدم في الشنق غير قابل للوصول إلى مضغ الخنازير وأن النهايات الحرة للحبال القطنية لا تلمس الأرض. ثم كشف نهاية حرة من الحبل لزيادة سطح مضغ المتاحة.

اترك الحبل معلقاً لمدة 15 إلى 30 دقيقة. لاستخراج اللعاب من الحبل وضع الجزء الحر من الحبل في كيس بلاستيكي معقمة والضغط عليه عن طريق الضغط من خارج الكيس من أعلى إلى أسفل حتى يتراكم ما يكفي من السائل في الجزء السفلي من الكيس. بعد ذلك، إزالة الحبل من الحقيبة.

قطع الزاوية السفلية من كيس فوق أنبوب بلاستيكية معقمة 50 ملليلتر والسماح للعاب لاستنزاف في أنبوب. ثم ختم الأنبوب ووضع علامة عليه إما مع علامة دائمة أو ملصقا معدة مسبقا. تخزين عينات اللعاب في حاوية معزولة مع حزم الثلج حتى تسليمها إلى المختبر.

في هذه الدراسة تم تخصيص الخنازير عشوائيا في مجموعتين للعلاج. واحدة أيّ استلم ثرى بيئيّة وواحدة أيّ لم. تم جمع عينات الكورتيزول اللعاب بنجاح كل أسبوعين قبل التغذية الثانية من اليوم.

وأظهرت الخنازير في المجموعة المخصب اهتماما كبيرا في اللعاب جمع حبال القطن من البداية. ومع ذلك، تكون وحدات تخزين اللعاب المجموعة غير المخصبة عادةً أقل في المجموعة الأولية ولكن يبدو أنها متشابهة بين المجموعات من جلسات عمل المجموعة الثانية أو الثالثة. عادة، يتم استخراج وحدة تخزين أكبر من 30 إلى 40 ملليلتر بسهولة من كل صف.

وكانت تركيزات الكورتيزول، كما قيست من قبل إليسا عموما أقل بكثير في الخنازير المخصب بالمقارنة مع الخنازير غير المخصب. يمكن إثراء الخنازير بيئيا في جميع مراحل الحياة حتى على الأرض المضلعة باستخدام الجوت والحبال القطنية والقش في الرفوف وأجهزة اللدغة. نوع الإثراء وطريقة موقعه داخل القلم مهمان لفعاليته.

اللعاب التي تم جمعها noninvasively بواسطة حبال القطن كما هو موضح في هذا الفيديو يمكن استخدامها لقياس الكورتيزول وكذلك المؤشرات الحيوية الأخرى أو حتى لفحص مسببات الأمراض.