Name: إنتاج الأشعة تحت الحمراء القريبة الحساسة، منصة تسليم لقاح كور شل (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-10-20T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 27 s
Description: اكتشف منصة تسليم اللقاحات باستخدام فقاعات البوليمر الحساسة للأشعة تحت الحمراء القريبة، والتي تحافظ على استقرار الحمولة وتتيح الإطلاق المؤجل. تُحسّن هذه التقنية توزيع اللقاحات في المناطق ذات الموارد المحدودة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

نود أن نشكر الدكتور بريان E. توملين التابعة لمختبر التحليل عنصري داخل قسم الكيمياء في TAMU الذي ساعد في تحليل تنشيط النيوترونات (NAA).

1. بوليكبرولاكيوني ثلاثية الكريريلات (PCLTA) التوليف
<ol><li>الجافة 3.2 مل من 400 Da polycaprolacyone (PCL) الثلاثي بين عشية وضحاها في 50 درجة مئوية في قارورة مفتوحة 200 مل أسفل جولة وK2CO3 في قارورة زجاجية في 90 درجة مئوية.</li>
	<li>اخلط الثلاثي مع 6.4 مل من ديكلوروميثان (DCM) و4.246 غرام من كربونات البوتاسيوم (K2CO3) تحت الأرجون.</li>
	<li>مزيج 2.72 مل من كلوريد الاكريلويل في 27.2 مل من DCM وإضافة dropwise إلى خليط رد فعل في قارورة أكثر من 5 دقائق.</li>
	<li>تغطية خليط التفاعل مع رقائق الألومنيوم وتركها دون عائق في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة تحت الأرجون.</li>
	<li>بعد 24 ساعة، قم بتصفية خليط التفاعل باستخدام ورقة تصفية على قمع Buchner تحت الفراغ لتجاهل الكواشف الزائدة.</li>
	<li>راسب filtrate من الخطوة 1.5 التي تحتوي على البوليمر endcapped في الأثير ديثيل في 1:3 (vol/vol) و rotovape في 30 درجة مئوية لإزالة الأثير ديثيل.</li>
</ol>2. تشكيل polybubble
ملاحظة: حقن البوليمر في المياه deionized (DI) من شأنه أن يسبب polybubbles إلى الهجرة إلى الجزء السفلي من القارورة مما أدى إلى أسفل بالارض. استخدام 10٪ (wt/vol) carboxymethyl السليلوز (CMC) ملء الزجاج بدلا من ذلك قارورة لتجنب التسطيح polybubble.
<ol><li>إعداد 10٪ (wt/ vol) CMC الحل في DI المياه.</li>
	<li>تعبئة 0.92 مل قارورة زجاجية مع 0.8 مل من 10٪ CMC باستخدام أنبوب نقل 1 مل.</li>
	<li>مزيج 1000 ملغ / مل من 14 كيلو Da PCL في DCM وتوليف PCLTA في 1:3 (vol/vol) لمجم 200 ميكرولتر أو إعداد 200 ميكرولتر من 1000 ملغ/مل من 5 كيلو بولي (حمض اللاكتيك المشترك الجليكوليك) diacrylate (PLGADA) في الكلوروفورم.</li>
	<li>مزيج من 2-هيدروكسي-4′-(2-هيدروكسيثوكسي)-2-ميثيل بروبيوفينون (فوتوينيتاتير) مع البوليمر (PLGADA أو PCL/PCLTA) في 0.005:1 (فول/فول).</li>
	<li>تحميل 200 ميكرولتر من خليط البوليمر في حقنة زجاجية 1 مل محمولة على مضخة حقنة متصلة بأنبوب الفولاذ المقاوم للصدأ الاستغناء مع قطر داخلي 0.016 بوصة.</li>
	<li>استخدام micromotor للسيطرة على الحركة إلى الأمام والخلف من أنبوب البوليمر لحقن البوليمر في 10٪ CMC في الزجاج القارورة لتشكيل polybubble.</li>
	<li>علاج polybubbles تحت الأشعة فوق البنفسجية (UV) في الطول الموجي 254 نانومتر لمدة 60 s في 2 W / cm2.</li>
	<li>فلاش تجميد polybubbles في النيتروجين السائل وlyophilize بين عشية وضحاها في 0.010 mBar فراغ وعند -85 درجة مئوية.</li>
	<li>فصل polybubbles من CMC المجففة باستخدام ملقط وغسل polybubbles مع DI المياه لإزالة أي CMC المتبقية. لاحظ أنه يمكن استخدام البوليمرات الأخرى على الأرجح مع تعديلات لتغيير حركية الإطلاق.</li>
</ol>3. تعديل من متعدد بوبل قطر
<ol><li>تعبئة 0.92 مل الزجاج القارورة مع 10٪ CMC باستخدام أنبوب نقل 1 مل.</li>
	<li>خلط PCL/PCLTA في 1:3 (فول / فول) مع 1000mg/mL 14kDa PCL وتوليف PCLTA. اخلطي المُتَرِّف الضوئي مع خليط البوليمر في 0.005:1 (vol/vol).</li>
	<li>قم بتحميل خليط البوليمر في حقنة زجاجية 1 مل مثبتة على مضخة حقنة متصلة بأنبوبة من الفولاذ المقاوم للصدأ بقطر داخلي 0.016 بوصة.</li>
	<li>استخدام micromotor للسيطرة على الحركة إلى الأمام والخلف من أنبوب البوليمر لحقن البوليمر في 10٪ CMC في الزجاج القارورة لتشكيل polybubble.</li>
	<li>للحصول على polybubbles بأطر مختلفة ، تختلف معدل الاستغناء من 0.0005 إلى 1 ميكرولتر / س.</li>
	<li>التقاط صور للقارورة مع polybubbles مع قطر متفاوتة.</li>
	<li>استخدام ImageJ لتحديد قطر polybubbles واستخدام حجم القارورة على نطاق.</li>
</ol>4. البضائع مركزة داخل polybubble
<ol><li>
تعديل لزوجة PCL/PCLTA باستخدام K2CO3: ملاحظة: لا يلزم تعديل لزوجة PLGADA باستخدام K2CO3 لأن لزوجة 5 كيلو اديا PLAGDA في 1000 ملغ/مل كافية لتمركز البضائع.<ol>
<li>أضف K2CO3 (التي تم عزلها بعد تفاعل PCLTA) إلى PCLTA بتركيزات متفاوتة بما في ذلك 0 ملغم/مل، 10 ملغم/مل، 20 ملغ/مل، 40 ملغم/مل، و60 ملغم/مل.</li>
		<li>قياس اللزوجة الديناميكية للحلول عن طريق تغيير معدل القص من 0 إلى 1000 1/s باستخدام اِلتيْر الرحَم.</li>
		<li>حقن البضائع يدويا في الوسط (راجع الخطوة 4.2 لإعداد خليط البضائع) من polybubbles التي تشكلت باستخدام PCL / PCLTA الحلول مع تركيزات مختلفة من2K CO3 (الخطوة 4.1.1). تحديد التركيز الأمثل من K2CO3 من خلال مراقبة الحل الذي من الخطوة 4.1.1 يمكن أن يؤدي إلى الاحتفاظ البضائع في الوسط.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
توسيط الحمولة (سبق أن أظهرت جدوى مع جزيئات صغيرة) مع CMC
	<ol>
<li>اخلط الحمولة مع 5٪ (wt/vol) CMC في الدوار بين عشية وضحاها لزيادة لزوجة البضائع.</li>
		<li>يدويا حقن 2 ميكرولتر من خليط البضائع في polybubble والمضي قدما مع الشفاء من الأشعة فوق البنفسجية في الطول الموجي 254 نانومتر لمدة 60 s في 2 W /cm2.</li>
		<li>فلاش تجميد polybubbles في النيتروجين السائل لمدة 30 s وlyophilize بين عشية وضحاها في 0.010 mBar فراغ وعند -85 درجة مئوية.</li>
		<li>فصل polybubbles من CMC المجففة باستخدام ملقط وغسلها مع DI المياه لإزالة أي CMC المتبقية.</li>
		<li>قطع polybubble في نصف وصورة النصفين باستخدام المجهر confocal لضمان أن البضائع تركزت (الرجوع إلى الخطوة 6 لالإثارة والانبعاثات الطول الموجي المستخدمة).</li>
	</ol>
</li>
</ol>5- تركيبات الشحنات
ملاحظة: يمكن أن تضم تركيبة polybubble أنواع مختلفة من البضائع، بما في ذلك الجزيئات الصغيرة والبروتينات والأحماض النووية.
<ol><li>استنادا إلى الدراسات السابقة، في حالة البضائع البروتين، واستخدام سواغ بما في ذلك البولي ايثيلين جلايكول (PEG)6، polyvinylpyrrolidone (PVP)، وغليكوبوليكمرات6 لتحسين استقرار البروتين أثناء صياغة polybubble.</li>
	<li>شكل polybubbles استناداً إلى البروتوكول في الخطوة 2.</li>
	<li>تحضير محلول مستضد بإضافة 17.11 غرام من تريهالوس إلى 625 ميكرولتر من فيروس نقص المناعة البشرية gp120/41 مستضد.</li>
	<li>حقن يدويا 1 ميكرولتر من محلول مستضد في منتصف polybubble.</li>
	<li>فتح polybubbles في أيام 0 و 7 و 14 و 21 ، وسجل الفلوريس من المستضد مع الإثارة والانبعاثات الطول الموجي 497 نانومتر و 520 نانومتر ، على التوالي.</li>
	<li>تحديد وظيفة المستضد باستخدام المقايسة المناعية المرتبطة بالانزيم (ELISA) واستخدام الحليب غير الدهني 5٪ كمخزن عازل للحجب.</li>
</ol>6 - الإفراج عن البضائع
ملاحظة: يمكن استخدام جزيء صغير أو مستضد كنوع الحمولة
<ol><li>
جزيء صغير
	<ol>
<li>احتضان polybubbles مع acriflavine مركز في 400 ميكرولتر من الفوسفات المالحة العازلة (PBS) في 37 درجة مئوية، 50 درجة مئوية لبولي بوببلس PLGADA وعند 37 درجة مئوية، 50 درجة مئوية، 70 درجة مئوية لPCL / PCLTA polybubbles. ملاحظة: السبب الذي ونوصي بإجراء اختبار فوق درجات حرارة الجسم هو أ) محاكاة درجة الحرارة (50 درجة مئوية) التي يصل فيها البولي بوبل أثناء بالليزر على نانورود الذهب (AuNRs) داخل PCL وPLGA. و ب) تسريع عملية التحلل من PCL (50 درجة مئوية، 70 درجة مئوية).</li>
		<li>في كل نقطة زمنية، وجمع سراويل واستبدالها مع 400 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني جديد.</li>
		<li>استخدام قارئ لوحة لتحديد كثافة الفلوريسنس في عظمى جمعها. ملاحظة: استخدام ex/em من 416 نانومتر/514 نانومتر ل acriflavine.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Antigen
	<ol>
<li>احتضان polybubbles مع محورها بولفين الألبومين المصل (BSA)-488 في 400 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية، 50 درجة مئوية لبولي بوببلس PLGADA وعند 37 درجة مئوية، 50 درجة مئوية لPCL / PCLTA polybubbles.</li>
		<li>في كل نقطة زمنية، وجمع عظمى واستبدالها مع 400 μL برنامج تلفزيوني جديد.</li>
		<li>استخدام قارئ لوحة لتحديد كثافة الفلوريسنس في عظمى جمعها. استخدام السابقين / م من 497 نانومتر/520 نانومتر لBSA-488. ملاحظة: لا ينبغي إجراء دراسة الافراج عند 70 درجة مئوية لبولي بوبل PCL/PCLTA لتجنب تعريض المستضد لدرجة حرارة قصوى.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7- السمية
<ol><li>
قياس محتوى الكلور في polybubbles باستخدام تحليل تنشيط النيوترون (NAA)
	<ol>
<li>استخدام polybubbles التي تم lyophilized ل 2، 4، 6، 20، و 24 h لهذه الدراسة في 0.010 mBar فراغ وعند -85 درجة مئوية.</li>
		<li>قياس 5-9 ملغ من polybubbles ووضعها على قارورة الإشعاع LDPE.</li>
		<li>إعداد 1000 غرام / مل من محلول معايرة الكلور من المعهد الوطني للمعايير والتكنولوجيا (NIST) - حل المعايرة التي يمكن تتبعها.</li>
		<li>استخدام 1- ميغاوات مفاعل تريغا لتنفيذ الإشعاعات النيوترونية على كل عينة بمعدل فلونس نيوتروني قدره 9.1 ×10 12 /سم2·s ل 600 s.</li>
		<li>نقل polybubbles إلى قنينات غير المشعة.</li>
		<li>استخدم كاشف HPGe للحصول على أطياف أشعة غاما لمدة 500 s بعد فواصل تحلل 360 s.</li>
		<li>استخدام برنامج NAA من قبل كانبيرا للصناعات لتحليل البيانات.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
تحديد كمية محتوى الكلور الصادر من polybubbles باستخدام NAA
	<ol>
<li>احتضان polybubbles التي تم التجميل بين عشية وضحاها (في 0.010 مل 0 فراغ في 85 درجة مئوية) في 400 μL من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية.</li>
		<li>جمع اادفع في الأسابيع 1 و 2 و 3 بعد الحضانة.</li>
		<li>تحليل المواد الفائقة لمحتوى الكلور باستخدام NAA باستخدام نفس الأسلوب كما هو موضح أعلاه في الخطوة 7.1.</li>
	</ol>
</li>
</ol>8. أو إنر التوليف من قبل كيتلر، S.، وآخرون8
<ol><li>تحضير محلول البذر AuNR عن طريق خلط 250 ميكرولتر من 10 mM حمض الكلوروواريك (HAuCl4)،7.5 مل من 100 M 100 بروميد التريتيمونيوم (CTAB)، و 600 ميكرولتر من 10 mM الجليد البارد بوروهيدريد (NaBH4).</li>
	<li>تحضير حل النمو عن طريق خلط 40 مل من 100 mM CTAB، 1.7 مل من 10 مل HAuCl4،250 μL من نترات الفضة (AgNO3)،و 270 μL من 17.6 ملغ / مل حمض الاسكوربيك إلى أنبوب.</li>
	<li>مزيج بقوة 420 ميكرولتر من حل البذور مع حل النمو في 1200 دورة في الدقيقة لمدة 1 دقيقة. ثم اترك الخليط دون عائق ليتفاعل لمدة 16 ساعة.</li>
	<li>إزالة الكواشف الزائدة من الخليط عن طريق الطرد المركزي في 8000 × غرام لمدة 10 دقيقة والتخلص من supernatant.</li>
</ol>9 - إضفاء التحلل من الفلوروفيك على الـ AuNRs من قبل سليمان، و M.G.، وآخرون9
<ol><li>ضبط درجة حَسّة 1.5 مل من الـ CTAB-استقرت في الـ 10 باستخدام هيدروكسيد الصوديوم 1 mM (NaOH).</li>
	<li>حرك الحل مع 0.1 مل من 0.3 mM الميثيليد PEG (mPEG) thiol في 400 دورة في الدقيقة بين عشية وضحاها.</li>
	<li>مزيج PEGylated AuNRs مع 0.4 M دوديسيلامين (DDA) في الكلوروفورم في 500 دورة في الدقيقة لمدة 4 أيام.</li>
	<li>Pipet خارج الطبقة العضوية العلوية التي تحتوي على AuNRs hydrophobicized وتخزينها في 4 درجة مئوية حتى الاستخدام في المستقبل.</li>
</ol>10. NIR تفعيل polybubbles
<ol><li>اخلطي البوليمر (PLGADA أو PCL/PCLTA) مع محلول AuNRs المضروب في 1:9 (vol/vol).</li>
	<li>إضافة الضوئيات إلى البوليمر-أورار خليط في 0.005:1 (vol/vol).</li>
	<li>شكل polybubbles عن طريق حقن خليط البوليمر-أورار في 0.92 مل قارورة زجاجية مع 10٪ CMC (wt/vol) (الرجوع إلى الخطوة 2).</li>
	<li>علاج polybubbles في 254 نانومتر الطول الموجي لمدة 60 s في 2 W / cm2.</li>
	<li>فلاش تجميد في النيتروجين السائل لمدة 30 s وlyophilize بين عشية وضحاها في 0.010 mBar فراغ وعند -85 درجة مئوية.</li>
	<li>فصل polybubbles المجففة باستخدام ملقط وغسلها مع DI المياه لإزالة أي CMC المتبقية.</li>
	<li>احتضان polybubbles في 400 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية.</li>
	<li>تفعيل polybubbles باستخدام 801 نانومتر NIR الليزر في 8A لمدة 5 دقائق كل يوم اثنين والأربى والجمعة.</li>
	<li>اتخاذ الأشعة تحت الحمراء التطلعية (FLIR) صور من polybubble قبل وبعد تنشيط الليزر للحصول على قيم درجة الحرارة.</li>
	<li>حساب الاختلافات في درجة الحرارة بين قبل وبعد تنشيط الليزر على أساس قيم درجة الحرارة من الصور FLIR.</li>
</ol>

<ol><li>World Health Organization. Global Immunization: Worldwide Disease Incidence. , Children's Hospital of Philadelphia. https://www.chop.edu/centers-programs/vaccine-education-center/global-immunization/diseases-and-vaccines-world-view (2018).</li>
<li>Paul, A., Bera, M., Gupta, P., Singh, N. D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((o-Hydroxycinnamate+for+sequential+photouncaging+of+two+different+functional+groups+and+its+application+in+releasing+cosmeceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Organic+and+Biomolecular+Chemistry%22%5BJournal%5D)">o-Hydroxycinnamate for sequential photouncaging of two different functional groups and its application in releasing cosmeceuticals.</a> Organic and Biomolecular Chemistry. 17 (33), 7689-7693 (2019).</li>
<li>Kumari, A., Yadav, S. K., Yadav, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biodegradable+polymeric+nanoparticles+based+drug+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Colloids+and+Surfaces+B%3A+Biointerfaces%22%5BJournal%5D)">Biodegradable polymeric nanoparticles based drug delivery systems.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 75 (1), 1-18 (2010).</li>
<li>Dai, C., Wang, B., Zhao, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microencapsulation+peptide+and+protein+drugs+delivery+system%5BTitle%5D)+AND+%22Colloids+and+Surfaces+B%3A+Biointerfaces%22%5BJournal%5D)">Microencapsulation peptide and protein drugs delivery system.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 41 (2-3), 117-120 (2005).</li>
<li>Souery, W. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+and+quantifying+the+stability+of+amino+acid-based+cargo+within+polymeric+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Controlling and quantifying the stability of amino acid-based cargo within polymeric delivery systems.</a> Journal of Control Release. 300, 102-113 (2019).</li>
<li>Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+protein+formulations%5BTitle%5D)+AND+%22Protein+Science%22%5BJournal%5D)">Advanced protein formulations.</a> Protein Science. 24 (7), 1031-1039 (2015).</li>
<li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+ultraviolet-curable%2C+core-shell+vaccine+formed+via+phase+separation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research+Part+A%22%5BJournal%5D)">An ultraviolet-curable, core-shell vaccine formed via phase separation.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. , (2019).</li>
<li>Kittler, S., Hickey, S. G., Wolff, T., Eychmüller, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Easy+and+Fast+Phase+Transfer+of+CTAB+Stabilised+Gold+Nanoparticles+from+Water+to+Organic+Phase%5BTitle%5D)+AND+%22Zeitschrift+f%C3%BCr+Physikalische+Chemie%22%5BJournal%5D)">Easy and Fast Phase Transfer of CTAB Stabilised Gold Nanoparticles from Water to Organic Phase.</a> Zeitschrift für Physikalische Chemie. 229, 235(2015).</li>
<li>Soliman, M. G., Pelaz, B., Parak, W. J., del Pino, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+Transfer+and+Polymer+Coating+Methods+toward+Improving+the+Stability+of+Metallic+Nanoparticles+for+Biological+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry+of+Materials%22%5BJournal%5D)">Phase Transfer and Polymer Coating Methods toward Improving the Stability of Metallic Nanoparticles for Biological Applications.</a> Chemistry of Materials. 27 (3), 990-997 (2015).</li>
<li>Arun Kumar, S., Good, J., Hendrix, D., Yoo, E., Kim, D., Deo, K. A., Jhan, Y. Y., Gaharwar, A. K., Bishop, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoengineered+Light-Activatable+Polybubbles+for+On%3FDemand+Therapeutic+Delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Funct.+Mater%22%5BJournal%5D)">Nanoengineered Light-Activatable Polybubbles for On?Demand Therapeutic Delivery.</a> Adv. Funct. Mater. , 2003579(2020).</li>
<li>Wuthrich, P., Ng, S. Y., Fritzinger, B. K., Roskos, K. V., Heller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulsatile+and+delayed+release+of+lysozyme+from+ointment-like+poly%28ortho+esters%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Pulsatile and delayed release of lysozyme from ointment-like poly(ortho esters).</a> Journal of Controlled Release. 21 (1), 191-200 (1992).</li>
<li>Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Instability%2C+stabilization%2C+and+formulation+of+liquid+protein+pharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Instability, stabilization, and formulation of liquid protein pharmaceuticals.</a> International Journal of Pharmaceutics. 185 (2), 129-188 (1999).</li>
<li>Wong, D. Y., Hollister, S. J., Krebsbach, P. H., Nosrat, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly%28epsilon-caprolactone%29+and+poly+%28L-lactic-co-glycolic+acid%29+degradable+polymer+sponges+attenuate+astrocyte+response+and+lesion+growth+in+acute+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering%22%5BJournal%5D)">Poly(epsilon-caprolactone) and poly (L-lactic-co-glycolic acid) degradable polymer sponges attenuate astrocyte response and lesion growth in acute traumatic brain injury.</a> Tissue Engineering. 13 (10), 2515-2523 (2007).</li>
<li>Davoodi, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+delivery+systems+for+programmed+and+on-demand+release%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Drug delivery systems for programmed and on-demand release.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 132, 104-138 (2018).</li>
<li>Huang, Y. C., Lei, K. F., Liaw, J. W., Tsai, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+laser+intensity+activated+plasmonic+gold+nanoparticle-generated+photothermal+effects+on+cellular+morphology+and+viability%3A+a+real-time%2C+long-term+tracking+and+monitoring+system%5BTitle%5D)+AND+%22Photochemical+and+Photobiological+Sciences%22%5BJournal%5D)">The influence of laser intensity activated plasmonic gold nanoparticle-generated photothermal effects on cellular morphology and viability: a real-time, long-term tracking and monitoring system.</a> Photochemical and Photobiological Sciences. 18 (6), 1419-1429 (2019).</li>
<li>Link, S., Burda, C., Nikoobakht, B., El-Sayed, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-Induced+Shape+Changes+of+Colloidal+Gold+Nanorods+Using+Femtosecond+and+Nanosecond+Laser+Pulses%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physical+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Laser-Induced Shape Changes of Colloidal Gold Nanorods Using Femtosecond and Nanosecond Laser Pulses.</a> The Journal of Physical Chemistry B. 104 (26), 6152-6163 (2000).</li>
<li>U.S. Environmental Protection Agency. Chlorine. , https://www.epa.gov/sites/production/files/2016-09/documents/chlorine.pdf (2000).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

التكنولوجيات والتحديات الحالية يشيع استخدام الجسيمات الدقيقة والنانوية القائمة على المستحلب كناقلات توصيل المخدرات. على الرغم من أن حركية الإفراج عن البضائع من هذه الأجهزة قد درست على نطاق واسع، والسيطرة على حركية إطلاق انفجار كان تحديا كبيرا11. كما أن براعة الشحن ومدى قدرتها الوظيفية محدودان في النظم القائمة على المستحلب بسبب تعرض البضائع للمذيبات الزائدة المائعة والعضوية. البضائع القائمة على البروتين غالبا ما تكون غير متوافقة مع الجسيمات الدقيقة والنانوية بسبب إمكانية التككر ...

ويؤدي تغطية التحصين المحدودة إلى وفاة 3 ملايين شخص بسبب الأمراض التي يمكن الوقاية منها باللقاحاتتحديداً 1. وتؤدي ظروف التخزين والنقل غير الملائمة إلى هدر اللقاحات الوظيفية، وبالتالي تسهم في خفض التحصين العالمي. وبالإضافة إلى ذلك، فإن عدم اكتمال التطعيم بسبب عدم الالتزام بجداول اللقاحات المطلوبة يتسبب أيضاً في تغطية محدودة باللقاحات، وتحديداً في البلدان النامية2. ويلزم القيام بزيارات متعددة للعاملين الطبيين خلال الفترة الموصى بها لتلقي الجرعات المعززة، مما يحد من النسبة المئوية للسكان الذين يحصلون على التطعيم الكامل. ومن ثم، هناك حاجة إلى وضع استراتيجيات جديدة لتقديم اللقاحات الخاضعة للرقابة للتغلب على هذه التحديات.
وتشمل الجهود الحالية نحو تطوير تكنولوجيات إيصال اللقاحات النظم البوليمرية المستحلب3،4. ومع ذلك، غالباً ما تتعرض البضائع إلى كمية أكبر من المذيبات العضوية التي يمكن أن تسبب تراكم وdenaturation، وتحديدا في سياق البضائع القائمة على البروتين5،6. لقد قمنا بتطوير منصة جديدة لتوصيل اللقاح ، "polybubbles" ، التي يمكن أن تضم مقصورات شحن متعددة مع تقليل حجم البضائع التي تتعرض للمذيبات7. على سبيل المثال، في منصة القذيفة الأساسية متعددة الزهاء، يتم حقن جيب شحن قطره 0.38 مم (SEM) في وسط بولي بوبل 1 مم. وفي هذه الحالة، فإن مساحة سطح البضائع المعرضة لمذيب عضوي ستكون حوالي 0.453 مم2. بعد النظر في كثافة التعبئة من المجالات (الجسيمات الدقيقة) داخل المجال (مستودع البضائع)، والحجم الفعلي للجسيمات الدقيقة (10 ميكرومتر في القطر) التي يمكن أن يصلح في مستودع 0.17 مم3. حجم الجسيمات الدقيقة واحد هو 5.24x10-8 ملم3، وبالتالي فإن عدد الجسيمات الدقيقة التي يمكن أن تناسب المستودع هو ~ 3.2x106 الجسيمات. إذا كان كل الجسيمات الدقيقة لديها 20 جيب البضائع (نتيجة مستحلب مزدوج) من 0.25 ميكرومتر القطر، ثم مساحة السطح من البضائع المعرضة للمذيبات العضوية هو 1274 مم2. مستودع البضائع داخل polybubble وبالتالي سيكون لها ~ 2800-fold أقل مساحة السطح المعرضة للمذيبات العضوية مقارنة مع تلك التي من البضائع العضوية المذيبات المعرضة في الجسيمات الدقيقة. وبالتالي يمكن أن تقلل من منصة البوليستر لدينا كمية البضائع المعرضة للمذيبات العضوية التي يمكن أن تسبب خلاف ذلك تجميع البضائع وعدم الاستقرار.
يتم تشكيل polybubbles على أساس مبدأ فصل المرحلة حيث يتم حقن البوليستر في المرحلة العضوية في محلول مائي مما يؤدي إلى فقاعة كروية. ويمكن بعد ذلك حقن البضائع في المرحلة مائي في وسط polybubble. ويمكن أن يكون من الممكن أن يتحقق آخر مقصورة الشحن داخل polybubble عن طريق خلط شحنة مختلفة مع قذيفة البوليمر. وسوف polybubble في هذه المرحلة تكون مرنة ، وسوف بعد ذلك الشفاء يؤدي إلى هيكل polybubble الصلبة مع البضائع في الوسط. تم اختيار polybubbles كروية على الأشكال الهندسية الأخرى لزيادة قدرة البضائع داخل polybubble مع التقليل من الحجم الكلي للبولي بوبل. تم اختيار polybubbles مع البضائع في المركز لإثبات تأخر إطلاق انفجار. وأدرجت أيضا polybubbles مع الأشعة تحت الحمراء القريبة (NIR)- حساسة (أي، ثيرانوستيك تمكين) عامل، وهي نانورود الذهب (AuNR)، للتسبب في زيادة في درجة حرارة polybubbles. ويمكن أن ييسر هذا التأثير التحلل بشكل أسرع ويمكن استخدامه للتحكم في الحركة في التطبيقات المستقبلية. في هذه الورقة، ونحن وصف نهجنا لتشكيل وتوصيف polybubbles، لتحقيق تأخر إطلاق انفجار من polybubbles، ودمج AuNR داخل polybubbles للتسبب NIR-التنشيط.

<table><tbody><tr><td>1-Step Ultra Tetramethylbezidine (TMB) - مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) محلول الركيزة</td><td>الحراري العلمي</td><td>34028</td><td></td></tr><tr><td>2-Hydroxy-2-methylpropiophenone</td><td>TCI AMERICA</td><td>H0991</td><td></td></tr><tr><td>450 نانومتر Stop Solution للركيزة</td><td>TMB Abcam</td><td>ab17152</td><td></td></tr><tr><td>أكريلويل كلوريد</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A24109-100G</td><td></td></tr><tr><td>Acriflavine</td><td>Chem-Impex International</td><td>22916</td><td></td></tr><tr><td>اللامائي إيثيل الأثير</td><td>فيشر الكيميائية</td><td>E138-500</td><td></td></tr><tr><td>الجسم المضاد لفيروس نقص المناعة البشرية1 gp120 المترافق مع بيروكسيداز الفجل الحار (HRP)ألبومين</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>مصل الأبقار (BSA)</td><td>كواشف فيشر الحيوية</td><td>BP9700100</td><td></td></tr><tr><td>BSA-CF488 صبغة مترافقة</td><td>Invitrogen</td><td>A13100</td><td></td></tr><tr><td>حمض البروموساليسيليك</td><td>أكروس أورجانكس</td><td>AC162142500</td><td></td></tr><tr><td>كربوكسي ميثيل سلولوز (CMC)</td> <td>ميليبور سيجما</td><td>80502-040</td><td></td></tr><tr><td>بروميد سينتريمونيوم (CTAB)</td> <td>MP بيوميديكلز</td><td>ICN19400480</td><td></td></tr><tr><td>الكلوروفورم</td><td>فيشر الكيميائي</td><td>C2984</td><td></td></tr><tr><td>طلاء عازلة</td><td>Abcam</td><td>ab210899</td><td></td></tr><tr><td>ثنائي كلورو الميثان (DCM)</td><td>سيجما ألدريتش</td><td>270997-1L</td><td></td></tr><tr><td>ثنائي إيثيل الأثير</td><td>فيشر كيميكال</td><td>E1384</td><td></td></tr><tr><td>دودياسيل أمين</td><td>أكروس أورجانيكس</td><td>AC117665000</td><td></td></tr><tr><td>دوكسوروبيسين هيدروكلوريد</td><td>فيشر الكواشف الحيوية</td><td>BP251610</td><td></td></tr><tr><td>حمض الأسكوربيك</td><td>أكروس أورجانكس</td><td>A61 100</td><td></td></tr><tr><td>ليجاتو 100 مضخة حقنة</td><td>دينار كويتي علمي</td><td>14 831 212</td><td></td></tr><tr><td>mPEG thiol</td><td>Laysan Bio</td><td>NC0702454</td><td></td></tr><tr><td>حليب جاف خالي الدسم</td><td>من Andwin Scientific</td><td>NC9022655</td><td></td></tr><tr><td>كربونات البوتاسيوم</td><td>Acros Organics</td><td>AC424081000</td><td></td></tr><tr><td>عازلة محلول ملحي</td><td>من الفوسفات كواشف فيشر الحيوية</td><td>BP3991</td><td></td></tr> <tr><td>(بولي (كابرولاكتون)</td> <td>سيجما ألدريتش</td><td>440744-250 جم</td><td></td></tr> <tr><td>(بولي(كابرولاكتون) تريول</td><td>أكروس أورجانكس</td><td>AC190730250</td><td></td></tr><tr><td>بولي (حمض اللاكتيك كو جليكوليك) دياكريلات</td><td>CMTec</td><td>280050</td><td></td></tr><tr><td>كربونات البوتاسيوم</td><td>أكروس أورجانكس</td><td>AC424081000</td><td></td></tr><tr><td>المؤتلف HIV1 gp120 + gp41 بروتين</td><td>Abcam</td><td>ab49054</td><td></td></tr><tr><td>نترات الفضة</td><td>Acros Organics</td><td>S181 25</td><td></td></tr><tr><td>صوديوم بوروهيدريد</td><td>فيشر كيميكال</td><td>S678 10</td><td></td></tr><tr><td>حمض رباعي كلورو أوريك</td><td>فيشر كيميكال</td><td>G54 1</td><td></td></tr><tr><td>تريهالوز</td><td>أكروس أورجانكس</td><td>NC9022655</td><td></td></tr><tr><td>ثلاثي إيثيل أمين</td><td>أكروس أورجانكس</td><td>AC157910010</td><td></td></tr></tbody></table>

إنتاج الأشعة تحت الحمراء القريبة الحساسة، منصة تسليم لقاح كور شل

Production of Near-Infrared Sensitive, Core-Shell Vaccine Delivery Platform

إن استراتيجيات إيصال اللقاحات التي يمكن أن تحد من تعرض البضائع للمذيبات العضوية مع تمكين الملامح الجديدة للإطلاق هي ذات أهمية حاسمة لتحسين تغطية التمنيع في جميع أنحاء العالم. هنا ، يتم تقديم رواية قابلة للحقن ، والأشعة فوق البنفسجية ، curt وتأخر إطلاق انفجار تمكين منصة توصيل اللقاح تسمى polybubbles. تم حقن البضائع في البولي بوببلس القائم على البوليستر التي تشكلت في 10٪ carboxymethycellulose - القائم على محلول مائي. تتضمن هذه الورقة بروتوكولات للحفاظ على الشكل الكروي للبولي بوبلز وتحسين وضع البضائع والاحتفاظ بها لزيادة كمية البضائع داخل polybubbles. ولضمان السلامة، تم تحليل محتوى المذيبات المكلورة داخل البولي بوبل باستخدام تحليل تنشيط النيوترونات. وأجريت دراسات الإفراج مع جزيئات صغيرة والبضائع داخل polybubble لتأكيد تأخر إطلاق انفجار. وللمزيد من إظهار إمكانية تسليم البضائع عند الطلب، كانت ألياف النانو مزجت داخل قشرة البوليمر لتمكين التنشيط بالليزر القريب من الأشعة تحت الحمراء.

وتتميز polybubbles على نطاق واسع باستخدام SEM وNAA. تم تمركز البضائع بنجاح لنتيجة في إطلاق انفجار تأخر. كما تم تنشيط بوليسات متعددة بنجاح بالليزر بسبب وجود AuNRs داخل polybubbles.
توصيف polybubble أدى polybubbles حقنها في محلول مائي دون CMC في بولبوبل بالارض بسبب ملامستها مع الجزء السفلي من الزجاج القارورة (الشكل 1A, B). لوحظ التسطيح الجزئي عندما تم استخدام محلول...

توضح هذه المقالة البروتوكولات المستخدمة لإنتاج منصة جديدة لتوصيل اللقاح، "polybubbles"، لتمكين إطلاق انفجار متأخر. واستخدمت البوليسترات بما في ذلك بولي (حمض اللاكتيك شارك الجليكوليك) والبولي كابرولكتون لتشكيل polybubbles والجزيئات الصغيرة والمستضدات واستخدمت كبضائع.

Vaccine delivery strategies that can limit the exposure of cargo to organic solvent while enabling novel release profiles are crucial for improving ...

يمكن أن يساعد هذا البروتوكول في الحفاظ على استقرار الشحنة ، والتي يمكن أن تكون جزيئات صغيرة وبروتينات ، من خلال استخدام polybubble ، والتي يمكن أن تقلل بدورها من تفاعلات الكربون مع المذيبات. ويمكن استخدام هذه التقنية الجديدة لتحسين التغطية باللقاحات في البلدان النامية، حيث أن وظائف اللقاحات يمكن أن تتعرض للخطر في كثير من الأحيان بسبب عدم كفاءة مرافق النقل والتخزين. لتصنيع polybubbles، استخدم أولا ماصة نقل ملليلتر واحد لإضافة 800 ميكرولتر من 10٪ CMC في 0.92 ملليلتر الزجاج القارورة.لتجميع PCLTA، مزيج 1،000 غرام لكل ملليلتر من 14 كيلودالون PCL في 200 ميكرولترات من DCM. لتجميع PLGADA، مزيج 1،000 غرام لكل ملليلتر من خمسة كيلودالون PLGADA في 200 ميكرولترات من الكلوروفورم. مزيج الضوئي مع خليط البوليمر من الفائدة في نسبة 0.005 إلى 1 وتحميل 200 ميكرولترات من الحل الناتج في حقنة زجاجية ملليلتر واحدة محمولة على مضخة حقنة متصلة أنبوب الفولاذ المقاوم للصدأ الاستغناء مع قطر داخلي من 0.016 بوصة.باستخدام محرك صغير للسيطرة على الحركة الأمامية والخلفية للأنبوب البوليمر، حقن البوليمر في 10٪ CMC في القارورة الزجاجية لتشكيل polybubbles وعلاج polybubbles تحت الأشعة فوق البنفسجية في طول موجة نانومتر 254 لمدة 60 ثانية في اثنين من واط لكل سنتيمتر مربع، ثم فلاش تجميد polybubbles في النيتروجين السائل لمدة 30 ثانية وlyophilize الناقلين بين عشية وضحاها في 0.01 ملليبار فراغ في ناقص 85 درجة مئوية. لتمركز البضائع من الفائدة داخل polybubble، اخلط الحمولة مع 5٪ CMC في دوار بين عشية وضحاها لزيادة لزوجة البضائع قبل حقن يدويا اثنين microliters من خليط البضائع في polybubble. عندما تم حقن كل من البضائع، وإعادة علاج، وتجميد فلاش، وlyophilize polybubble حقن كما أظهرت للتو.في صباح اليوم التالي، استخدم ملقط لفصل البولي بوبل من CMC المجففة وغسل البولي بوبل بالماء الأيون لإزالة أي CMC المتبقية. ثم قطع polybubble في نصف وصورة النصفين عن طريق المجهر confocal لضمان أن البضائع تركزت. بالنسبة لإطلاق البضائع جزيء صغير، احتضان polybubbles مع acriflavine تركزت في 400 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية لطول الحضانة المناسبة.في كل نقطة زمنية تجريبية، وجمع عظمى وإضافة 400 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني جديد إلى القارورة. ثم استخدام قارئ لوحة لتحديد كثافة الفلوريسنس من supernatant التي تم جمعها. لتفعيل الأشعة تحت الحمراء القريبة، مزيج حل البوليمر مع قضبان نانو الذهب المهعور بنسبة واحد إلى تسعة وإضافة مبادر الصورة في 0.005 إلى 1 النسبة.حقن الخليط الناتج في 0.92 ملليلتر الزجاج قارورة تحتوي على 800 ميكرولترات من 10٪ CMC وعلاج polybubbles تحت الأشعة فوق البنفسجية كما هو موضح. بعد تجميد فلاش وlyophilization كما هو موضح، وغسل polybubbles بالماء deionized واحتضان الناقلين في 400 microliters من برنامج تلفزيوني في 37 درجة مئوية لفترة الحضانة المناسبة. في نهاية الحضانة، والحصول على صورة الأشعة تحت الحمراء يبحث إلى الأمام من polybubble قبل وبعد تفعيل polybubbles مع ليزر 801 نانومتر بالقرب من الأشعة تحت الحمراء في ثماني أمبير لمدة خمس دقائق ثلاث مرات في الأسبوع لمدة أربعة أسابيع لبولي بوببلس PLGADA و 14 أسبوعا لبولي بوبل PCL-PCLTA.في كل نقطة زمنية تجريبية، وجمع عظمى وإضافة 400 ميكرولترات من برنامج تلفزيوني جديد إلى القارورة. ثم حساب الاختلافات في درجة الحرارة بين polybubbles قبل وبعد تنشيط الليزر على أساس قيم درجة الحرارة من الصور الأشعة تحت الحمراء تتطلع إلى الأمام. إضافة 10٪ على أساس CMC حل مائي النتائج في تعليق متعدد بوبل كاملة لصيانة ناجحة من الزخرق.حقن البضائع في polybubble في غياب نتائج CMC في تسرب وما يترتب على ذلك من عدم الاحتفاظ البضائع داخل polybubble. لمعالجة هذا التسرب، يمكن زيادة لزوجة PCLTA باستخدام كربونات البوتاسيوم المعزولة بعد نهاية وضع حد للبولي كاببروكتون مع الترايكاريلات ويمكن زيادة لزوجة البضائع عن طريق خلط البضائع مع 5٪ CMC. اللزوجة من بوليبوببل PLGADA كافية لتسهيل تمركز البضائع ولا تتطلب تعديل عن طريق كربونات البوتاسيوم.لاحظ أنه لا يوجد فرق مهم إحصائيا في الكفاءة الملزمة للجسم المضاد لوحظ بعد خلط فيروس نقص المناعة البشرية gp120/41 مستضد مع وبدون تريهالوس قبل حقن polybubble. ويلاحظ تأخر إطلاقات انفجار في polybubbles PLGADA مع acriflavine في منتصف في اليوم 19 لبولي بوبلز المحتضنة في 37 درجة مئوية وفي اليوم الخامس لبولي بوبلز المحتضنة في 50 درجة مئوية. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن PLGADA polybubbles وPCL وPCLTA polybubbles التي تحتوي على قضبان نانو الذهب بنجاح الليزر تنشيط عدة مرات.عند تشكيل polybubbles، يرجى الحرص على حماية الكواشف من الضوء وأيضا لاستخدام الحلول على الفور. بعد تطوير هذه التكنولوجيا، أردنا أيضا استكشاف أتمتة هذه العملية لتوسيع نطاق إنتاج polybubble.

production-near-infrared-sensitive-core-shell-vaccine-delivery

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

يصف هذا البروتوكول إجراء دراسة عامة لمستقبلات ملزمة المؤتلف المجال (RBD) القائم على إنتاج لقاحات الوحيدات ضد السارس. وهي تشمل أساليب ترنسفكأيشن والتعبير عن بروتين في الخلايا RBD 293T ، وتحصين الفئران مع RBD وكشف النشاط تحييد الأمصال باستخدام الماوس pseudovirus السارس أنشئت مقايسة التعادل.

بروتوكول لقاحات مرض السارس المؤتلف RBD المستندة : إعداد البروتين ، والكشف عن تطعيم الحيوانات تحييد

يوضح هذا الفيديو طريقة لتوليد لقاحات حويصلة الغشاء الخارجي متعددة التكافؤ (OMV). يتم نقل خلايا الثدييات للتعبير عن المستضدات الفيروسية المدمجة في علامة SpyTag وعلامة بولي هيستيدين. ثم يتم تنقية هذه المستضدات باستخدام عمود تقارب حمض النيكل والنيتريلوترياتيك (Ni-NTA). يتم خلط المستضد المنقى مع حويصلات الغشاء الخارجي التي تعبر عن بروتين SpyCatcher (SC) المرتبط بالسطح. ترتبط مستضدات متعددة تساهميا ب SpyCatchers عبر SpyTags (ST) ، مما يؤدي إلى إنشاء OMVs تعرض المستضد ، وتعمل كلقاح متعدد التكافؤ.

توليد لقاح حويصلة غشاء خارجي متعدد التكافؤ

يوضح هذا الفيديو طريقة لتوليد فقاعة بوليمر أو منصة جديدة قائمة على الفقاعات المتعددة تتيح إطلاق الانفجار المتأخر. تستخدم البوليمرات القائمة على البوليستر لتشكيل الفقاعات المتعددة ذات الهيكل الأساسي ، ويمكن استخدام الجزيئات والمستضدات الصغيرة كبضائع.

تقنية لإنشاء منصة توصيل جديدة لإطلاق الانفجار المتأخر للجزيئات

يوضح هذا الفيديو طريقة لتوليد لقاح mRNA مرشح باستخدام الجسيمات النانوية البوليمرية. يتفاعل البوليمر الكاتيوني مع mRNA سالب الشحنة ، مكونا تعدد الإرسال. يؤدي تكوين polyplexes إلى استقرار mRNA ، مما يجعله مرشحا محتملا للقاحات mRNA المستقبلية في تطبيقات العلاج المناعي.

صياغة الجسيمات النانوية المحملة بالحمض النووي الريبي المرسال لأغراض التطعيم

وترد هنا طريقة مفصلة تصف تنقية الجسيمات النانوية البروتينية ذاتية التجميع (SAPNs) وإعادة طيها وتوصيفها لاستخدامها في تطوير اللقاحات.

إنتاج E.القولونية - أعرب الذاتي تجميع البروتين الجسيمات النانوية لللقاحات التي تتطلب عرض الإبإبيلة الانتهازية

يصف هذا البروتوكول استخدام مجموعات تعبير البروتين التجارية الخالية من الخلايا لإنتاج بروتينات غشائية مدعومة في القرص النانوي يمكن استخدامها كمستضدات في لقاحات الوحدات الفرعية.

إنتاج متدرج خال من الخلايا وإضافة مساعدة إلى بروتين الغشاء الخارجي الرئيسي المؤتلف من الكلاميديا موريداروم لتطوير اللقاح

يصف البروتوكول الحالي الهندسة الحيوية للحويصلات الغشائية الخارجية بأنها منصة لقاح "التوصيل والعرض" ، بما في ذلك الإنتاج والتنقية والاقتران الحيوي والتوصيف.

منصة لقاح الجسيمات النانوية "التوصيل والعرض" القائمة على حويصلات الغشاء الخارجي التي تعرض مجال ربط مستقبلات SARS-CoV-2

هنا ، نقدم طرقا مفصلة لإعداد وتقييم لقاح ورم مستحلب نانوي ذاتي التركيب في المختبر وفي الجسم الحي.

التحضير والخصائص والسمية وتقييم الفعالية للقاح ورم مستحلب نانوي ذاتي التجميع ذاتيا في المختبر وفي الجسم الحي

تصف هذه الطريقة تغليف مستضد داء الكلب إلى جسيمات دقيقة بوليمرية قابلة للتحلل الحيوي ذات خصائص هيكلية ومادية تمكن من إطلاق النبض بعد تأخير محدد مسبقا. يؤكد تقييم مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) للمستضد المسترد من قلب الجسيمات وجود بروتين سكري سليم لفيروس داء الكلب الثلاثي من خلال تصنيع الجسيمات.

تصنيع الجسيمات الدقيقة البوليمرية النابضة التي تغلف مستضد داء الكلب

في هذا البروتوكول ، قمنا بتطوير حمض الريتينويك المغلف بمستحلب نانوي كاتيوني (RA) لاستخدامه كمساعد لتعزيز الاستجابات الجهازية والمخاطية الخاصة بالمستضد. من خلال إضافة التهاب المفاصل الروماتويدي المعتمد من إدارة الغذاء والدواء إلى المستحلب النانوي ، تم تعزيز sIgA الخاص بالمستضد في المهبل والأمعاء الدقيقة بعد الحقن العضلي للمستحلب النانوي.

حمض الريتينويك المغلف بمستحلب النانو الموجبة كمساعد لتعزيز الاستجابات الجهازية والمخاطية الخاصة ب OVA

اكتشف منصة تسليم اللقاحات باستخدام فقاعات البوليمر الحساسة للأشعة تحت الحمراء القريبة، والتي تحافظ على استقرار الحمولة وتتيح الإطلاق المؤجل. تُحسّن هذه التقنية توزيع اللقاحات في المناطق ذات الموارد المحدودة.

إنتاج الأشعة تحت الحمراء القريبة الحساسة، منصة تسليم لقاح كور شل

استكشف المزيد من الفيديوهات