استهداف الأمعاء الدقيقة للفئران: التسريب طويل الأجل في الشريان السينتيري المتفوق

تعريب الشريان المتوسط متفوقة في الفئران من الصعب وانها لا تستخدم في كثير من الأحيان كنموذج تجريبي. هذه التقنية تجعل من الممكن لأداء التكشير وظيفية ويفتح مجالا للتجارب مع آثار مرور الأولى من الأدوية داخل الشرايين. هذا الأسلوب يتجنب النزيف والتجلط في حين الموافقة على تعقيب الشريان المتوسط متفوقة.

والسماح لضخ على المدى الطويل من المخدرات في حر نسبيا الذي يمكن أن يأكل والتحرك. قد تستفيد الأبحاث الدوائية على الأدوية النشطة في الأمعاء بشكل كبير من هذه التقنية. لا يوجد بديل لدراسة تأثير مرور واحد مباشر من الدواء.

تبدأ بقطع القنية أكبر. ثم قطع القنية الصغيرة، وإدراجها سنتيمتر واحد في القنية أكبر. إصلاح القنيتين جنبا إلى جنب مع الغراء سيانواكريلات تجنب انسداد التجويف.

بعد ذلك، قم بتوصيل أقصى القنية الأكبر بمحول كعب التجويف المثبت على حقنة ملليلتر واحدة مليئة بالمحلول الملحي. شحذ غيض الحرة من قنية أصغر مع مقص لتسهيل إدخال القسطرة في فرع الشريان المتوسط متفوقة. تحقق من زنة القنية عن طريق التنظيف بالمحلول المالح.

حلق الفراء من المناطق الجراحية للفئران المخدرة ، بما في ذلك البطن لفرع الشريان المتوسطي المتفوق أو تعقيب SMA ، والجزء الخلفي من الرقبة لخروج القنية. تنظيف المناطق الجراحية بشكل مطهر. ووضع الحيوان في وضع ية يشل الأطراف الأربعة.

استخدام شفرة مشرط لفتح جدار البطن مع شق ثلاثة سنتيمترات على التوالي على خط الوسط من منطقة المعدة ميسو من خلال جميع طائرات البطن في الصفاق. ضع شاشات منقوعة بمحلول ملحي حول شق استئصال البطن، باستخدام الغرز للحفاظ على الشق الجراحي مفتوحا. استخدام مسحات القطن لتحديد وفضح الأمعاء الدقيقة، واستخراج mesentery من قطع البطن ووضعها إلى أسفل على الشاش.

التعرف على SMA من خلال الشعور بالنبض. باستخدام مسحات القطن، وفصل الدهون السينتيرية والكشف عن SMA واثنين إلى ثلاثة من فروعها القريبة. اختيار فرع قريب من SMA التي هي كبيرة بما فيه الكفاية للسماح للمناورات الجراحية من cannulation.

ربط هذا الفرع ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات المصب من أصله للسماح توسعها عن طريق الحفاظ على خياطة ينتهي لفترة كافية ليتم التلاعب بها في وقت لاحق. وضع دعم جامدة تحت فرع من SMA وعقد أقصى من القنية الصغيرة باستخدام ملقط ثم سحب خياطة ينتهي مع اليد الأخرى لإجهاد السفينة وتسهيل دخول القسطرة. عقد غيض من القنية في زاوية 20 درجة من الطائرة من السفينة في الاتجاه المعاكس لتدفق الدم.

ثم اضغط بخفة على الطرف لاختراق جدار الشريان وإدراج القنية. مواصلة إدخال القنية لسنتيمتر واحد في فرع الشريان قريبة من أصل من SMA. إصلاح القنية إلى الشريان مع عقدة جراحية، والتحقق من أدائها الصحيح عن طريق مسح ملليلتر واحد من محلول ملحي معقم أو عن طريق أخذ عينات من الدم.

إجراء شق سنتيمتر واحد في المنطقة الخلفية من الرقبة واستيعاب صمام كروي. ثم تمرير القنية من الوصول إلى استئصال البطن إلى صمام وضعت في الرقبة من خلال الأنسجة تحت الجلد وإغلاق أقصى القنية مع قابس القسطرة لتجنب تدفق الهواء. استبدل الصمام الصغير في تجويف البطن واغلق جدار البطن.

ثم تأمين صمام إلى الجلد المقبل مع غرز. فستان الجرذ مع سترة لحماية صمام زر. حماية الجزء المكشوف من القنية بقضيب فولاذي أثناء التسريب وتأمينه للصمام.

ربط أقصى العلبة بمضخة elastomeric مليئة 50 ملليلتر من محلول ملحي معقم، والمضي قدما في ضخ لمدة 24 ساعة. بعد التسريب ، قم بتفكيك نظام التسريب الخارجي للحيوان عن طريق إزالة المضخة والسترة وقضيب الصلب والصمام من الجرذ. إغلاق وقطع القنية لأنها من الرقبة، وترك أقصى تحت الجلد من الرقبة بعد خياطة الجرح.

في هذه الدراسة، خضع 15 فأرا لهذا الإجراء، وزاد متوسط المداهم اليومي من الطعام والماء تدريجيا حتى أصبح طبيعيا بعد ثلاثة أيام. كما كانت زيادة الوزن منتظمة وتتزايد تدريجيا حتى نهاية فترة المراقبة. بعد 24 ساعة، كانت هناك بقايا ملحية في مضختين بالون فقط، في حين أن ال 13 الأخرى كانت فارغة تماما.

وعلاوة على ذلك، بعد فترة التسريب، كانت 12 قنية لا تزال تعمل لكل من أخذ عينات الدم والضخ المالح، في حين أن ثلاثة قنية لم تعد براءة اختراع. في التشريح، كان 100٪ من القنية موجودة في فرع SMA. ولم يكن لدى أي فئران علامات على نقص التروية في الأمعاء أو نزيف داخل الأمعاء.

تم الحصول على تصوير الأوعية في خمسة فئران عن طريق حقن وسيط التباين iodonated في القنية المتوسطة. لوحظت الدائرة الشريانية المتوسطة ، ولا سيما SMA وفروعها الرئيسية دون انتشار متوسط التباين في البطن ، مما يؤكد أن القنية كانت في وضع جيد وثابتة على فرع SMA. براءة اختراع، والخراب الدقيق للفرع لتجسير ربط السفينة المصب تمرير خياطة تحت السفينة واختيار الموقف الأنسب لثقب وإدراج القنية هي أهم جوانب هذا البروتوكول.

الأخطاء غير قابلة للصحح.