تصنيع الواجهة العصبية الطرفية التتجدد المركبة (C-RPNI) في الجرذ البالغ

بروتوكولنا مهم من حيث أنه يسمح في وقت واحد تضخيم إشارة الأعصاب الحركية جنبا إلى جنب مع توفير تحفيز الأعصاب الحسية afferent من خلال الاستفادة من واجهة الأعصاب المحيطية البيولوجية. يمكن أن توفر هذه التقنية جهازًا اصطناعيًا يشبه الحياة لأولئك الذين يعانون من عمليات البتر حيث يسمح C-RPNI بالتحكم في المحركات المتزامنة والتغذية المرتدة الحسية داخل نفس واجهة الأعصاب الطرفية. العديد من أولئك الذين يعيشون مع بتر التخلي عن الأجهزة العصبية المتقدمة لأن الأجهزة تفتقر إلى السيطرة بديهية وردود الفعل الحسية ذات مغزى.

هذه التقنية توفر كلا ويمكن منع التخلي عن الجهاز الاصطناعي. ويمكن تطبيق هذه التقنية على الأفراد الذين يعانون من ضعف الأطراف أو غيابها أو العجز الحسي مما يوفر المزيد من التبصر في نظم التغذية المرتدة التي توفر مراقبة دقيقة وبديهية للأطراف. إجراء عملية جراحية على الأعصاب المحيطية أمر صعب حيث أن هناك هامشاً ضئيلاً للخطأ.

استخدام أدوات عالية الجودة وممارسة في كثير من الأحيان هي أفضل الطرق لضمان النجاح. من الصعب للغاية نقل التقنيات الجراحية والتعلم من الشكل الأدبي. مراقبة كل خطوة تشارك في تصنيع بناء هو المفتاح لاتقان الأسلوب.

لإعداد الكسب غير المشروع الجلد، بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القارص، وتطبيق مرهم على عيون الفئران المصبوص. باستخدام المقصات، حلق كامل أسفل hindlimb، منطقة الكاحل والجانبين من مخلب. تطهير hindlimb المحدد في سطح بلانكار من مخلب مع حل الكحول iodopovidone متتابعة وتطهير الكحول.

باستخدام المحرك الصغير المحمولة عالية السرعة مع جولة قابلة للإزالة حصى غرامة تلميع الحجر، قم بحفر سطح اللوح من مخلب لإزالة البشرة بسرعة 4، 000 الثورات في الدقيقة الواحدة تطبيق قطرات من المالحة حتى لا تحرق الجلد. سيكون للدُلَمَةَ الأساسية مظهر لامع مع نزيفٍ مُدَرَك. تطبيق tourniquet على الطرف السفلي لإبطاء تدفق الدم واستخدام مشرط رقم 15 لإزالة الجلد بشكل حاد.

ضع الجلد في شاش مبلل بالملوحة المالحة لمنع جفافه، وطبق غطاء شاش على القدم النازفة لإبطاء النزيف. ضع الجلد تحت مجهر تشريح واستخدام ميكروسيسورس لإزالة أي أنسجة متقومة و الضامة من الطبقة العميقة من الكسب غير المشروع الجلد. وينبغي أن يكون الكسب غير المشروع الجلدي رقيقة مبهمة قليلا، تحتوي على الأدمة فقط وقياس ما يقرب من 0.5 في سنتيمتر واحد في الحجم.

ثم ضع الأنسجة في قطعة جديدة من الشاش المبلل المالحة حتى بناء تلفيق. لإعداد الكسب غير المشروع في العضلات، استخدم مشرط رقم 15 لعمل شق طولي على طول الجانب الأمامي من الزهد السفلي من أعلى الكاحل مباشرة إلى أسفل الركبة مباشرة. تشريح من خلال الأنسجة تحت الجلد لفضح العضلات الكامنة.

في الجانب القاصي من الشق، وفضح عمليات الإدراج tendinous من العضلات الطرف السفلي. في تيبياليس الأمامي هو عادة أكبر وأكثر الأمامي من العضلات. فقط تحت و خلف هذه العضلة تكمن الاكستينور لونجوس.

لعزل وتر لونجون لونجوس التنافر الممزخر عن الأوتار الأخرى في المنطقة، قم بإدراج كل من تينات ملقط تحت الوتر وفتح ملقط للضغط التصاعدي للتسبب في رحلة وتر. التلاعب في وتر ينبغي أن يسبب كل من أصابع الاقدم لتمديد في وقت واحد. استخدام مقص القزحية حادة لأداء تينوتومي القاصي واستخدام tenomoties لفصل بصراحة العضلات من الأنسجة المحيطة تعمل بشكل تلقائي للعثور على أصل tendinous.

مرة واحدة يمكن تصور وتر قريب، واستخدام مقص القزحية لأداء تينوتومي الثانية ووضع الكسب غير المشروع في العضلات الشاش مبللة المالحة. لعزل وإعداد العصب peroneal المشتركة، حلق أحد الفخذين وتطهير الجلد المكشوف مع الكحول متتابعة Betadine-الكحول تطهير. ضع الجرذ المُجَنَّف على وسادة تدفئة تحت مجهر جراحي، ثم وضع علامة على الشق من الشق الوركي إلى الجزء السفلي من الركبة السفلية والزاوية بعيداً عن عظم الفخذ.

ثم استخدم مشرط رقم 15 لعمل شق على طول العلامة من خلال اللفافة الفخذية العضلة ذات الرأسين الأساسية. تشريح بعناية من خلال العضلة ذات الرأسين في عضلة الفخذ إلى الفضاء الكامنة في femoris العضلة ذات الرأسين. بعد تحديد العصب البيروني الشائع ، استخدم ملقط صغيرة ذات رؤوس دقيقة وميكروسات لعزل العصب ال peroneal المشترك بعناية عن الفروع الوركية الأخرى.

إزالة أي الأنسجة الضامة العالقة distally وعند النقطة التي العصب يعبر سطح الركبة، transect بشكل حاد العصب مع زوج من microscisors. ثم تحرير بعناية أي الأنسجة الضامة المتبقية من العصب peroneal المشتركة والعمل proximally لتحرير العصب إلى طول ما يقرب من سنتيمترين. الأعصاب حساسة و الأخطاء البسيطة يمكن أن تسبب عجزا وظيفيا دائم.

الممارسة المتكررة، وأدوات جراحية دقيقة، وتحديد المواقع المثالي اليد والدعم هي المفتاح لاتقان هذه التقنية. لتصنيع بناء C-RPNI، ضع الكسب غير المشروع في العضلات تحت المجهر تشريح وإزالة كل من الأنسجة تميل المركزية وكذلك جزء مركزي صغير من epimysium ترك نهايات tendinous سليمة. باستخدام 8-0 خياطة النايلون واثنين من غرز توقف، وتأمين epineurium من نهاية عرضية من العصب peroneal المشتركة إلى منطقة الكسب غير المشروع العضلات خالية من epimysium على جانبي العصب.

تأمين الكسب غير المشروع العضلات إلى عظم الفخذ periosteum مع واحد 6-0 النايلون توقف غرزة على حد سواء بالوكالة وdistally مع تقاطع العضلات العصبية التي تواجه بعيدا عن عظم الفخذ. ضع 8-0 غرزة النايلون في الهامش المركزي السفلي للعضلات الكسب غير المشروع epimysium تأمينه إلى epineurium العصبية العادية وذلك لخلق تراخي في العصب داخل الكسب غير المشروع في العضلات. ضع الجسم على الجسم غير المشروع في العضلات بحيث يغطي العصب وغالبية العضلات بالكامل مع الهامش العميق لأدمة يستريح على العضلات.

تقليم أي الأدمة التي تمتد إلى ما وراء حدود العضلات واستخدام 8-0 توقف النايلون الغرز لتأمين محيط الجسم الجلد إلى الكسب غير المشروع في العضلات. إغلاق femoris femoris العضلة ذات الرأسين على بناء بطريقة تشغيل مع خياطة الكروم 5-0 وإغلاق الجلد overlying مع خياطة الكروم 4-0 في الأزياء تشغيل. ثم مبادلة المنطقة الجراحية مع وسادة الكحول وتطبيق مرهم المضادات الحيوية قبل السماح للفئران للتعافي مع مصادر الغذاء والماء منفصلة عن الاصحاب قفص مع الرصد حتى إعادة شغل كامل.

إذا نجحت، والتعرض الجراحي للانشاءات بعد ثلاثة أشهر سوف تكشف عن إعادة الأوعية الدموية والعضلات والجلد والضغط لطيف من العصب peroneal المشتركة مع ملقط قريبة إلى بناء سيؤدي إلى تقلص العضلات مرئية. وينبغي أن تحليل النسيجية تثبت قابل للحياة الجلد, العصب, والعضلات. سوف تكشف عن المثبطات المناعية أيضًا إعادة الالصب الحركية والحسية إلى تقاطعاتها العصبية العضلية والأعضاء الطرفية الحسية على التوالي.

يمكن إجراء الاختبار الكهربائي على هذه الانشاءات في الجسم الحي كما هو موضح، على سبيل المثال في ثلاثة وتسعة أشهر بعد تصنيع C-RPNI. هنا، واحد والخص مجمع العضلات العمل إمكانات ومركب إمكانات الحركة العصبية الحسية التي تم الحصول عليها خلال الاختبار الكهربائي فيزيائية في شكل رسومي. يشار إلى النتائج دون الأمثل في الكسب غير المشروع العضلات من خلال إشارات مخففة التي تفتقر إلى شكل موجي محتمل عمل العضلات المركبة المميزة.

النتائج دون الأمثل على مستوى العنصر الجلدي عادة ما تنطوي على تخمد من الموجي مع ضوضاء خلفية كبيرة. أدوات ذات نوعية جيدة أمر حيوي. يجب أن تكون مقص حادة وينبغي أن تكون الملتبس يميل غرامة لتسهيل التعامل دقيقة للغاية من الطعوم الجلد والأعصاب دون ضرر.

بعد تلفيق، يمكن استخدام هذه الطريقة في التحقيقات الكهربائية الفيزيولوجية إلى مزيد من تحديد خصائص قدرات الإشارة توفير المزيد من البصيرة في حلقات ردود الفعل الارتجاعية و afferent. على الرغم من أن C-RPNI يسمح لردود الفعل الحسية، فإنه من غير الواضح ما إذا كان يمكن إنشاء نظام التغذية المرتدة حلقة مغلقة لروبريوسيب. نحن نعالج هذا السؤال في المختبر