Name: التنبيب المتكرر للأوتراكشفاء في الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-03-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 26 s
Description: تعلم تقنية التنبيب غير الباضعة للفئران لدراسة وظائف الجهاز التنفسي بشكل متكرر. تتيح هذه الطريقة للباحثين مراقبة أمراض الرئة المزمنة مثل الربو والانسداد الرئوي دون الحاجة إلى تشريح جراحي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

يشكر المؤلفون لوسيا روساس ولورين دوليتل وليزا جوزيف وليندسي فيرغسون على مساعدتهم التقنية ومختبر الجامعة للموارد الحيوانية لدعمهم لرعاية الحيوانات. يتم تمويل هذا العمل من قبل المعاهد القومية للصحة T35OD010977 وR01-HL102469.

وقد وافقت اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (IACUC) التابعة لجامعة ولاية أوهايو على جميع الأنشطة الحيوانية الموصوفة هنا، وأجريت في مرافق معتمدة من AAALAC.
1- إعداد الإجراءات
<ol><li>بناء منصة التنبيب. لتحقيق المنحدر منصة مناسبة، استخدم ثلاثة بوصة (7.6 سم) الموثق 3-حلقة. أضعاف طول 15-20 سم من الحرير 3-0 أو غيرها من المواد الخيط في النصف والالتزام نهايات الخيط إلى أعلى المنصة يميل مع الشريط لإنشاء حلقة تعليق(الشكل 1).</li>
	<li>حدد قنية من الحجم المناسب والطول. ملاحظة: بالنسبة للفأرة التي يبلغ طولها 20-30 جم، يمكن استخدام قسطرة طويلة من 1 إلى 1.5 بوصة (2.5-3.8 سم) تصل إلى 18 جم. لهذه الدراسة، تم استخدام 18 امرأة تبلغ من العمر أسبوعًا في BALB/c وفئران C57BL/6 البالغة من العمر 10 أسابيع (n = 3 من كل سلالة). يوفر غمد القسطرة الأبيض المبهم أفضل تصور عبر الجلد.</li>
	<li>قطع شطبة في الطرف القاصي من القسطرة وتمهيد السطح قطع مع ورقة جلخ لخلق طرف شطبة مدورة. خلق بلطف منحنى طفيف في قنية حوالي 1 سم من شطبة(الشكل 2). ملاحظة: يجب استخدام قسطرة جديدة لكل فأرة.</li>
	<li>إجراء حقن للفأرة باستخدام الكيتامين (5.4 ملغم/غرام من وزن الجسم) وxylazine (16 ميكروغرام/غرام من وزن الجسم) التي تدار داخل البيريتين.  تطبيق مرهم ophthalimic العقيمة على العينين. ملاحظة: ويتحقق عمق التخدير السليم من خلال عدم استجابة الماوس لقرصة إصبع القدم شركة.</li>
	<li>قم بتعليق الماوس في وضع ية على منصة التنبيب عن طريق ربط القواطع العلوية حول خيط الحرير في الجزء العلوي من السطح الزاوية(الشكل 3). مرة واحدة يتم وضع الماوس بشكل مباشر في recumbency الظهرية، فهم بلطف قاعدة الذيل والتراجع الذيل نحو الجدول. ضع قطعة من الشريط فوق قاعدة الذيل لتأمين الماوس.</li>
	<li>تطبيق كريم إزالة المزيل(جدول المواد)على منطقة عنق الرحم البطنية لمدة 30-45 ق ثم إزالة جميع كريم إزالة المزيل من منطقة عنق الرحم باستخدام شاش جاف. كرر عملية التطبيق إذا لزم الأمر. شطف الجلد جيدا بالماء المالح أو المقطر لإزالة أي بقايا ثم مسح الجافة.</li>
</ol>2- إجراء التنبيب
<ol><li>استخدام مستقيم، الملقط المسطحة في اليد غير المهيمنة لسحب اللسان بلطف بطريقة تفتح بما فيه الكفاية الفم لإدخال قنية. ملاحظة: لا ينبغي استخدام ملقط الأسنان الفئران لأن هذا سوف يضر اللسان.</li>
	<li>مع اليد المهيمنة ، تقدم في القنية إلى الفم بحيث تكون النهاية التي هي distal إلى الانحناء الطفيف ضد سقف فم الشخص.</li>
	<li>الافراج عن اللسان والانزلاق على الحافة المسطحة من الملقط مغلقة caudally على طول الرقبة البطنية حتى يتم التوصل إلى manubrium. هذا الاقتراح يُشرّد الغدد اللعابية ويُسّط العضلات التي تغطي القصبة الهوائية. يظهر القصبة الهوائية عبر الجلد كخط أبيض(الشكل 3A). إذا لزم الأمر، تدوير الملقط في اتجاه الجمجمة مع الحفاظ على التوتر على الجلد في اتجاه caudal للتسبب في الغدد اللعابية المشردة في وقت لاحق إلى الذروة. هذه المناورة يخلق المزيد من التباين حول القصبة الهوائية(الشكل 3B). ملاحظة: تجنب القوة المفرطة على الرقبة البطنية لأنها يمكن أن تنهار القصبة الهوائية وتضعف التنفس.</li>
	<li>تقدم في حين أن القُلة في وقت واحد الصيد الطرف المنفز من التهوية عن طريق التمويع من اليد المهيمنة مع مرونة في وقت واحد من المعصم.</li>
	<li>ويشار إلى الموضع الصحيح للقنية من خلال تصور قنية مبهمة في القصبة الهوائية(الشكل 4B, D). إذا كانت قد تقدمت قنية الماضي مستوى أصل العضلات المدلكة وتصور قنية في القصبة الهوائية لم يتم تأكيد، تراجع عن قنية وإعادة محاولة المناورة.</li>
	<li>تأكيد وضع القنية المناسبة عن طريق ربط لمبة تضخم الرئة إلى قنية ومراقبة التوسع الصدري مع الاكتئاب المتزامن للجهاز.</li>
	<li>دون إزاحة القنية ، فك بعناية القواطع من الماوس من منصة التنبيب. نقل الماوس إلى منصة أفقية(جدول المواد)وإدراج قنية إلى محول على جهاز التنفس الصناعي. بعد التضخم العميق، تهوية الماوس لمدة 60 ق ثم قياس مقاومة الجهاز التنفسي.</li>
</ol>3- الاسترداد
<ol><li>بمجرد اكتمال الإجراء، حرك الماوس إلى منصة دافئة. توفير التحفيز المستمر عن طريق إصبع القدم الخفيف أو قرصة الذيل لتشجيع التنفس التلقائي.</li>
	<li>يمكن أن يحدث استئصال عندما يبدأ الماوس فقط في المضغ. فهم قنية على مستوى المحور وسحب بلطف أنبوب قحوية وبعيدا عن الماوس حتى تتم إزالة قنية تماما من فم الموضوع. ملاحظة: فمن الأفضل لتوفير دعم مجرى الهواء مع قنية جامدة لأطول فترة ممكنة خلال عملية الانتعاش.</li>
	<li>مرة واحدة extubated، ونقل الماوس إلى قفص الانتعاش نظيفة مع دعم الحرارة. مراقبة الماوس باستمرار حتى يكون متنقلا تماما، واكتمال الاسترداد.</li>
</ol>

<ol><li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory Animals. 41 (1), 128-135 (2007).</li>
<li>Rivera, B., Miller, S. R., Brown, E. M., Price, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Method+for+Endotracheal+Intubation+of+Mice+and+Rats+Used+in+Imaging+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Topics+in+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">A Novel Method for Endotracheal Intubation of Mice and Rats Used in Imaging Studies.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 44 (2), 52-55 (2005).</li>
<li>Sparrowe, J., Jimenez, M., Rullas, J., Martinez, A. E., Ferrer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+Intratracheal+Intubation+Technique+in+the+Mouse%2C+Complete+Protocol+Description+for+Lower+Airway+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Global+Journal+of+Animal+Scientific+Research%22%5BJournal%5D)">Refined Intratracheal Intubation Technique in the Mouse, Complete Protocol Description for Lower Airway Models.</a> Global Journal of Animal Scientific Research. 3 (2), 363-369 (2015).</li>
<li>Deyo, D. J., Wei, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Method+of+Intubation+and+Ventilation+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesia+%26+Analgesia%22%5BJournal%5D)">A Novel Method of Intubation and Ventilation in Mice.</a> Anesthesia & Analgesia. 88 (2), 179(1999).</li>
<li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22European+Review+for+Medical+and+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8 (3), 103-106 (2004).</li>
<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li>
<li>Das, S., MacDonald, K., Chang, H. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Simple+Method+of+Mouse+Lung+Intubation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Simple Method of Mouse Lung Intubation.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e50318(2013).</li>
<li>Limjunyawong, N., Mock, J., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Instillation+and+Fixation+Methods+Useful+in+Mouse+Lung+Cancer+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52964(2015).</li>
<li>Qin, W., Baran, U., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+response+to+depilation-induced+inflammation+assessed+with+label-free+optical+lymphangiography%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+in+Surgery+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Lymphatic response to depilation-induced inflammation assessed with label-free optical lymphangiography.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 47 (8), 669-676 (2015).</li>
<li>McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+Respiratory+System+Mechanics+in+Mice+using+the+Forced+Oscillation+Technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), e50107(2013).</li>
</ol>

وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

التنبيب باستخدام تقنية التصور تراكل عبر الجلد يقدم نهجا المكرر لطريقة شق الجلد القياسية. مع إيلاء اهتمام خاص لعدة خطوات رئيسية، يمكن أن يتحقق التنبيب بسهولة وبسرعة. يجب وضع الحيوان مباشرة في الردورة الظهرية على منصة التنبيب مع الماوس المضمون في تراجع لطيف. وهذا سوف تمتد الحيوان إلى محاذاة الرأسي وتحديد المواقع المناسبة للتنبيب. وبالإضافة إلى ذلك، لا ينبغي أن يبقى كريم إزالة البيلات على اتصال بجلد الحيوان لفترة أطول من 30-45 سنة، وينبغي شطفه جيداً لإزالة جميع المخلفات. تمديد اتصال الجلد مع كريم إزالة المزيل اتلاف يسبب الأ...

فأر المختبر هو نموذج الحيوان المشترك لأمراض الجهاز التنفسي البشرية. وهكذا ، هناك العديد من الطرق المنشورة لتنبيب الماوس لغرض غرس العلاجات وقياس ميكانيكا الجهاز التنفسي. معظم الإجراءات الموصوفة تتطلب تصور الجلاوطي من خلال تجويف الفم مع معدات متخصصة مثل منظار الحنجرة أو مصدر ضوء الألياف البصرية1،2، 3،,4،5،6،7.3 ومع ذلك ، يمكن أن يكون هذا صعبًا عندما تكون هناك حاجة إلى قنية كبيرة نسبيًا ، لأنها يمكن أن تحجب وجهة نظر الباحث. وقد عالج ليمجونياوونغ وآخرون8 هذا القلق بطريقة التنبيب التي يتم فيها إجراء شق جلدي صغير على طول خط الوسط في الرقبة البطنية مما يسمح بتصور القصبة الهوائية. بعد الإجراء ، يتم إغلاق الشق بلاصق للأنسجة.
بالنسبة للدراسات التي تتطلب عمليات تنبيب متكررة ، يتطلب التقطيع والإغلاق المتتالي لهذا الموقع إزالة الهوامش الجلدية وصدمة الأنسجة إلى الرقبة البطنية. الغرض من نهج تصور التراشف التراجيدي عبر الجلد للتنبيب عن طريق الفم هو توفير تقنية مكررة وغير باضعة مناسبة خصيصًا لدراسات التنبيب المتكررة وكذلك أحداث تنبيب واحد في الفئران.

<table><tbody><tr><td>18 جم × 1 1/4 "قسطرة وريدية ، Safelet</td><td>Fisher Scientific</td> <td># 14-841-14</td><td>قنية للتنبيب</td></tr><tr><td>70٪ إيثانول ، 10 لتر</td><td>فيشر 25467025</td><td></td><td>تنظيف القنية</td></tr><tr><td>ورق جلخ (ورق صنفرة) بورتر</td> <td>كابل</td><td>74001201</td><td>تحضير</td></tr> قنية <tr><td>AnaSed (محلول معقم زيلازين) حقن (100 مجم / مل)</td> <td>Akorn Animal Health</td><td>NDC # 59399-111-50</td> شريط وضع العلامات <td>الأزرق للتخدير</td></tr><tr><td>(0.5 بوصة × 14 ياردة)</td><td>Fisher Scientific</td><td>15966</td><td>ضبط النفس على منصة التنبيب</td></tr><tr><td>خياطة حريرية مضفرة بدون إبرة ، غير معقمة ، (3-0)</td><td>Henry Schein</td><td>Item #1007842</td><td>منصة التنبيب</td></tr><tr><td>Deltaphase Isothermal Pad</td><td>Braintree Scientific</td><td>39DP</td><td>تنظيم حراري للماوس واستعادة</td></tr><tr><td>Deltaphase التشغيل Board</td><td>Braintree Scientific</td><td>39OP</td><td>استعادة الفأر (قبل نزع الأنبوب)</td></tr> <tr><td>الماء المقطر</td><td>ThermoFisher</td><td>15230253</td><td>تنظيف الماوس بعد إزالة الشعر</td></tr><tr><td>مقص العين ، بزاوية ، حادة / حادة</td><td>هارفارد جهاز</td><td>72-8437</td><td>تحضير القنية</td></tr><tr><td>FlexiVent (وحدة FX 2)</td> <td>Scireq</td><td>N / A</td><td>تسجيل بيانات وظائف الرئة (غير مطلوب لإجراء الإجراء ، ويستخدم في هذه الدراسة للتحقق من صحة الإجراء)</td></tr><tr><td>إسفنج الشاش</td><td>فيشر العلمي</td><td>13-761-52</td><td>إزالة الشعر</td></tr><tr><td>شديد التحمل 3 "3 حلقات عرض المجلدات</td><td>دبابيس</td><td>24690CT</td><td>منصة التنبيب</td></tr><tr><td>Instat Software</td><td>Graphpad</td><td>N / A</td><td>برنامج التحليل الإحصائي</td></tr><tr><td>حقنة الأنسولين (0.5 سم مكعب ، U100)</td><td>فيشر 329461</td><td></td><td>التخدير العلمي</td></tr><tr><td>حقن الكيتامين هيدروكلوريد ، USP (100 مجم / مل)</td> <td>Llyod Laoratories</td><td>القائمة رقم 4871</td><td></td></tr><tr><td>لمبة تضخم الرئة</td> للتخدير <td>Harvard</td><td>Apparatus 72-9083</td><td>تأكيد وضع القنية</td></tr><tr><td>ملقط دقيق ، منحني ، ناعم</td><td>جهاز هارفارد</td><td>72-0445</td><td>سحب اللسان وخلق توتر على الرقبة لتصور</td></tr> <tr><td>القنيةناير (غسول لإزالة الشعر) ، زجاجة 9 أونصة</td><td>الكنيسة & دوايت</td><td>42010440</td><td>إزالة الشعر</td></tr><tr><td>محلول ملحي معقم (0.9٪) ، 10 مل</td><td>فيشر NC9054335</td><td></td><td>التخدير ، تنظيف البشرة بعد إزالة الشعر</td></tr></tbody></table>

التنبيب المتكرر للأوتراكشفاء في الفئران

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

يصف الأدب عدة طرق لتنبيب الماوس التي تتطلب إما تصور الجلاوطي من خلال تجويف الفم أو شق في الرقبة البطنية لتأكيد مباشر لوضع قنية في القصبة الهوائية. ويمكن أن تشكل الصعوبة النسبية أو صدمة الأنسجة الناجمة عن هذه الإجراءات عائقاً أمام قدرة المحقق على إجراء دراسات طولية. توضح هذه المقالة تقنية يسمح فيها التلاعب الجسدي للفأرة بعد استخدام مزيل الشعر لإزالة الشعر من الرقبة البطنية بالتصور عبر الجلد للالقصبة الهوائية لتنبيب الأوروتراكفيل بغض النظر عن درجة الجلد تصبغ. هذه الطريقة غير ضارة بالموضوع وتتحقق بسهولة مع فهم محدود لتشريح المورين. يسهل هذا النهج المكرر التنبيب المتكرر ، والذي قد يكون ضروريًا لمراقبة تطور المرض أو غرس العلاجات. قد يؤدي استخدام هذه الطريقة إلى تقليل عدد الحيوانات والمهارة التقنية اللازمة لقياس وظائف الرئة في نماذج الماوس من أمراض الجهاز التنفسي.

الرصد التسلسلي لوظيفة الرئة الأساسية تم تنبيب أنثى بالب/ج البالغة من العمر ثمانية عشر أسبوعًا وفئران C57BL/6 البالغة من العمر 10 أسابيع (n = 3 من كل سلالة) باستخدام الطريقة الموصوفة في اليوم 0 و3 و10 و17. بعد التنبيب في كل يوم ، تم توصيل هذا الموضوع بجهاز التنفس الصناعي الميكانيكي المزود بالأكسجين 100٪(جدول المواد). تم قياس مقاومة الجهاز التنفسي (Rrs) باستخدام تقنية التذبذب القسري لمدة 60 ق بعد تضخم عميق إلى 25 سم H2O عقد لمدة 5 s. لا توجد أخطاء برمجية مرتبطة بهذا التحمل ال...

الهدف من هذه المقالة هو وصف طريقة مكررة من تنبيب فأرالمختبر. هذه الطريقة غير الغازية ، وبالتالي ، مثالية للدراسات التي تتطلب الرصد التسلسلي لوظيفة الجهاز التنفسي و / أو غرس العلاجات في الرئة.

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

سيسمح هذا البروتوكول للباحثين بإجراء قياسات متكررة لوظائف الرئة في الفئران الفردية ، مما يقلل من التباين التجريبي ويقلل عدد الفئران اللازمة لكل تجربة. الميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هو أنه لا يتطلب تصور القصبة الهوائية من خلال تجويف الفم أو تشريح الصدمة من الرقبة للانتبان. هذه الطريقة سوف تكون ذات قيمة خاصة للباحثين دراسة أمراض الرئة المزمنة والتقدمية مثل الربو، COPD، انتفاخ الرئة، والتليف الرئوي.إن العرض المرئي لهذا البروتوكول أمر بالغ الأهمية لأن فهم كيفية تحديد القصبة الهوائية من خلال جلد الرقبة البطنية أمر أساسي لهذه الطريقة. إظهار التقنية مع أندرو نيلسون ستكون كيت نولان، طبيبة بيطرية من مختبري. لإنشاء منصة الاحتضان، أضعاف طول 15-20 سم من الحرير 3-0 في نصف وشريط نهايات الخيط إلى أعلى من ثلاثة بوصة ثلاث حلقات الموثق.حدد قنية من الحجم والطول المناسبين وقم بقطع شطبة عند طرف القسطرة. سلاسة سطح القطع مع ورقة جلخ لخلق طرف مدورة وجعل بلطف منحنى طفيف في القنية ما يقرب من سنتيمتر واحد من شطبة. عندما تكون المواد جاهزة، تأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع في فأر تخدير وربط القاطعات العليا حول خيط الحرير في الجزء العلوي من سطح الزاوية من المنصة لتعليق الماوس في موقف supine.مرة واحدة يتم وضع الماوس بشكل مباشر في إعادة شغل الظهر، فهم بلطف قاعدة الذيل وتراجع الذيل نحو الجدول. ضع قطعة من الشريط فوق قاعدة الذيل لتأمين الماوس وتطبيق كريم إزالة الشعر على منطقة عنق الرحم البطنية. بعد 30 إلى 45 ثانية، استخدم الشاش الجاف لإزالة الكريم وشطف الجلد بالماء المحلى أو المقطر.باستخدام ملقط في اليد غير المهيمنة، تراجع بلطف اللسان بطريقة تفتح الفم بما فيه الكفاية لإدخال القنية. مع اليد المهيمنة، تقدم القنية في الفم بحيث النهاية التي هي هد إلى الانحناء طفيف هو ضد سقف فم الحيوان. الافراج عن اللسان وشريحة الحافة المسطحة من ملقط مغلقة caudally على طول الرقبة البطنية حتى يتم التوصل إلى مانوبيوم إلى تشريد الغدد اللعابية بشكلٍ ثَمَيَّة وتسطح العضلات التي تغطي القصبة الهوائية.سوف تظهر القصبة الهوائية عبر الجلد كخط أبيض. إذا لزم الأمر، قم بتدوير ملقط في اتجاه القحف مع الحفاظ على التوتر على الجلد في اتجاه السد للتسبب في الغدد اللعابية المشردة بشكل عرضي إلى ذروتها وخلق المزيد من التباين حول القصبة الهوائية. Supinating اليد المهيمنة مع انثناء في وقت واحد من المعصم، وتقدم قنية في حين الصيد في وقت واحد غيض من قعة من القنية.إذا تم وضع القنب بشكل صحيح ، سيتم ملاحظته داخل القصبة الهوائية. لتأكيد الموضع المناسب، قم بتوصيل لمبة تضخم الرئة بالقنية ومراقبة التوسع الصدري مع الاكتئاب المتزامن للجهاز. دون إزاحة القنية، فك بعناية قاطعة الماوس من منصة الاحتضان ونقل الماوس إلى منصة أفقية، ثم نعلق على كانولا إلى محول على جهاز التنفس الصناعي، وبعد تضخم عميق، تهوية الماوس لمدة 60 ثانية قبل قياس مقاومة الجهاز التنفسي.بمجرد اكتمال الإجراء، قم بنقل الماوس إلى منصة دافئة وتوفير التحفيز المستمر عن طريق قرصات إصبع خفيف أو ذيل لتشجيع التنفس التلقائي. مرة واحدة لوحظ التنفس التلقائي، والاستمرار في مراقبة بصريا الحيوان. عندما يعود معدل التنفس إلى وضعها الطبيعي ، قم بإدراك القنية على مستوى المحور وسحب الأنبوب برفق بعيداً عن الماوس حتى تتم إزالة القنية تمامًا من فم الحيوان.مرة واحدة extubated، نقل الماوس إلى قفص الانتعاش نظيفة مع دعم الحرارة مع رصد حتى المتنقلة بالكامل. في هذه التجربة التمثيلية، تم قياس مقاومة الجهاز التنفسي في أيام 0 و 3 و 10 و 17، باستخدام تقنية التذبذب القسري بعد تضخم عميق إلى 25 سنتيمتر من الماء الذي تم احتوذه لمدة خمس و 60 ثانية من التهوية الميكانيكية. لم تلاحظ اختلافات كبيرة في مقاومة التنفس قياسها بين أي من النقاط الزمنية داخل كل سلالة، مما يشير إلى أن عدم وجود زيادة في مقاومة الجهاز التنفسي مع مرور الوقت يشير إلى عدم وجود التهاب كبير وظيفيا المرتبطة الصدمة الانتبيب في الجهاز التنفسي على مدى أربع نقاط زمنية متتالية.ويمكن استخدام هذا الإجراء الضمّن لتوفير الوصول إلى القصبة الهوائية لتركيب مواد تجريبية والرصد التسلسلي لوظيفة الجهاز التنفسي. تسمح هذه التقنية بتقييم وظائف الرئة دون استئصال القصبة الهوائية الغازي ، مما يسهل الرصد في نقاط زمنية متعددة في الأمراض المزمنة والتقدمية داخل نفس الماوس.

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

القياسات المتكررة لفسيولوجيا الجهاز التنفسي القوارض وأخذ العينات من الخلايا الهوائية الملتهبة مرغوب فيها ، ولكن عموما ليست مجدية. نحن هنا تصف طريقة لتكرار intubating شفويا الفئران التي تسمح القياسات المتكررة لhyperreactivity الهوائية وأخذ العينات من الخلايا الهوائية الملتهبة.

A عكسية ، غير الغازية طريقة لقياس مقاومة مجرى الهواء وأخذ عينات السوائل غسل القصبات في الفئران

وقد وضعنا طريقة بسيطة وموثوق بها، وغير مكلفة نسبيا لالتنبيب الرغامي في الفئران عن طريق تنظير الحنجرة المباشر باستخدام منظار الأذن مع 2.0 مم المنظار. هذا الأسلوب هو ارضحي، ويمكن استخدامها لقياس المتكررة في التجارب المزمنة. نجد أنها متفوقة على القصبة الهوائية أو سبق وذكرت التقنيات غير الجراحية.

التنبيب الرغامي في الفئران<em&gt; عبر</em&gt; تنظير الحنجرة المباشر باستخدام منظار الأذن

وتصف هذه الورقة طريقة striaghforward وكفاءة تنبيب الفئران لقياس وظائف الرئة أو تقطير الرئوي، التي تسمح للفئران لاسترداد ويكون درس في أوقات لاحقة. الإجراء ينطوي على مصدر الضوء غير مكلفة الالياف البصرية الذي ينير مباشرة القصبة الهوائية.

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

استخدام نموذج الذي يحاكي حالة من أمراض الرئة في البشر أمر بالغ الأهمية لدراسة الفيزيولوجيا المرضية و / أو مسببات مرض معين لتطوير والتدخل العلاجي. هنا يتم تقديم طريقة التنبيب داخل الرغامى موسع التي يمكن ان تنقل مباشرة إلى مواد خارجية الماوس الرئتين.

موسع داخل الرغامى التنبيب لدراسة علم الأمراض وعلم وظائف الأعضاء من الرئة ماوس

تقدم هذه المقالة طريقة سريعة وبسيطة لإدارة بليوميسين مباشرة إلى القصبة الهوائية الماوس عبر التنبيب. المزايا الرئيسية لهذه الطريقة هي أنها تكرار للغاية، وسهلة لسيده، ولا يتطلب معدات متخصصة أو أوقات الانتعاش طويلة.

افضل طريقة لرابيد تنبيب القصبة الهوائية في الفئران

نقدم هنا، بروتوكول انقباض "عرضية الابهري" (تاك) عن طريق ثوراكوتومي أفقي. هذا الأسلوب إجراء العمليات جراحية صدر كسبها، مغلقة تهدف إلى محاكاة الضغط الزائد وفشل القلب في الفئران التي تستخدم إعدادات المختبر تاك القياسية.

نموذج الصدر مغلقة للحث على انقباض الابهري عرضية في الفئران

نموذج جراحي للفأر لإنشاء إصابة نقص تروية الرئة اليسرى (IR) مع الحفاظ على التهوية وتجنب نقص الأكسجة.

نموذج فأر للتنبيب الرغامي وجراحة نقص تروية الرئة المهواة

هنا ، نقترح بروتوكولا لتوصيل عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية (LPS) عن طريق التنبيب الرغامي الفموي البلعومي غير الباضع. تقلل هذه الطريقة من صدمة الإجراء الجراحي للحيوان وتوصل بدقة LPS إلى القصبة الهوائية ثم إلى الرئتين.

تقطير عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية غير الباضع في الفئران

نقدم هنا إجراء موحدا للتنبيب الرغامي عن طريق بضع القصبة الهوائية متبوعا ببضع الصدر في الفئران ، يهدف إلى تعزيز دقة وقابلية تكرار التطبيقات غير القابلة للبقاء على قيد الحياة التي تتطلب تهوية جراحية وتعرض الأعضاء الصدرية في نماذج الفئران في الجسم الحي .

التنبيب الرغامي عن طريق بضع القصبة الهوائية وبضع الصدر اللاحق في الفئران لتطبيقات عدم البقاء على قيد الحياة

نصف نموذج الفئران للضغط البطيني الأيمن الناجم عن زيادة الضغط الرئوي. يتم تضمين بروتوكولات مفصلة للتنبيب والجراحة والتنميط الظاهري عن طريق تخطيط صدى القلب في الورقة. تستخدم الأدوات المصنوعة حسب الطلب للتنبيب والجراحة ، مما يسمح باستنساخ سريع وغير مكلف للنموذج.

نموذج الفئران لتضخم البطين الأيمن الناجم عن الضغط الزائد والفشل عن طريق ربط الجذع الرئوي

يعرض هذا البروتوكول كيف يتيح وضع الفأر على النحو الأمثل وإدخال منظار الأذن القائم على الكاميرا عبر الفم تصور المزمار ، والتنبيب السريع مع الحد الأدنى من صدمة الأنسجة ، وتوصيل السوائل بشكل ثابت إلى الرئتين.

منهجية محسنة لتوصيل السوائل إلى رئة الفأر: التنبيب باستخدام منظار الأذن للمستهلك

تعلم تقنية التنبيب غير الباضعة للفئران لدراسة وظائف الجهاز التنفسي بشكل متكرر. تتيح هذه الطريقة للباحثين مراقبة أمراض الرئة المزمنة مثل الربو والانسداد الرئوي دون الحاجة إلى تشريح جراحي.

التنبيب المتكرر للأوتراكشفاء في الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات