نموذج النظام المستقل عبرلامينار لتعديل الضغط داخل العين وداخل الجمجمة في الأجزاء الخلفية للمانحين البشريين

يستخدم هذا النظام المستقل الجديد للعين العرضية الجزء الخلفي البشري لتنظيم الضغوط داخل العين وداخل الجمجمة بشكل مستقل لتوليد تدرج ضغط عبر الصفيحة. يسمح نموذج TAS بتقييم الضغط البشري داخل الجمجمة بطريقة سابقة قبل السريرية لم يكن من الممكن دراستها في السابق. يمكن استخدام هذا النموذج لدراسة أمراض مثل الجلوكوما وإصابات الدماغ الرضحية وارتفاع ضغط الدم داخل الجمجمة مجهول السبب ومتلازمة العين العصبية المرتبطة بالرحلات الفضائية.

لإعداد محاقن التدفق ، قم بتحميل حقنة سعة 30 ملليلتر ب 30 ملليلترا من سائل التروية محل الاهتمام وقم بإرفاق قضيب توقف ثلاثي الاتجاهات بالمحقنة. قم بتوصيل مرشح محب للماء بحجم 0.22 ميكرومتر بقضيب التوقف ، وقم بتوصيل محول كعب لور عيار 15 بمرشح محب للماء 0.22 ميكرومتر. بعد إزالة فقاعات الهواء من إعداد المحقنة ، قم بتوصيل الأنبوب بمحول كعب اللور وأغلق المنفذ الجانبي لقضيب التوقف بغطاء قفل عالمي غير مهواة.

بعد إعداد حقنة تدفق ثانية كما هو موضح للتو، قم بتسمية قناة حقنة واحدة ببرنامج المقارنات الدولية، وقم بتسمية قناة الحقنة الأخرى باثنين من IOP. ثم قم بإعداد محاقن التدفق كما هو موضح للتو ، ولكن دون تحميل المحاقن بوسط التسريب. لتحضير عينة من الكرة الأرضية للعين البشرية ، قم بإزالة غمد العصب البصري وإزالة الخلط الزجاجي من الجزء الخلفي.

لضمان ملاءمة جيدة للقبة المستديرة لغرفة IOP ، قم بقص الصلبة الإضافية من الجزء الخلفي حسب الضرورة ، واستخدم الملقط لضمان انتشار شبكية العين بالتساوي على الجزء الخلفي البشري من الجزء. ثم ضع الجزء في غرفة IOP الخاصة ب TAS فوق القبة المستديرة بحيث يكون العصب البصري متجها لأعلى ، واستخدم حلقة O من راتنجات الايبوكسي وأربعة براغي لإغلاق الجزء الخلفي. لإعداد غرفة IOP ، أدخل الأنبوب في منافذ الدخول والخارج للغرفة وأدخل حقنة تدفق IOP في منفذ الداخل

أدخل إعداد حقنة تدفق التدفق الخارجي الفارغة في منفذ الإخراج واستخدم طريقة الدفع / السحب لغرس وسط التروية ببطء في منفذ التدفق لملء كوب العين الخلفي ، مع سحب وسط التروية ببطء في نفس الوقت من خلال حقنة التدفق لإزالة أي فقاعات هواء من الخطوط. بمجرد أن تكون كل من أنابيب الداخل والخارج خالية من فقاعات الهواء ، أوقف التسريب وأغلق ديوك التوقف في وضع إيقاف التشغيل. قم بإزالة المحقنة من IOP في مجموعة مرشح المنفذ وأعد ملء المحقنة ب 30 ملليمترا إضافيا من الوسيط ، ثم أعد إدخال إعداد المحقنة في مجموعة المرشح.

لإعداد غرفة برنامج المقارنات الدولية ، ضع الغرفة فوق الجزء الخلفي من الجزء الخلفي ، مع الحرص على أن يكون العصب البصري داخل الغرفة العلوية ، وأغلق الغرفة العلوية بأربعة براغي ثم أدخل الأنبوب في منافذ الدخول والخارج لغرفة برنامج المقارنات الدولية ، حقنة إدخال برنامج المقارنات الدولية في المنفذ الداخلي ، وحقنة تدفق ICP الفارغة في منفذ الخارج لشطف النظام بوسيط كما هو موضح للتو. لإعداد نظام تسجيل البيانات ، قم بتشغيل مصدر الطاقة ذو الثماني قنوات والكمبيوتر ، وابدأ برنامج الحصول على البيانات. حدد ملف وجديد وحدد إعدادات الإعداد والقنة.

حدد ثلاث قنوات ، وأعد تسمية القنوات كما هو موضح. حدد مللي فولت للنطاق على الكل إذا كانت القنوات وفي عمود الحساب ، حدد لا يوجد حساب للقناتين الأولى والثانية. حدد الحساب للقناة الثالثة في نافذة الصيغة، ضمن القنوات، حدد القناة 2.

ضمن الوظيفة ، حدد الرياضيات والطرح ، وضمن القنوات ، حدد الفصل 1. لإعداد ومعايرة محولات الضغط الهيدروستاتيكي ، قم بتوصيل محولات الضغط الهيدروستاتيكي بخطوط محول الطاقة المتصلة بمكبر الصوت الجسر متعدد القنوات ، وقم بتوصيل حقنة فارغة سعة 30 مليلتر بالمنفذ الجانبي للقناة محول ضغط ICP واحد. قم بتوصيل مقياس ضغط الدم بأسفل القناة محول ضغط برنامج المقارنات الدولية ، وانقر فوق السهم الموجود بجوار وقت أخذ العينات لضبط سرعة أخذ العينات على 100.

حدد Bridge Amp ومرشح التيار الكهربائي وZero ، وانتظر حتى ينتهي النظام إلى الصفر ، مع الحرص على عدم تحريك محول الضغط. بعد ذلك ، اضغط على الألسنة البيضاء لمحول الضغط وادفع الهواء عبر محول الطاقة حتى يتم الحصول على 40 ملم من الزئبق على مقياس ضغط الدم ، ثم حرر الألسنة البيضاء وقم بإزالة المحقنة ومقياس ضغط الدم. في صفحة تحويل الوحدات، حدد ناقص وقم بتمييز أعلى هضبة للإشارة إلى 40 ملم من الزئبق.

انقر فوق السهم ل 0.1 ، وأدخل 100 ، وقم بتمييز الهضبة السفلية للإشارة إلى صفر ملليمتر من الزئبق. انقر فوق السهم ل 0.2 ، وأدخل صفرا ، وحدد ملليمترات الزئبق للوحدات ، وانقر فوق موافق. في نافذة Bridge Amp ، انقر فوق موافق ، وقم بمعايرة محولات الضغط الهيدروستاتيكي للقناة الثانية IOP كما هو موضح للتو ، باستخدام 100 ملم من الزئبق لأعلى هضبة ، وصفر للهضبة الأدنى.

لتوصيل وحدة المقطع الخلفي TAS بنظام الحصول على البيانات ، ضع وحدة الجزء الخلفي TAS في حاضنة ثاني أكسيد الكربون 37 درجة مئوية و 5٪ ، وقم بتوصيل أنبوب ICP من المنفذ الخارجي للقناة محول ضغط ICP واحد. قم بتوصيل أنبوب IOP من منفذ الخارج إلى محول ضغط IOP للقناة الثانية. في صفحة طريقة عرض المخطط، حدد بدء أخذ العينات وقم بتعيين سرعة أخذ العينات إلى بطيء ودقيقة واحدة.

ثم اضبط المحاقن الموجودة على الحلقة لأعلى أو لأسفل لتنظيم ضغوط ICP و IOP وفقا لمتطلبات البروتوكول ، أو ضعها على مضخات التروية لتنظيم الضغط. في هذا التحليل التمثيلي ، تم اختبار الحفاظ على متوسط فروق الضغط العادي في كلتا الغرفتين من خلال معلمات مختلفة لظروف IOP و ICP. لضمان صلاحية الأنسجة ، تم تبادل الوسط الموجود في الأنسجة كل 48 ساعة.

حدثت زيادات ضئيلة في الضغط في وقت التبادل المتوسط ، ولم تؤثر على جدوى أو مورفولوجيا رأس العصب البصري كما لوحظ من خلال التحليل الكيميائي المناعي والتعبير عن الكولاجين الرابع في اليومين 14 و 30 من التجربة. تسمح زيادة IOP أو تقليل برنامج المقارنات الدولية عبر نقاط زمنية مختلفة بالحفاظ على نطاق في تدرج الضغط عبر الصفيحة المرتفع لمدة سبعة أيام. في سبعة أيام من تدرج الضغط المرتفع عبر الصفيحة ، لوحظ الحجامة والسماكة في الأجزاء الخلفية ، ويظهر تعبير الكولاجين الرابع حزما سميكة مع زيادة تعبير الإشارة خلال الفترة التجريبية.

يكشف تصوير الطور عن خلايا عقدية شبكية صحية داخل طبقة الخلية العقدية مع عدم وجود حجامة في أجزاء التحكم ، بينما تظهر الصور من ثقافات تدرج الضغط المرتفع الحجامة واسعة النطاق مع عدم وجود خلايا عقدية شبكية متبقية داخل طبقة الألياف العصبية للشبكية ، وزيادة إعادة تشكيل المصفوفة الخلوية الإضافية. ستسمح هذه التقنية للباحثين بدراسة نماذج الأمراض الميكانيكية الحيوية بشكل فعال ، واكتشاف الضغط عبر الصفحي الذي يستهدف التسبب في المرض الجزيئي في العين البشرية.