يونيو 15, 2020
يظهر هنا بروتوكول لتقييم وظيفة القلب ثنائي البطينين في الفئران عن طريق توليد حلقات حجم الضغط (PV) من البطين الأيمن والأيسر في نفس الحيوان باستخدام قسطرة الصدر المغلقة. ينصب التركيز على الجانب التقني للجراحة والحصول على البيانات.
يسمح هذا البروتوكول بتوصيف شامل وقوي لوظيفة القلب ، بالإضافة إلى القياس الكمي للوظيفة الانقباضية والانبساطي في البطين الأيسر والأيمن للفئران. تقترح هذه التقنية توصيفا عالميا لوظيفة القلب في الفئران لأنها تقترح تصنيفا يمينا ويسارا في نفس. للبدء ، عزل الشريان السباتي الأيمن عن طريق التشريح الحاد لإزاحة العضلة اللامية القصية بشكل جانبي لفضح وعزل الشريان السباتي الأيمن.
ثم استخدم ملقط التشريح الحاد للرمل لعزل الشريان السباتي عن العصب المبهم وتمرير ثلاث خيوط جراحية 4-0 تحت الشريان ، ولكن ليس العصب. لعزل الوريد الوداجي الأيمن ، قم بإزاحة الغدد تحت الفك السفلي والغدد النكفية بشكل جانبي. لتصور الوريد الوداجي الأيمن واستخدام الملقط لتشريح وفضح الوريد الوداجي الأيمن بشكل صريح.
قم بتشريح الوريد بعناية لإزالة اللفافة المحيطة ، وتمرير الملقط تحت الوريد الوداجي. مرر خياطة جراحية تحت الوريد ، واربط الخيط بالجانب الجمجفي من الوريد. استخدم مشبك مرقئ لتطبيق جر لطيف على الخيط في اتجاه الرأس ، وتمرير خيوط إضافية تحت الوريد الوداجي.
استخدم مشبك ثان لسحب الخيط البعيد برفق في اتجاه الذيلية وعمل عقدة فضفاضة في الخيط الأوسط. ثم ضع عدة قطرات من المحلول الملحي الفسيولوجي الدافئ على الوعاء في موقع بضع الوريد المتوقع. لقسطرة البطين الأيمن ، ضع الفأر تحت مجهر ستيريو وحدد الوريد الوداجي.
قم بتطبيق الجر الفائق برفق على الوريد وأدخل إبرة منحنية قياس 30 بين الجمجمة والخيوط بزاوية 140 درجة. لضمان دخول الإبرة بطريقة متحدة المحور. عند الإدخال، حرك الإبرة لتوسيع بضع الوريد وأدخل طرف قسطرة بطول ستة ملليمترات أسفل الإبرة في بضع الوريد.
بعد دفع القسطرة إلى البطين الأيمن ، راقب شكل موجة ضغط البطين الأيمن الكلاسيكي على شاشة مستمرة لتأكيد الوضع الصحيح للقسطرة. إذا لزم الأمر ، قم بتدوير عمود القسطرة برفق حتى يتم تحقيق الوضع الأمثل للقسطرة على طول محور البطين الأيمن. لضمان الموضع الصحيح للقسطرة في البطين الأيمن والأيسر ، عليك قراءة وتفسير الضغط والحجم والحجم والمراحل والآثار بعناية ، في نفس الوقت الذي تقوم فيه بتحريك القسطرة.
عند الحصول على إشارة حلقة حجم الضغط المثلى، اضغط على Enter على وحدة التحكم لإجراء فحص أساسي ومراقبة معدل ضربات القلب. لإنشاء حلقات حجم الضغط ، قم بتغيير معلمة المحور X من الحجم إلى الحجم ، مع ترك الضغط كمحور Y. عندما تكون إشارة حلقة حجم الضغط هي الأمثل.
سجل لمدة 30 ثانية. في نهاية التحليل ، أوقف التسجيل. ثم ضع القسطرة التي تمت إزالتها في محلول كلوريد الصوديوم الهيبارين.
لقسطرة البطين الأيسر ، ارفع الشريان السباتي الأيمن برفق باستخدام ملقط ، واربط خياطة الجمجمة ، وبالتالي انسداد الشريان. استخدم مشبك مرقئ لتطبيق الجر الموجه بالقحف برفق على الوعاء واستخدم مشبك لسحب الخيط البعيد في اتجاه الذيلية. اصنع عقدة فضفاضة على الخيط الأوسط وأضف عدة قطرات من المحلول الملحي الفسيولوجي الدافئ على الوعاء في موقع بضع الشرايين المتوقع.
استخدم المجهر للتركيز على قسم الجمجمة بين الخيط الذيلي والأوسط وقم بتطبيق الجر الفائق برفق على الشريان. بعد إدخال القسطرة كما هو موضح للبطين الأيمن ، وأكد أن تسجيل قناة الضغط يظهر أثرا نموذجيا للشريان الأورطي ، فإن تقدم القسطرة إلى البطين الأيسر سيكون واضحا من الانخفاض المفاجئ في السوق في الضغط الانبساطي من الشريان الأورطي. لتثبيت ضغط البطين الأيسر، استخدم حلقة حجم الضغط لتأكيد الوضع الصحيح للقسطرة في البطين الأيسر.
أوقف التسجيل وقم بإزالة القسطرة. ضع القسطرة في محلول كلوريد الصوديوم الهيبارين واربط الخيط الذيلي. ثم نظف القسطرة بمنظف إنزيمي.
في هذا الشكل ، يمكن ملاحظة حلقات الضغط المثلى التمثيلية الناتجة عن قسطرة يتم إدخالها بشكل صحيح عبر الوريد الوداجي وتتقدم إلى البطين الأيمن. يتضح الوضع غير الصحيح داخل البطين الأيمن من خلال ظهور حلقات حجم الضغط المعيبة. يؤدي الوضع الأمثل للقسطرة إلى الوراء عبر الصمام الأبهري في البطين الأيسر أيضا إلى نمط حلقة ضغط محدد.
يظهر هذا على شكل حلقات معيبة في حالة وجود قسطرة في وضع غير صحيح. تسمح هذه التقنية باكتساب قيم شاملة للضغط الانقباضي للبطين الأيسر والأيمن. كما أنه يوفر معلمات انبساطي ، وينتج معلومات حول العديد من المقاييس المتقدمة للانقباض واللواز
.تسهل هذه التقنية أيضا تقييم كفاءة البطين الأيسر والأيمن والحمل اللاحق لمرحلة البطين. يمكن استخدام هذه التقنية لتقييم وظيفة البطين الأيمن والأيسر في أمراض القلب والأوعية الدموية. على سبيل المثال ، يمكن استخدامه لتقييم وظيفة البطين الأيمن استجابة لزيادة الحمل اللاحق في ارتفاع ضغط الدم الرئوي.
الممارسة الشاملة ، ومجال التخلص الجيد ، والأداة الجراحية الجيدة ، والحفاظ على رطوبة الوريد الزاوي السباتي هو مفتاح نجاح هذا الإجراء.
يفصل هذا البروتوكول طريقة لتقييم وظيفة البطينين في قلب الفئران من خلال إنشاء حلقات الضغط والحجم (PV loops) باستخدام قسطرة الصدر المغلقة. وهو يركز على التقنيات الجراحية وعملية الحصول على البيانات اللازمة لإجراء قياسات دقيقة.
يعد تقييم وظيفة القلب في البطينين في النماذج قبل السريرية أمراً بالغ الأهمية لتقليل المخاطر المرتبطة بالمرشحات الدوائية للقلب والأوعية الدموية، وذلك من خلال تقديم رؤى ميكانيكية حول الأداء الانقباضي والانبساطي. يتيح الحصول على حلقات الضغط والحجم في الفئران عبر تقنية الصدر المغلق رسم ملفات ديناميكية دمويّة ذات صلة فسيولوجياً تحاكي القسطرة السريرية، مما يعزز الثقة الترجمية في التحقق من الأهداف وتحسين المركبات الرائدة. يقلل هذا النهج من الغموض البيولوجي في مراحل الاكتشاف المبكرة من خلال تقديم بيانات كمية وقابلة للتكرار حول التداخل البطيني والقدرة التقلصية.
تتكامل هذه الطريقة ضمن تسلسل عملية الاكتشاف، بدءاً من التحقق من الهدف ووصولاً إلى تحديد المركبات الواعدة ثم اختبار الفعالية قبل السريرية، مما يوفر توصيفاً ظاهرياً وظيفياً للقلب في كل مرحلة.