إنتاج دجاج التسمين سريع النمو الخالي من الجراثيم من خط تجاري لدراسات الميكروبات

حتى الآن ، كان إنتاج الطيور الخالية من الجراثيم يقتصر على سلالات للبحث. نوضح هنا أنه من الممكن القيام بذلك مع التجارية. تتيح هذه التقنية إجراء دراسات حول تأثير الكائنات الحية الدقيقة باستخدام الخلفية الجينية لطيور المزرعة.

عند محاولة هذا البروتوكول ، من المهم التحكم في تكاثر الأنواع المختارة في الظروف القياسية وامتلاك معرفة قوية بالعمل في العوازل. ابدأ بإعداد أنابيب سعة 50 ملليلترا وماصات بلاستيكية وتغذية مشعة ومياه معقمة وحاويات بلاستيكية معقمة محكمة الغلق في عازل صلب تحت ضغط إيجابي. املأ مصيدة مبيد الجراثيم المنقولة بمحلول الأمونيوم الرباعي بنسبة 2٪ وقم بتعقيم العازل ثلاث مرات ببخار الفورمالديهايد لتحريك المواد داخل العازل بين كل تعقيم لضمان تطهير جميع أسطح التلامس.

قبل يومين على الأقل من إدخال البيض ، اضبطي درجة حرارة العازل على 37 درجة مئوية. في يوم التقديم ، اضبط مقياس كثافة السوائل على 65 إلى 70٪ من الرطوبة النسبية. بعد اختيار بيض نظيف وخالي من العيوب ، قم على الفور بتطهير سطح البيضة عن طريق غمسها في محلول حمض البيراسيتيك بنسبة 1.5٪ لمدة خمس دقائق ، ثم انقل البيض إلى المنشأة التجريبية باستخدام صندوق مطهر ببخار الفورمالديهايد.

قم بتخزين البيض لمدة 24 ساعة عند 14 درجة مئوية ، ثم كرر التعقيم بحمض البيراسيتيك بنسبة 1.5٪ وضع البيض في حاضنة تفقيس لمدة 19 يوما. في اليوم 19 ، تحقق من خصوبة الجنين وقابليته للحياة وتطوره باستخدام شمعة بيض خفيفة في ظل ظروف معقمة. اختر البيض الحي المجنين وقم بتطهيره عن طريق رشه بمحلول حمض البيراسيتيك بنسبة 1.5٪ لمدة 30 ثانية أو حتى يتم تغطية سطح كل بويضة بالكامل.

انقل البيض إلى عوازل الفقس المعقمة واشطفها بالماء المعقم منزوع المعادن قبل وضعها في مساحة الفقس. بعد الفقس ، يتم الاحتفاظ بالحيوانات في عوازل معقمة ، ويتم إطعامها بنظام غذائي تجاري معقم بإشعاع جاما وتسقى بماء الصنبور المعقم. بعد يوم واحد من الفقس ، خذ عينة براز مباشرة من مستقيم الكتاكيت المختلفة وقم بتجميعها في أنبوب زجاجي معقم.

أضف ملليلترا واحدا من البراز إلى تسعة ملليلتر من مرق الثيوغليكولات مع ريزازورين وأضف العينة المتبقية إلى تسعة ملليلتر من تسريب قلب الدماغ أو مرق BHI. احتضان الأنابيب عند 37 درجة مئوية دون اهتزاز لمدة 18 إلى 48 ساعة. في 18 ساعة ، افحص الأنابيب بصريا بحثا عن أي تعديل في وسط النمو.

بعد 48 ساعة ، خذ قطرة من وسائط مرق البراز BHI ، وضعها على شريحة زجاجية وراقبها تحت المجهر. في حالة الاشتباه في وجود بكتيريا ، خذ عينة من مزرعة BHI وبذرها على صفيحة أجار BHI ، ثم احتضن اللوحة عند 37 درجة لمدة 18 إلى 48 ساعة. إذا ظهرت مستعمرات ، فحدد البكتيريا باستخدام تقنية عالية الإنتاجية مثل قياس الطيف الكتلي MALDI-TOF.

تم إجراء ستة جولات من توليد الكتاكيت الخالية من الجراثيم باستخدام بيض ROSS PM3 القادم من مزرعتين فرنسيتين مختلفتين. تم جمع ما مجموعه 853 بيضة وبعد خطوتين لإزالة التلوث و 19 يوما من الحضانة ، كانت 86.40٪ قابلة للحياة. من بين البيض القابل للحياة ، خضع 490 بيضا ثالثا لإزالة التلوث وتم إدخالهم في عوازل الفقس المختلفة بمتوسط معدل تفريخ يبلغ 79.80٪ ، وهذا يمثل معدل فقس 68.94٪ مقارنة بالعدد الأولي للبيض الذي تم جمعه.

تختلف نتائج الفقس اختلافا كبيرا من 41.67٪ إلى 88.16٪ من الكتاكيت القابلة للحياة مقارنة بعدد البيض الذي تم جمعه. كان هذا التأثير مرتبطا ارتباطا مباشرا بعمر الدجاج البياض حيث كان البيض القادم من الدجاج الأكبر سنا أقل قابلية للحياة. تم تنفيذ الجولات الستة باستخدام أربعة عوازل تفقيس مختلفة.

بعد المكافحة البكتريولوجية ، تم تأكيد أن من 14 من أصل 16 عوازلا خالية من الجراثيم ، وهو ما يتوافق مع معدل نجاح 86.5٪النقطة الأساسية لهذا الإجراء هي الحفاظ على عقم المعزل. يتطلب ذلك الامتثال لإجراءات التطهير وقبل كل شيء ، التحكم في إدخال العناصر عبر غرفة معادلة الضغط السائلة. يوفر هذا الإجراء للحيوانات قياس تأثير الجراثيم على فسيولوجيا وصحة الطيور.

يمكن تكييفها واستخدامها لدراسة الجراثيم من الطيور المستزرعة الأخرى أو الحياة البرية إذا كان من الممكن الوصول إلى البيض.