بروتوكول محسن لتنقية ومباشرة أحادية الحيوية المؤتلف BDNF في أنبوب لدراسات الاتجار الخلوي في الخلايا العصبية

5.4K مشاهدة

استشهد بها 4

13:46 دقيقة

يوليو 11, 2020

10.3791/61262-v

يوليو 11, 2020

5.4K مشاهدة

Nicolás Stuardo¹^,² , Guillermo Moya-Alvarado¹^,³ , Carolina Ramírez¹^,³ , Giampietro Schiavo⁴ , Francisca C. Bronfman¹^,³

¹Department of Physiology, Faculty of Biological Sciences, Pontificia Universidad Católica de Chile, ²Department of Molecular and Cellular Biology, Faculty of Biological Sciences, Center for Aging and Regeneration (CARE UC), Pontificia Universidad Católica de Chile, ³Institute of Biomedical Sciences. Faculty of Medicine and Faculty of Life Sciences, Universidad Andrés Bello, ⁴Department of Neuromuscular Diseases, UCL Queen Square Institute of Neurology and UK Dementia Research Institute at UCL, University College London Campus

يتم إنتاج BDNF المؤتلف الذي يحتوي على تسلسل Avi (BDNFAvi) في خلايا HEK293 بطريقة فعالة من حيث التكلفة ويتم تنقيته بواسطة الكروماتوغرافيا المتقاربة. ثم BDNFavi هو مباشرة أحادية الحيوية مع إنزيم BirA في أنبوب. يحتفظ BDNFavi و BDNFavi أحادية الفينيل البيولوجية بنشاطهم البيولوجي عند مقارنتها بـ BDNF المتوفرة تجاريًا.