مزدوجة الحقن المباشر للدم في ماغنا سيستيرنا كنموذج للنزف تحت العنكبوتية

الهدف العام لهذا الفيديو الحالي هو شرح بروتوكول حقنة مباشرة مزدوجة من الدم في ماجنا سيستيرنا كنموذج للنزف تحت العنكبوتية. غالبًا ما يكون علم وظائف الأعضاء في البواسير تحت العنكبوتية راجعًا إلى تمزق تمدد الأوعية الدموية. ونحن نقوم أولاً بإسراف الدم في المقصورة بين الدماغ والأنسجة التي تغطي الأدمغة.

هذه المقصورة هي مساحة تحت العنكبوتية. يمثل البواسير تحت العنكبوتية ما يصل إلى 7٪ من جميع حالات الإضراب. الوفيات تتراوح بين 30 إلى 50٪ في الدراسات السكانية القائمة والناجيات من البواسير تحت العنكبوتية عادة تجربة التتمة المعرفية كما العجز في الذاكرة، واضطرابات في الذاكرة، أو المزاج.

السبب الرئيسي في ارتفاع معدل انتشار النتائج السيئة هو ما هو نقص التروية الدماغية. جعلت الدراسات صلة بين حدوث نقص التروية في الأوعية الدموية للشرايين الدماغية الكبيرة ، واسمه الأوعية الدموية المجهرية التي يمكن الكشف عنها في غالبية المرضى بين اليوم الرابع والخامس عشر بعد أول حدث الانتفاخ. بسبب عدم كفاءة الخيارات العلاجية الحالية ، هناك حاجة طبية واضحة لفهم أفضل للأحداث المرضية.

وينبغي اختبار الباسور تحت العنكبوتي والأهداف العلاجية الجديدة المصاحبة، ولكن هذا يتطلب نماذج حيوانية متنوعة وموحدة. من المرجح أن يكون من الصعب أن يكون تمزق تمدد الأوعية الدموية بين الأوعية الدموية مسؤولة في الغالب عن البواسير تحت العنكبوتية في البشر لجعل النماذج قبل الظهرية والإنسان. في الحيوانات، تكمن الصعوبات الرئيسية في السيطرة على حدوث النزيف وتوزيع الدم، ولكن الدراسات الحديثة تركز على تطوير نماذج أكثر إعادة توجيهي من نماذج من البواسير تحت العنكبوتية.

هنا تمثل نموذج الماوس موحدة من اثنين من الحقن المتتالية من الدم الشرياني الذاتي من يومين لدينا في ماغنا سيستيرنا. المزايا الرئيسية لهذا النموذج هي أن تتقن بشكل مُسْكَن إجراء جراحي غير جراحي، لتكييف نوعية وكمية الدم المحقون، وتعزيز حدث النزيف دون زيادة كبيرة في الضغط داخل الجمجمة. قبل بداية الجراحة، لديك لوضع آخر عدد كبير من الشعيرات الدموية الزجاجية باستخدام جرة ميكروبليت.

وينبغي أن يحمل ماصة حقن قطر داخلي من 0.86 ملليمتر وقطر خارجي من 0.5 ملليمتر. إعداد السائل الشوكي الدماغي الاصطناعي لحالة صورية، كما هو مبين في البروتوكول المكتوب. يجب أن ندرك هذا الأكسجين السائل الشوكي الدماغي الاصطناعي مع جهاز مرشح 0.22 ميكرون.

الخطوة الأولى من نموذج البواسير تحت العنكبوتية لدينا تتكون في عزل الشريان السباتي على طول القصبة الهوائية وجمع الحد الأقصى من الدم من ثقب الشريان السباتي. بعد التخدير بواسطة ايزوفلوران ، تحقق من عدم وجود ردود الفعل عن طريق لقط واحد أو اثنين من الأطراف الخلفية للسماح بإعداد الإجراء التجريبي. رمز حقنة ملليمتر واحد مع إبرين باستخدام إبرة قياس 26.

وهذا سوف يمنع تخثر الدم خلال الخطوات التالية. وزن كل فأرة بدقة باستخدام توازن إلكتروني. في الدراسة الحالية، سيكون وزن الجسم لدى الفئران يتراوح بين 20 و25 جرامًا قبل الجراحة.

كما سبق شرحه ، والتخدير المستحث للماوس التي تعمل ثم حلق الرقبة والفضاء بين كل أذن عن طريق مقص الكهربائية المناسبة. الماوس هو النوم الاختيار ورأس الماوس هو حظرها بشكل جيد. حقن تحت الجلد 100 ميكرولتر من البوبرينورفين في 0.1 ملليغرام للكيلو مع إبرة قياس 26 في أسفل الظهر لتجنب الألم بعد الصحوة.

منع جفاف العين باستخدام هلام سائل واقية والحفاظ على درجة حرارة داخل المستقيم من 37 درجة باستخدام بطانية كهربائية تنظم السيارات. قبل معالجة المنطقة الحليقة بمحلول مطهر ، تم تعقيم جميع الأدوات التي تمس الأنسجة وتم التعامل معها بشكل معقم. في اليوم الأول ، قطع شق سنتيمتر واحد في الرقبة الخلفية ، يليه فصل العضلات على طول خط الوسط ، للوصول إلى ماجنا سيستيرنا.

قطع غيض من ماصة الزجاج فارغة مع مقص رقيقة. ثم تتكيف مع حقنة متصلة بموصل سليكون مرن. ثم نقل 60 ميكرولترات من الدم أو السائل الشوكي الدماغي الاصطناعي في أنبوب 0.5 ملليلتر باستخدام ميكروبيبت دقيق تمتص في الماصات الزجاجية، و60 ميكرولترات من الدم لحالة البواسير تحت العنكبوتية أو 60 ميكرولترات من السائل الشوكي الدماغي الاصطناعي للحالة الزائفة.

للحقن، أدخل الماصة على إطار stereotactic باستخدام، على سبيل المثال، لدينا حلقة أو نهج ببطء تلميح ماصة إلى الغشاء في واجهة مع ماغنا سيستيرنا. إدراج ببطء تلميح ماصة من خلال الغشاء الأتلني القذالي في magna cisterna باستخدام ميكرومانيبولاتور من الإطار المجسم. توصيل ماصة إلى حقنة شغلها سابقا، وعلى استعداد لالتحث الضغط.

حقن بالضغط بمعدل منخفض حوالي 10 ميكرولترات في الدقيقة لتجنب ارتفاع ضغط الدم الحاد داخل الجمجمة. أثناء الحقن، مراقبة عن كثب معدل التنفس ودرجة حرارة المستقيم. في نهاية الحقن، وخلع بعناية من الماصات باستخدام micromanipulator ورعاية بصريا لا يوجد تسرب أثناء الانسحاب.

تحقيق التوازن وتنفيذ اثنين من الغرز مع خيط خياطة غير قابلة للامتصاص مضفر. مباشرة بعد الجراحة، عزل ووضع الماوس في تراجع decubitus وتغطية مع بطانية البقاء على قيد الحياة في صندوق مفتوح لمدة الشفاء. بعد 24 ساعة ، والحث على التخدير مرة أخرى ، وتثبيت الماوس على إطار stereotactic كما في اليوم السابق وإزالة بعناية الغرز مع مقص صغير.

إعداد كما كان من قبل معقمة من الغشاء القذالي atlanto، من خلال تطبيق على منطقة حليق والمحلول مع قطن. حقن، كما في اليوم السابق، 30 ميكرولترات من الدم أو السائل الشوكي الدماغي الاصطناعي بمعدل منخفض. كما سبق ذكره، رصد معدل التنفس ودرجة حرارة المستقيم.

في نهاية الحقن، وخلع دقيق من الماصات والسيطرة على عدم تسرب الدم أثناء الانسحاب. تحقيق التوازن وتنفيذ اثنين من الغرز مع خيط خياطة مضفر امتصاص. من اليوم الأول بعد الجراحة إلى يوم التضحية، ينبغي تقييم وزن الجسم يوميا كمؤشر حساس للرفاه العام.

وأظهرت زيادة كبيرة في وزن الجسم انخفاض في البواسير تحت العنكبوتية، مقارنة مع الحيوانات الشام، مما يشير إلى عملية انتعاش النشاط طويلة الأمد والأحداث المرضية لفترات طويلة، بعد البواسير تحت العنكبوتية. لماذا الوفيات ليست في حالة صورية؟ الوفيات قريبة من 30٪ في اليوم السابع في حالة البواسير تحت العنكبوتية، مع معظم الحيوانات تموت في يوم واحد أو اليوم الرابع بعد الجراحة.

بين نقاط النهاية الإنسانية، ويلاحظ فقدان الوزن كبيرة متفوقة من 15٪ من الوزن الأولي. موقف حدب الظهر "، والحركات البطيئة، والجروح، والغناء غير طبيعي أو العدوان الكبير هي أيضا علامات على أن الحيوان يعاني. إذا ظهر أي من هذه العلامات أو مجموعة من العلامات ، يتم تعزيز تتبع الحيوان في غضون ساعات التي تتبع مظهره.

إذا ساءت حالة الحيوان في الساعة التالية أو لم تتحسن في غضون 48 ساعة ، سيعتبر أنه يتم الوصول إلى مستوى من المعاناة التي لا تطاق ويتم القتل. في هذا المثال في اليوم الأول من الجراحة ، يمكن ملاحظته من عينة الدماغ ، جلطات الدم على طول الشرايين الكبيرة لمضلع ويليس في موضوع البواسير تحت العنكبوتية. في اليوم الخامس بعد الجراحة وقبل التضحية ، يسمح حقن الحبر الهندي بين الأوعية الكشف عن vasospasm العيانية المقابلة لافساونتريكشن من الشرايين الدماغية الكبيرة ، تلوين شرائح الدماغ مع الهماوكسيلين ويوسين يسمح بقياس vasospasm الدماغي.

هنا ، كما هو موضح في هذه الصورة المجهرية ، يمكنك مراقبة كـ vasospasm من الشريان باسيلار. في هذا النموذج من تحويل الحقن المباشر للدم في ماغنا سيستيرنا، وقد أظهرنا مؤخرا vasospasm الدماغي من الشرايين الدماغية الكبيرة، ترسب فيبريل الأوعية الدموية الدماغية، وخلية موت الخلايا، يرافقه تغيير الحسية، والسيارات، والوظائف المعرفية في الفئران. وهكذا، فإنه يجعل هذا النموذج التحقق من صحة وتميز للأحداث على المدى القصير وطويلة الأمد، بعد نزيف تحت العنكبوتية.

وينبغي أن تكون مناسبة بشكل مثالي لتحديد الأهداف الجديدة المحتملة والدراسات على استراتيجيات علاجية فعالة ضد مضاعفات البواسير دون العنكبوتية المرتبطة.