التقييمات الهيكلية في الجسم الحي لأمراض العين في نماذج القوارض باستخدام التصوير المقطعي للتماسك البصري

التصوير المقطعي للتماسك البصري للمجال الطيفي أداة قيمة لتصوير هياكل العين في الجسم الحي ، ولتتبع التغيرات في أبعاد العين بمرور الوقت في مجموعة متنوعة من نماذج أمراض العيون. نستخدم SDOCT لقياس سمك الشبكية في نماذج تنكس الشبكية في اعتلال الشبكية السكري ، وسمك الشبكية والحجامة في نموذج الجلوكوما ، والطول المحوري في نموذج قصر النظر. تقنية SDOCT واضحة ومباشرة ، لكن الممارسة أمر بالغ الأهمية في الحصول على صور جيدة.

وتعد تجربة بروتوكولات مختلفة أمرا مهما لتحديد البروتوكول الذي يناسب كل حاجة بحثية. سيوضح الإجراء أندرو فيولا ، الباحث الرئيسي من مركز إعادة التأهيل البصري والعصبي المعرفي. ابدأ بفتح برنامج التصوير المقطعي للتماسك البصري للمجال الطيفي ، وإدخال دراسة الاستحواذ ومعلومات ذراع العلاج.

ضمن علامة التبويب فحص المريض، انقر فوق فاحص الاختبار وحدد اسم الممتحن. انقر فوق اسم الدراسة لتحديد الدراسة وافتح علامة التبويب دراسة لإضافة دراسة جديدة أو لتعديل العلاجات في دراسة موجودة. انقر على يسار تحديد ذراع العلاج لتحديد ذراع العلاج.

لإضافة نقطة زمنية جديدة لمجموعة بأكملها، انقر على إضافة مريض. في النافذة ، أدخل رقم الهوية والاسم الأول والأخير. حدد جنس المريض وتاريخ الميلاد.

لإضافة الفئران الفردية، انقر فوق إضافة اختبار. لتحديد الفئران ، انقر فوق اختبار وانقر فوق تحرير الاختبار. أدخل رقم المعرف في مربع إدخال الملاحظات وانقر فوق حفظ التغييرات.

بعد ذلك ، قم بتوصيل العدسة المناسبة بالجهاز. حدد التكوين المقابل في البرنامج واطلب موضع الذراع المرجعي المقترن. ضمن علامة التبويب فحص المريض ، انقر نقرا مزدوجا فوق الاختبار المميز للمتابعة إلى علامة التبويب التصوير وبدء التصوير.

لتحميل بروتوكول فحص معين مسبقا، انقر فوق تحديد بروتوكول من القائمة. بالنسبة لنماذج الفئران من الجلوكوما واعتلال الشبكية السكري ، حدد إعدادا مسبقا يتكون من اثنين من OD واثنين من نظام التشغيل ، لفحوصات العين اليمنى واليسرى على التوالي. بعد وضع الجرذ المخدر في نظام محاذاة القوارض ، ضع مادة التشحيم على عيون.

قبل التصوير مباشرة ، استخدم مهمة دقيقة امسح لإزالة أي محلول ملحي زائد ، واستخدم حركتين دورانيتين لنظام محاذاة القوارض لوضع الجرذ بحيث تكون النظرة أفقية ، والنظر إلى محور عدسة التصوير المقطعي للتماسك البصري. استخدم وضع التشغيل الحر لتوجيه شبكية العين لجمع البيانات. ثم استخدم وضع التصويب لعرض مستمر لكل من عمليات المسح الضوئي B الأفقية والرأسية في الوقت الفعلي.

حرك رأس الفحص بالقرب من العين حتى تصبح شبكية العين مرئية ، واستخدم نظام محاذاة القوارض لضبط موضع حتى يظهر رأس العصب البصري في المركز. اجعل المسح الأفقي أفقيا ، والمسح الرأسي عموديا. اضبط مسافة العمل بحيث تكون صورة الشبكية مسطحة وليست منحنية ، واضبط موضع الذراع المرجعي لإبقاء الصورة بالقرب من الجزء العلوي من نافذة العرض.

لتصوير الشبكية للجلوكوما وأنماط تنكس الشبكية واعتلال الشبكية السكري ، حدد فحصا حجميا بمقدار ثلاثة في ثلاثة ملليمترات يتكون من 1 ، 000 مسح A بواسطة 100 B بواسطة 1 فحص B متكرر للمتوسط. قم بتوسيط العصب البصري في المحور الأفقي والرأسي بحيث يكون فحص الحجم في المنتصف بشكل مستقيم على طول المحاور الأنفية والزمنية والعلوية السفلية. انقر فوق لقطة لالتقاط صورة وانقر فوق حفظ لحفظ الصورة.

الحصول على مسح شعاعي متمركز في رأس العصب البصري وهو 1,000 A المسح الضوئي بواسطة 4 B المسح الضوئي بواسطة 20 فحصا B متكررا. واستخدم فحوصات B المتكررة لتعزيز وضوح صورة العين أو شبكية العين لتسهيل تفسير مناطق العين أو طبقات الشبكية أثناء تحليل البيانات. ثم احفظ الصورة وكرر الفحص للعين المقابلة.

للمعالجة اللاحقة للصور ، افتح برنامج النمذجة الرياضية المناسب. لمعالجة شبكية العين ، حدد فحوصات التصوير المقطعي للتماسك البصري للتحميل ، وانقر لتحديد مركز رأس العصب البصري. سيقوم البرنامج بإنشاء خطوط عمودية تحدد المسافات على جانبي رأس العصب البصري.

في شبكية العين الفئران ، تقع هذه الخطوط على بعد 0.5 و 1.2 ملم من مركز رأس العصب البصري ، مع ما مجموعه أربعة خطوط عمودية تمثل المحاور الأنفية والزمنية والسفلية للعين ، اعتمادا على الفحص B الشعاعي الذي تم تحليله حاليا. على طول كل خط ، حدد طبقة الألياف العصبية للشبكية ، وطبقة الضفيرة الداخلية ، والطبقة النووية الداخلية ، والطبقة الخارجية ، والطبقة الخارجية ، والغشاء المحدد الخارجي ، والأجزاء الداخلية والخارجية ، وظهارة صبغة الشبكية ، وسمك الشبكية الكلي. عند تحديد جميع الطبقات، قم بتصدير القياسات إلى جدول بيانات لتحليل البيانات.

تكشف صور التصوير المقطعي البصري للتماسك البصري في المجال الطيفي التمثيلي عن طبقة نووية خارجية أرق ، والتي تحتوي على أجسام الخلايا المستقبلة للضوء في شبكية العين من الفئران تنكس الشبكية الناجم عن الضوء BALB / c مقارنة بالفئران الضابطة غير التالفة. بعد تحديد سمك طبقة الشبكية ، لوحظ وجود فرق كبير بين الفئران غير التالفة والناتجة عن الضوء لسمك الشبكية الكلي وسمك الطبقة النووية الخارجية وسمك الجزء الداخلي والخارجي. في نموذج ارتفاع ضغط الدم العيني ، لوحظ إعادة تشكيل مميزة في رأس العصب البصري ، بما في ذلك حجامة العصب البصري بعد ثمانية أسابيع.

يكشف القياس الكمي لسمك طبقة الألياف العصبية الشبكية بعد ثمانية أسابيع من ارتفاع ضغط الدم في العين عن ترقق كبير مقارنة بالقياسات الأساسية. يكشف تصوير شبكية العين من نموذج الفئران السكري التحكم في الوستار أنه في عمر ستة أسابيع ، تنخفض طبقة الألياف العصبية للشبكية وسماكة الشبكية الكلية في الفئران المصابة بالسكري مقارنة بفئران الويستار في شبكية العين المحيطية ، مع ملاحظة أكبر الاختلافات في الأرباع السفلية والزمنية لشبكية العين. الطول المحوري للعين في نموذج فأر قصر النظر أطول بشكل واضح من ذلك الذي لوحظ في عيون النوع البري في عمر 84 يوما.

تأتي بيانات قصر النظر هذه من فأر يفتقر إلى جين الساعة ، مما يشير إلى أن جينات الساعة تساهم في تطور قصر النظر. يمكن استخدام قياس هياكل العين باستخدام SDOCT جنبا إلى جنب مع فحوصات أخرى ، مثل مخطط كهربية الشبكية والاستجابة الحركية البصرية ، للكشف عن التغيرات الطفيفة بمرور الوقت في العديد من نماذج أمراض العيون.