Name: نموذج الماوس من عدم استقرار العمود الفقري القطني (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 28 s
Description: تعلم نموذج الفأر لانحلال الغضروف القطني عبر استئصال جراحي للأنسجة الظهرية. يُستخدم سلالة C57BL/6 لدراسة تغيرات الغضروف والعمود الفقري بتقنيات تحليل ثلاثية الأبعاد.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81973607) والبحث والتطوير الأساسي للأدوية (2019ZX09201004-003-032) من وزارة العلوم والتكنولوجيا في الصين.

وتتفق التحقيقات الموصوفة مع المبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام المختبرات التابعة للمعاهد الوطنية للصحة، ووافقت عليها لجنة رعاية الحيوانات واستخدامها التابعة لجامعة شنغهاي للطب الصيني التقليدي. تم إجراء جميع عمليات التلاعب الجراحية تحت التخدير العميق ولم تتعرض الحيوانات للألم في أي مرحلة أثناء العملية.
1. التحضير قبل العملية
<ol><li>تعقيم الأدوات: تعقيم البخار الأدوات الجراحية في أوتوكلاف (121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة) قبل الجراحة. حزمة الأدوات في حاوية معدنية والحفاظ عليها حتى يتم استخدامها في الجراحة.</li>
	<li>إعداد منصة الجراحة: تعيين مساحة مقاعد البدلاء على الأقل 60 سم × 60 سم للعملية. تنظيف سطح المنطقة مع الكحول 75٪ وتغطية مع منشفة طبية المتاح. وضع حزمة أدوات جراحية معقمة، والكواشف، والمواد الجراحية على منشفة طبية المتاح داخل الجزء العلوي من المنطقة. اترك المنطقة المتبقية 2/3 نظيفة للعمليات الجراحية. إضافة لوحة ساخنة تحت لوحة الجراحية للدعم الحراري.</li>
	<li>إعداد الحيوانات<ol>
<li>ضع الحيوان (فئران C57BL/6J ، ذكر ، عمره 8 أسابيع) في غرفة التعريفي. بدوره على المبخر على مستوى التعريفي من 4٪ لisoflurane و 4 لتر / دقيقة للأوكسجين. بعد تخدير الحيوان بالكامل ، حافظ على التخدير مع مخروط الأنف والولادة المخدرة عند مستوى 1.5٪ للأيزوفلوران و 0.4 لتر / دقيقة للأوكسجين أثناء الجراحة. مراقبة الحيوان للتنفس.</li>
		<li>تطبيق مرهم العين الكلورتيتراكلين هيدروكلوريد لمنع جفاف القرنية أثناء الجراحة.</li>
		<li>حلق المنطقة الجراحية على السطح الظهري من المنطقة الصدرية السفلية إلى أعلى المنطقة العجزية باستخدام أداة تشذيب الحيوانات الصغيرة. إزالة الفراء حلق مع مناديل الأنسجة.</li>
		<li>تطبيق كريم إزالة الشعر على منطقة حلق وتركها هناك لا يزيد عن 3 دقائق. إزالة كريم مع الشاش وتدفق مع 2 مل من المالحة العقيمة 0.9٪.</li>
		<li>ضع وسادة أسطوانية جراحية مصنوعة خصيصا(الشكل 2A)تحت بطن الماوس لرفع العمود الفقري القطني وتسهيل العملية الجراحية.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. التعرض الثالث القطني إلى الخامس القطني (L3-L5)العمليات الشوكية
<ol><li>استخدم السبابة للمس العمليات الشوكية تحت الجلد للفقرات القطنية ، والتي هي أكثر إلى الخارج ، ومقارنتها بالفقرات الصدرية والفقرات العجزية لتحديد المنطقة القطنية.</li>
	<li>شطف الجلد باستخدام الكحول 75٪. إجراء شق الجلد خط الوسط 3-4 سم على منطقة الخشب من منطقة منتصف الصدر إلى الورك باستخدام شفرة مشرط لفضح اللفافة.</li>
	<li>تحديد العمود الفقري القطني من قبل مورفولوجيا اللفافة الخلفية إدراجها على نصائح من العمليات الشوكية. بالتفصيل ، فإن الجزء القطني الثالث (L3)إلى أول كيسة (S1)fasciae متميزة عن اللفافة الأخرى بأشكالها "V". آخر تلميح "V" يتصل أولا sacral (S1) اللفافة وأول "V" تلميح يتوافق مع عملية L3 الشوكية (الشكل 2B).</li>
	<li>جعل شقوق العضلات paraspinous الخلفي على طول العمليات الشوكية من L3 إلى L5 على كلا الجانبين أفقيا مع شفرة مشرط(الشكل 2C). السيطرة على عمق شق نحو جوانب للحد من النزيف.</li>
	<li>فصل طبقات العضلات باستخدام اثنين من ملقط العيون لفضح L3 إلى L5 العمليات الشوكية والأربطة فوق النخاعية.</li>
</ol>3. استئصال L3-L5 العمليات الشوكية جنبا إلى جنب مع الأربطة
<ol><li>عمليات منفصلة الفردية الشوكية عن طريق قطع الأربطة بينبينوس باستخدام مقصات الزهرة (الشكل 2D).</li>
	<li>استئصال العمليات الشوكية L3-L5 جنبا إلى جنب مع الأربطة بينبينوس مع مقصات الزهرة (الشكل 2E).</li>
	<li>خياطة شق الجلد مع الحرير المعقم مضفر (حجم خياطة 5.0) دون إعادة ربط العضلات شبه الفقرية.</li>
	<li>تطبيق الكلورتيتراكسيكلين هيدروكلوريد مرهم العين إلى موقع الجراحة.</li>
	<li>إدارة Buprenorphine-SR (25 uL لكل غرام من وزن الماوس) مباشرة بعد جراحة LSI لمسكنات.</li>
	<li>ضع الحيوانات في غرفة دافئة وراقبها أثناء التعافي من التخدير. مراقبة تناول الطعام والماء قبل إعادة الحيوانات إلى القفص المنزلي.</li>
	<li>مراقبة الحيوان مرة واحدة يوميا لأول 3 أيام بعد العملية. يجب أن يكون الحيوان قادرا على الحصول على شهية طبيعية ويجب أن يشفى دون أي علامة على القيح أو النزيف أو التورم. قد يكون لديهم ضعف طفيف في الحركة.</li>
	<li>تنفيذ عمليات صورية فقط عن طريق انفصال العضلات الفقرية الخلفية من الفقرات L3-L5.</li>
</ol>

<ol><li>Makino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+disc+degeneration+progression+in+young+women+in+their+20%27s%3A+a+prospective+ten-year+follow+up%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Lumbar disc degeneration progression in young women in their 20's: a prospective ten-year follow up.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 22 (4), 635-640 (2017).</li>
<li>Lee, Y. C., Zotti, M. G. T., Osti, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operative+management+of+lumbar+degenerative+disc+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">Operative management of lumbar degenerative disc disease.</a> Asian Spine Journal. 10 (4), 801-819 (2016).</li>
<li>Wei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+experimental+intervertebral+disc+degeneration+induced+by+bleomycin+in+the+rhesus+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Musculoskeletal+Disorders%22%5BJournal%5D)">In vivo experimental intervertebral disc degeneration induced by bleomycin in the rhesus monkey.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 15, 340(2014).</li>
<li>Lim, K. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovine+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+model+utilizing+a+lateral+retroperitoneal+drill+bit+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Ovine lumbar intervertebral disc degeneration model utilizing a lateral retroperitoneal drill bit injury.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (123), e55753(2017).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+features+of+the+degenerating+intervertebral+disc+in+a+goat+disc-injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Histological features of the degenerating intervertebral disc in a goat disc-injury model.</a> Spine. 36 (19), 1519-1527 (2011).</li>
<li>Bergknut, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dog+as+an+animal+model+for+intervertebral+disc+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">The dog as an animal model for intervertebral disc degeneration.</a> Spine. 37 (5), 351-358 (2012).</li>
<li>Kong, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rabbit+Model+for+in+vivo+Study+of+Intervertebral+Disc+Degeneration+and+Regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Neurosurgical+Society%22%5BJournal%5D)">Rabbit Model for in vivo Study of Intervertebral Disc Degeneration and Regeneration.</a> Journal of Korean Neurosurgical Society. 44 (5), 327-333 (2008).</li>
<li>Gullbrand, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+large+animal+model+that+recapitulates+the+spectrum+of+human+intervertebral+disc+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">A large animal model that recapitulates the spectrum of human intervertebral disc degeneration.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 25 (1), 146-156 (2017).</li>
<li>Jin, L., Balian, G., Li, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+disc+degeneration-an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Histology+and+Histopathology%22%5BJournal%5D)">Animal models for disc degeneration-an update.</a> Histology and Histopathology. 33 (6), 543-554 (2018).</li>
<li>O'Connell, G. D., Vresilovic, E. J., Elliott, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+intervertebral+disc+anatomy+across+several+animal+species%5BTitle%5D)+AND+%2252nd+Annual+Meeting+of+the+Orthopaedic+Research+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative intervertebral disc anatomy across several animal species.</a> 52nd Annual Meeting of the Orthopaedic Research Society. , (2006).</li>
<li>Elliott, D. M., Sarver, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Young+investigator+award+winner%3A+validation+of+the+mouse+and+rat+disc+as+mechanical+models+of+the+human+lumbar+disc%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Young investigator award winner: validation of the mouse and rat disc as mechanical models of the human lumbar disc.</a> Spine. 29 (7), 713-722 (2004).</li>
<li>Ohnishi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+based+on+a+new+histological+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">In vivo mouse intervertebral disc degeneration model based on a new histological classification.</a> Plos One. 11 (8), 0160486(2016).</li>
<li>Vo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aging+of+intervertebral+discs+in+a+mouse+model+of+progeria%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Accelerated aging of intervertebral discs in a mouse model of progeria.</a> Journal of Orthopaedic Research. 28 (12), 1600-1607 (2010).</li>
<li>Oichi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+by+surgically+induced+instability%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">A mouse intervertebral disc degeneration model by surgically induced instability.</a> Spine. 43 (10), 557-564 (2018).</li>
<li>Ohnishi, T., Sudo, H., Tsujimoto, T., Iwasaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+spontaneous+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Age-related spontaneous lumbar intervertebral disc degeneration in a mouse model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 36 (1), 224-232 (2018).</li>
<li>Stern, W. E., Coulson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+collagenase+upon+the+intervertebral+disc+in+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Effects of collagenase upon the intervertebral disc in monkeys.</a> Journal of Neurosurgery. 44 (1), 32-44 (1976).</li>
<li>Silva, M. J., Holguin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LRP5-deficiency+in+OsxCreERT2+mice+models+intervertebral+disc+degeneration+by+aging+and+compression%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">LRP5-deficiency in OsxCreERT2 mice models intervertebral disc degeneration by aging and compression.</a> bioRxiv. , (2019).</li>
<li>Nemoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+changes+in+intervertebral+discs+after+smoking+and+cessation%3A+experimental+study+using+a+rat+passive+smoking+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Histological changes in intervertebral discs after smoking and cessation: experimental study using a rat passive smoking model.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 11 (2), 191-197 (2006).</li>
<li>Mulholland, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+myth+of+lumbar+instability%3A+the+importance+of+abnormal+loading+as+a+cause+of+low+back+pain%5BTitle%5D)+AND+%22European+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">The myth of lumbar instability: the importance of abnormal loading as a cause of low back pain.</a> European Spine Journal. 17 (5), 619-625 (2008).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosignaling+activation+of+TGF%CE%B2+maintains+intervertebral+disc+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Research%22%5BJournal%5D)">Mechanosignaling activation of TGFβ maintains intervertebral disc homeostasis.</a> Bone Research. 5, 17008(2017).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+activation+of+tgf%CE%B2+by+spinal+instability+causes+vertebral+endplate+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Excessive activation of tgfβ by spinal instability causes vertebral endplate sclerosis.</a> Scientific Reports. 6, 27093(2016).</li>
<li>Ni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+innervation+in+porous+endplates+by+Netrin-1+from+osteoclasts+mediates+PGE2-induced+spinal+hypersensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Sensory innervation in porous endplates by Netrin-1 from osteoclasts mediates PGE2-induced spinal hypersensitivity in mice.</a> Nature Communications. 10 (1), 5643(2019).</li>
<li>Liu, S., Cheng, Y., Tan, Y., Dong, J., Bian, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligustrazine+prevents+intervertebral+disc+degeneration+via+suppression+of+aberrant+tgf%CE%B2+activation+in+nucleus+pulposus+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Ligustrazine prevents intervertebral disc degeneration via suppression of aberrant tgfβ activation in nucleus pulposus cells.</a> BioMed Research International. 2019, 5601734(2019).</li>
<li>Boos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+age-related+changes+in+lumbar+intervertebral+discs%3A+2002+Volvo+Award+in+basic+science%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Classification of age-related changes in lumbar intervertebral discs: 2002 Volvo Award in basic science.</a> Spine. 27 (23), 2631-2644 (2002).</li>
<li>Miyamoto, S., Yonenobu, K., Ono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+cervical+spondylosis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Experimental cervical spondylosis in the mouse.</a> Spine. 16, 10 Suppl 495-500 (1991).</li>
</ol>

وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.

طورنا نموذج الماوس عدم استقرار العمود الفقري القطني استنادا إلى نموذج فأرة الفقار العنقي الذي تم فيه فصل العضلات الفقرية الخلفية من الفقرات وتم استئصال العمليات الشوكية جنبا إلى جنب مع الأربطة فوق الشوكية وبين الدبابيس25. قمنا بعملية مماثلة على العمود الفقري القطني ، والتي لديها عمليات شائكة أكثر بروزا. طور نموذج الماوس LSI معرف مماثل في العمود الفقري القطني.
مزايا نموذج LSI تشمل قابلية التشغيل القوية، أي شرط من معدات خاصة، استنساخ، وفترة قصيرة نسبيا من تطوير معرف.
...

انحطاط القرص الفقري (IDD) وينظر عادة في الشيخوخة وحتى الشباب الناجمة عن العديد من العوامل1. عادة ما يتم إجراء الجراحة للمرضى الذين يعانون من الهوية ، مما يسبب آلام أسفل الظهر وضعف الحركة ، في مرحلة لاحقة أو في الحالات الشديدة ولها مخاطر محتملة مثل عدم الإصابة أو العدوى2. يتطلب العلاج المثالي غير الجراحي فهما شاملا لآلية التعرف على هوية العميل. يعمل نموذج الحيوانات IDD كأداة حاسمة لدراسات آلية IDD وتقييم علاج ال IDD.
وقد تم اختيار الحيوانات الكبيرة لنماذج معرف مثل الرئيسيات والأغنام والماعز والأبقار والأرانب نظرا لتشابهها مع الهيكل التشريحي البشري إلى حد كبير والالتشغيل القوي من حيث حجم الأقراص الفقرية (IVDs)3و4و5و6و7و8. ومع ذلك ، فإن هذه النماذج الحيوانية تستغرق وقتا طويلا وتكلفةمكثفة 9. الفأر IVD هو تمثيل ضعيف لل IVD الإنسان على أساس القياسات الهندسية لنسبة العرض إلى الارتفاع، والنواة pulposus إلى نسبة منطقة القرص، وارتفاع تطبيع10. على الرغم من الفرق في الحجم، الماوس القطني IVD الجزء معارض الخصائص الميكانيكية مماثلة ل IVD الإنسان مثل ضغط وتصلب التواء11. وبالإضافة إلى ذلك، نموذج معرف الماوس لديه ميزة منخفضة التكلفة، وتطوير معرف قصيرة نسبيا، والمزيد من الخيارات للحيوانات المعدلة وراثيا والأجسام المضادة المستخدمة في مزيد من الدراسات الميكانيكية12،13،14،15.
تختلف نماذج ال IDD الناجمة عن التجارب من المحرضات والتطبيقات. على سبيل المثال ، الكولاجين الناجم عن انحطاط المصفوفة خارج الخلية (ECM) مناسب لأبحاث تجديد ECM16. النمط الظاهري المعدل وراثيا هي مناسبة لدراسة وظيفة الجينات في عملية معرف وفي العلاجات الجينية17. Anulus شق ليفي ونماذج الدخان تحاكي الصدمة وغير الالتهاب المستحث معرف12,18.
يؤدي عدم استقرار العمود الفقري (SI) إلى عمود فقري غير مستقر ليس في حالة توازن مثالية. يمكن أن يكون سببه حركة غير طبيعية لجزء الحركة القطنية بسبب ضعف الأنسجة الداعمة المحيطة مثل الأربطة والعضلات. كما ينظر إليها عادة بعد عملية الانصهار في العمود الفقري19. ويعتبر SI السبب الرئيسي لل معرف. لذلك ، نهدف إلى تطوير نموذج فئران SI (يركز على العمود الفقري القطني) الذي يحاكي عملية معرف الإنسان20،21.
في البروتوكول ، قدمنا إجراء إنشاء نموذج الماوس لعدم استقرار العمود الفقري القطني (LSI) عن طريق استئصال الثلث القطني (L3)إلى الخامس القطني (L5)العمليات الشوكية جنبا إلى جنب مع الأربطة فوق الشوكية وبين الدبابيس(الشكل 1A ، B). يطور النموذج الحيواني الهوية في وقت مبكر من أسبوع واحد بعد الجراحة كما هو مبين من خلال تضخم والمسامية في اللوحات النهائية (EPs). يبدأ حجم IVD في الانخفاض 2 أسابيع بعد الجراحة من خلال 16 أسبوعا جنبا إلى جنب مع زيادة درجة IVD، مما يشير إلى درجة معرف. ونحن نعتقد أن الإجراء المفصل والمتصور مفيد للباحثين لإنشاء نموذج الماوس LSI في مختبرهم وتطبيقها على أبحاث الهوية حسب الحاجة.

<table><tbody><tr><td>كلورتتراسيكلين هيدروكلوريد مرهم العين</td><td>شنغهاي العامة الصيدلانية المحدودة</td><td>H31021931</td><td>منع جفاف العين ، ومنع عدوى الجروح</td></tr><tr><td>C57BL / 6J ذكور الفئران</td> شركة <td>تيان جيانغ للمستحضرات الصيدلانية (جيانغسو ، CN)</td> <td>SCXK2018-0004</td><td>نموذج</td></tr><tr><td>حيواني منشفة طبية يمكن التخلص منها</td><td>Henan Huayu Medical Devices Co.، Ltd.</td><td>20160090</td><td>منصة للعملية الجراحية</td></tr><tr><td>معدات التخدير المستنشق</td><td>MIDMARK</td><td>Matrx 3000</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia Isoflurane</td><td>Shenzhen RWD Life Technology Co.، Ltd.</td><td>1903715</td><td>التخدير</td></tr><tr><td>ليدوكائين هيدروكلوريد</td><td>شاندونغ Hualu الصيدلانية المحدودة</td><td>H37022839</td><td>تخفيف الآلام</td></tr><tr><td>إبرة خياطة طبية</td><td>شنغهاي بودونغ جينهوان للمنتجات الطبية المحدودة</td><td>20S0401J</td><td>خياطة الجلد</td></tr><tr><td>ملقط العيون</td><td>شنغهاي الأجهزة الطبية (المجموعة) المحدودة مصنع الأدوات الجراحية</td><td>JD1050</td><td>كليب الجلد</td></tr><tr><td>مقص العيون (10 سم)</td> <td>شنغهاي الأجهزة الطبية (المجموعة) المحدودة مصنع الأدوات الجراحية</td><td>Y00030</td> شق <td>الجلد</td></tr><tr><td>الحرير مضفر</td><td>شنغهاي بودونغ جينهوان المنتجات الطبية المحدودة</td><td>11V0820</td><td>خياطة الجلد</td></tr><tr><td>ماكينة تشذيب الصغيرة</td><td>شنغهاي Feike الكهربائية المحدودة</td><td>FC5910</td><td>إزالة الشعر</td></tr><tr><td>شفرات جراحية معقمة (12 #)</td> <td>شنغهاي بودونغ جينهوان للمنتجات الطبية المحدودة</td><td>35T0707</td><td>شق العضلات</td></tr><tr><td>كريم إزالة الشعر</td><td>RECKITT BENCKISER (الهند) المحدودة</td><td>NA</td><td>إزالة الشعر</td></tr><tr><td>فينوس مقصات</td><td>مينغرين المعدات الطبية</td><td>الطول: 12.5 سم</td><td>قص العضلات والعملية الشائكة</td></tr></tbody></table>

نموذج الماوس من عدم استقرار العمود الفقري القطني

A Mouse Model of Lumbar Spine Instability

انحطاط القرص الفقري (IDD) هو تغيير مرضي شائع يؤدي إلى آلام أسفل الظهر. النماذج الحيوانية المناسبة مطلوبة لفهم العمليات المرضية وتقييم الأدوية الجديدة. هنا ، قدمنا نموذج الماوس المستحث جراحيا لعدم استقرار العمود الفقري القطني (LSI) الذي يطور IDD بدءا من عملية ما بعد أسبوع واحد. بالتفصيل، تم تشغيل الماوس تحت التخدير عن طريق شق الجلد أسفل الظهر، L3-L5 عمليات عرض الشوكية، مفرزة من العضلات paraspinous، استئصال العمليات والأربطة، وإغلاق الجلد. تم اختيار L4-L5 IVDs للمراقبة. يطور نموذج LSI معرف أسفل الظهر عن طريق المسامية والضمور في اللوحات النهائية في مرحلة مبكرة ، وانخفاض حجم القرص الفقري ، والانكماش في لب النواة في مرحلة متوسطة ، وفقدان العظام في الفقرات القطنية (L5)في مرحلة لاحقة. نموذج الماوس LSI لديه مزايا التشغيل القوي، أي شرط من المعدات الخاصة، والاستنساخ، وغير مكلفة، وفترة قصيرة نسبيا من تطوير معرف. ومع ذلك ، لا تزال عملية LSI صدمة تسبب التهابا خلال الأسبوع الأول بعد العملية. وبالتالي ، فإن هذا النموذج الحيواني مناسب لدراسة معرف أسفل الظهر.

يتم تطبيق نموذج الماوس LSI في دراسات آلية معرف الهوية، علاج الهوية، انحطاط اللوحة النهائية (EP) مثل التصلب، والاضمحلال الحسي في EP20،21،22،23. يطور الماوس LSI IDD و EP التغييرات التنكسية، كما هو محدد، عن طريق انخفاض حجم IVD والارتفاع، وزيادة حجم EP، وزيادة درجات IVD وEP.
تم فحص العمود الفقري الصدري السفلي والقطني المثبت والثابت بواسطة التصوير المقطعي الدقيق عالي الدق...

قمنا بتطوير نموذج الماوس انحطاط القرص الفقري القطني عن طريق استئصال L3-L5 العمليات الشوكية جنبا إلى جنب مع الأربطة فوق الشوكية وبين وانفصال العضلات paraspinous.

Intervertebral disc degeneration (IDD) is a common pathological change leading to low back pain. Appropriate animal models are desired for understanding ...

هذه هي عملية جراحية للحث على نموذج الماوس يقدم بديلا للدراسات ذات الصلة انحطاط القرص الفقري القطني. هذا الوضع LSI قوية لا يتطلب أي معدات خاصة. إنه قابل للاستنساخ ويمكن استخدامه للحث على انحطاط القرص الفقري في فترة زمنية قصيرة نسبيا.السيطرة على أعماق شق ونزيف وأداء لاستئصال كل عملية بين الدبابيس هما حسابان رئيسيان لزرع نجاحنا للتجربة. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لدواسة منعكس, وضع تخدير ثمانية أسابيع من العمر, ذكر, C57 أسود ستة الماوس على لوحة جراحية في موقف supine وتطبيق مرهم لعيني الحيوان. استخدم أداة تشذيب الحيوانات الصغيرة لحلاقة المنطقة الجراحية من المنطقة الصدرية السفلية إلى أعلى المنطقة العجزية وإزالة الفراء الحليق بمناديل الأنسجة.تطبيق كريم إزالة الشعر إلى منطقة حلق باستخدام الشاش لإزالة كريم بعد ما لا يزيد عن ثلاث دقائق وتدفق الجلد المكشوفة مع اثنين من ملليلتر من المالحة المعقمة 0.9. ثم ضع وسادة أسطوانية جراحية مصنوعة خصيصا تحت البطن لرفع العمود الفقري القطني. لكشف الفقرات L3 و L5 استخدام السبابة للمس العمليات الشوكية تحت الجلد من الفقرات القطنية وبالبات لمقارنة العمليات مع تلك الفقرات الصدرية والفقرات العجزية لتحديد المنطقة القطنية.شطف الجلد مع الكحول 75٪، واستخدام المجهر تشريح استخدام مشرط لجعل شق الجلد خط الوسط ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات على المنطقة القطنية من منطقة منتصف الصدر إلى الورك. تحديد العمود الفقري القطني من قبل شكل V من اللفافة الخلفية إدراجها، في الطرف حتى العمليات الشوكية واستخدام مشرط لجعل شقوق العضلات الخلفية الضحلة paraspinous على طول العمليات الشوكية من L3 إلى L5 أفقيا على جانبي العمود الفقري. ثم استخدم زوجين من ملقط العيون لفصل طبقات العضلات لفضح العمليات الشوكية L3 إلى L5 والأربطة فوق النخاعية.لفصل العمليات الشوكية الفردية استخدام sheers الوريدي لقطع الأربطة بين الدبابيس و resect العمليات الشوكية L3 إلى L5 والأربطة بين الدبابيس. ثم استخدم العقيمة رقم خمسة خياطة الحرير مضفر لإغلاق شق الجلد دون إعادة ربط العضلات شبه الفقرية وتطبيق مرهم هيدروكلوريد الكلورتيتراكلين إلى الموقع الجراحي. يسمح التحليل النسيجي ثلاثي الأبعاد بقياس القرص الفقري، في حين يسمح التحليل الهيكلي ثلاثي الأبعاد بقياس حجم الأنسجة الإجمالي.يزيد حجم القرص الفقري بشكل كبير بعد أسبوع واحد من الجراحة قبل أن ينخفض بعد أسبوعين إلى 16 أسبوعا من الإجراء بما يتفق مع انخفاض في ارتفاع القرص الفقري الذي تم قياسه خلال نفس الفترة الزمنية. كما لوحظت زيادة التجاويف داخل اللوحات الأمامية القحفية في فئران LSI كما تم قياسها كميا من خلال زيادة نسبة قيم الفصل الطري الأكبر أو المساوية ل 0.089 وزيادة كبيرة في أحجام اللوحة النهائية بعد الجراحة. لوحات نهاية النموذج يحمل النمط الظاهري مماثلة، مما يدل على أن LSI يؤدي إلى تضخم اللوحة النهائية وزيادة في عدد تجويف.تزيد أحجام فقرات L5 بشكل طفيف بعد الجراحة مع ملاحظة اختلافات إحصائية في 16 أسبوعا. كما يوجد انخفاض كبير في نسبة حجم العظام إلى الأنسجة الكلية بعد 16 أسبوعا من الجراحة، مما يشير إلى أن مؤشر LSI يسبب فقدان العظام الفقرية في مرحلة لاحقة. كما يتم تسريع انخفاض في الخلايا الخلايا من خلايا اللب النواة في الحيوانات LSI مع زيادة أعداد osteoclasts لوحظ في اللوحات النهائية LSI.يمكن تعديل هذا النموذج عن طريق إرفاق عدد مختلف من الفقرات، مثل القطنية الخامسة فقط، أو من القطنية الأولى إلى القطنية الخامسة.

a-mouse-model-of-lumbar-spine-instability

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

وأجري الفحص طولية من فقدان العظام في femurs وظنبوب من فئران بالغة بعد إصابة الحبل الشوكي باستخدام متسلسلة جرعة منخفضة من الأشعة السينية بالاشعة. تم الكشف عن الساق فقدان العظام طوال فترة الدراسة ، في حين لم يتم الكشف عن فقدان العظام في عظم الفخذ حتى 40 إصابة آخر أيام.

التقييم الطولي للهند ماوس الاطراف فقدان العظام بعد اصابة النخاع الشوكي به الرواية ، في الجسم الحي ، منهجية

في هذا الفيديو ، نصف الإجراء الجراحي للحث على عدم استقرار العمود الفقري القطني في نموذج الفأر عن طريق استئصال العملية الشوكية القطنية L3 إلى L5 جنبا إلى جنب مع الأربطة فوق الشوكية وبين الشوكات.

التحريض الجراحي لعدم استقرار العمود الفقري القطني في نموذج الفأر: إجراء جراحي لاستئصال العمليات الشوكية القطنية والأربطة المتصلة في نموذج الفئران

المصدر: Kumar, S., et. al.  نموذج الفأر لتقرحات الضغط بعد إصابة الحبل الشوكي. J. Vis. Exp. (2019) يوضح هذا الفيديو تحريضا مفصلا لإصابة الحبل الشوكي في الفئران. يتم تشريح الفأر المخدر لكشف فقرات T9-T10 ، وإزالة عملياتها الشائكية. ثم يتم تمرير الحبل الشوكي المكشوف لإحداث الإصابة. ثم يتم إغلاق المنطقة الجراحية ، ويسمح للفأر بالتعافي.

إنشاء نموذج فأر مصاب بإصابة في الحبل الشوكي

تسيطر الاصابات تهتك عنق في الفئران

توضح هذه المقالة طريقة لتوليد إصابة ضغط الحبل الشوكي القابلة للتكرار (SCI) في فأر حديثي الولادة. يوفر النموذج منصة مفيدة لدراسة آليات اللدونة التكيفية التي تكمن وراء الانتعاش الوظيفي التلقائي.

وحديثي الولادة ماوس الحبل الشوكي ضغط إصابة نموذج

نحن نقدم الأنسجة القائم على النزوح الكائن نموذج إصابة الحبل الشوكي التي يمكن أن تنتج إصابة الحبل الشوكي متناغمة متسقة في الفئران الكبار.

A النزوح القائم على النزوح النخاع الشوكي نموذج إصابة في الفئران

يصف البروتوكول نموذجا جديدا في الجسم الحي لعدوى زرع العمود الفقري حيث تصاب غرسة الأسلاك الكورية المصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ بالمكورات العنقودية الذهبية Xen36 ذات الإضاءة الحيوية. تتم مراقبة العبء البكتيري طوليا باستخدام التصوير الحيوي وتأكيده بتعداد وحدات تشكيل المستعمرات بعد القتل الرحيم.

في الجسم الحي نموذج الماوس من عدوى زرع العمود الفقري

المفصل المعقد الكاحل تحت الكاحل (ASCJ) هو جوهر القدم ويلعب دورا رئيسيا في التحكم في التوازن في الأنشطة اليومية. غالبا ما تؤدي الإصابات الرياضية إلى عدم الاستقرار في هذا المفصل. هنا ، نصف نموذج فأر لعدم الاستقرار الناجم عن قطع الرباط في ASCJ.

نموذج فأر لعدم استقرار المفصل المعقد في الكاحل تحت الكاحل

تعمل التقنيات طفيفة التوغل وجهاز مختبري بسيط على تحسين استنساخ نموذج إصابة الحبل الشوكي عن طريق تقليل الأضرار الجراحية لحيوانات التجارب والسماح بصيانة التشكل التشريحي. هذه الطريقة جديرة بالاهتمام لأن النتائج الموثوقة والإجراءات القابلة للتكرار تسهل التحقيقات في آليات تعويض المرض.

إنشاء نموذج إصابة الحبل الشوكي لكدمة الفأر بناء على تقنية طفيفة التوغل

في هذا البروتوكول ، تم وصف طريقتين لجعل اختبار الضغط أحادي المحور لفقرات الفأر القطنية أكثر قابلية للتحقيق. أولا ، يتم وصف تحويل آلة الثني ثلاثية النقاط إلى آلة اختبار الضغط. ثانيا ، يتم تكييف طريقة التضمين لإعداد سطح التحميل الذي يستخدم الأسمنت العظمي لفقرات الفأر القطنية.

اختبار ضغط الفأر القطني أحادي المحور مع تضمين سطح التحميل

يظهر هنا جهاز كدمة آلي جديد لإصابة الحبل الشوكي للفئران ، والذي يمكنه إنتاج نماذج كدمة إصابة الحبل الشوكي بدقة بدرجات متفاوتة.

نموذج الصدمة الآلي لإصابة الحبل الشوكي الطارئ في الفئران

تعلم نموذج الفأر لانحلال الغضروف القطني عبر استئصال جراحي للأنسجة الظهرية. يُستخدم سلالة C57BL/6 لدراسة تغيرات الغضروف والعمود الفقري بتقنيات تحليل ثلاثية الأبعاد.

نموذج الماوس من عدم استقرار العمود الفقري القطني

استكشف المزيد من الفيديوهات