Name: نشاط الخلايا العصبية الجانبية الخلفية Afferent خلال السباحة في حمار وحشي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 34 s
Description: اكتشف تسجيل النشاط العصبي الحسي في الوقت الفعلي باستخدام تقنية التصحيح الكهربائي في يرقات حمار وحشي. تُسهم هذه الطريقة في فهم آليات السمع والتنويرات العصبية ذات الصلة باضطرابات السمع البشري.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ونحن نعرب عن امتناننا للدعم المقدم من المعهد الوطني للصحة (DC010809)، والمؤسسة الوطنية للعلوم (IOS1257150، 1856237)، ومختبر ويتني للعلوم البيولوجية البحرية إلى J.C.L. ونود أن نشكر الأعضاء السابقين والحاليين في مختبر لياو على حفز المناقشات.

<ol><li>Trapani, J. G., Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+spontaneous+activity+in+afferent+neurons+of+the+zebrafish+lateral-line+organ%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mechanism of spontaneous activity in afferent neurons of the zebrafish lateral-line organ.</a> The Journal of Neuroscience. 31 (5), 1614-1623 (2011).</li>
<li>Haehnel-Taguchi, M., Akanyeti, O., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Afferent+and+motorneuron+activity+in+response+to+single+neuromast+stimulation+in+the+posterior+lateral+line+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Afferent and motorneuron activity in response to single neuromast stimulation in the posterior lateral line of larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 112 (6), 1329-1339 (2014).</li>
<li>Levi, R., Akanyeti, O., Ballo, A., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency+response+properties+of+primary+afferent+neurons+in+the+posterior+lateral+line+system+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Frequency response properties of primary afferent neurons in the posterior lateral line system of larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 113 (2), 657-668 (2015).</li>
<li>Harris, G. G., Fishkopf, L. S., Flock, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptor+potentials+from+hair+cells+of+the+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Receptor potentials from hair cells of the lateral line.</a> Science. 167 (3914), 76-79 (1970).</li>
<li>Dow, E., Jacobo, A., Hossain, S., Siletti, K., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connectomics+of+the+zebrafish%27s+lateral+line+neuromast+reveals+wiring+and+miswiring+in+a+simple+microcircuit%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Connectomics of the zebrafish's lateral line neuromast reveals wiring and miswiring in a simple microcircuit.</a> eLife. 7, 33988(2018).</li>
<li>Obholzer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vesicular+glutamate+transporter+3+is+required+for+synaptic+transmission+in+zebrafish+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Vesicular glutamate transporter 3 is required for synaptic transmission in zebrafish hair cells.</a> The Journal of Neuroscience. 28 (9), 2110-2118 (2008).</li>
<li>Keen, E. C., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+characteristics+of+the+hair+cell%27s+afferent+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Transfer characteristics of the hair cell's afferent synapse.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (14), 5537-5542 (2006).</li>
<li>Li, G., Keen, E., Andor-Ardó, D., Hudspeth, A. J., von Gersdorff, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+unitary+event+underlying+multiquantal+EPSCs+at+a+hair+cell%27s+ribbon+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The unitary event underlying multiquantal EPSCs at a hair cell's ribbon synapse.</a> The Journal of Neuroscience. 29 (23), 7558-7568 (2009).</li>
<li>Manley, G. A., Robertson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+spontaneous+activity+of+auditory+neurons+in+the+spiral+ganglion+of+the+guinea-pig+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Analysis of spontaneous activity of auditory neurons in the spiral ganglion of the guinea-pig cochlea.</a> The Journal of Physiology. 258 (2), 323-336 (1976).</li>
<li>Kiang, N. Y. S., Watanabe, T., Thomas, E., Clark, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKiang%2C+NYS+%22Discharge+patterns+of+single+fibers+in+the+cat%27s+auditory+nerve%22">Discharge patterns of single fibers in the cat's auditory nerve</a>. , MIT Press. Cambridge MA. (1965).</li>
<li>Corey, D. P., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionic+basis+of+the+receptor+potential+in+a+vertebrate+hair+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Ionic basis of the receptor potential in a vertebrate hair cell.</a> Nature. 281 (5733), 675-677 (1979).</li>
<li>Trapani, J. G., Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+recordings+from+zebrafish+lateral-line+hair+cells+and+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Physiological recordings from zebrafish lateral-line hair cells and afferent neurons.</a> Methods in Cell Biology. 100, 219-231 (2010).</li>
<li>Reinig, S., Driever, W., Arrenberg, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+descending+diencephalic+dopamine+system+is+tuned+to+sensory+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">The descending diencephalic dopamine system is tuned to sensory stimuli.</a> Current Biology. 27 (3), 318-333 (2017).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptically+silent+sensory+hair+cells+in+zebrafish+are+recruited+after+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Synaptically silent sensory hair cells in zebrafish are recruited after damage.</a> Nature Communications. 9 (1), 1388(2018).</li>
<li>Pichler, P., Lagnado, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+behavior+selectively+inhibits+hair+cells+activated+forward+motion+in+the+lateral+line+of+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Motor behavior selectively inhibits hair cells activated forward motion in the lateral line of zebrafish.</a> Current Biology. 30 (1), 150-157 (2020).</li>
<li>Olszewski, J., Haehnel, M., Taguchi, M., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+larvae+exhibit+rheotaxis+and+can+escape+a+continuous+suction+source+using+their+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Zebrafish larvae exhibit rheotaxis and can escape a continuous suction source using their lateral line.</a> PloS One. 7 (5), 36661(2012).</li>
<li>Suli, A., Watson, G. M., Rubel, E. W., Raible, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rheotaxis+in+larval+zebrafish+is+mediated+by+lateral+line+mechanosensory+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Rheotaxis in larval zebrafish is mediated by lateral line mechanosensory hair cells.</a> PLoS One. 7 (2), 29727(2012).</li>
<li>Oteiza, P., Odstcil, I., Lauder, G., Portugues, R., Engert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mechanism+for+mechanosensory-based+rheotaxis+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A novel mechanism for mechanosensory-based rheotaxis in larval zebrafish.</a> Nature. 547 (7664), 445-448 (2017).</li>
<li>McHenry, M. J., Feitl, K. E., Strother, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Larval+zebrafish+rapidly+sense+the+water+flow+of+a+predator%27s+strike%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Larval zebrafish rapidly sense the water flow of a predator's strike.</a> Biology Letters. 5 (4), 477-479 (2009).</li>
<li>Stewart, W. J., Cardenas, G. S., McHenry, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+larvae+evade+predators+by+sensing+water+flow%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Zebrafish larvae evade predators by sensing water flow.</a> The Journal of Experimental Biology. 216, Pt 3 388-398 (2013).</li>
<li>Mekdara, P. J., Schwalbe, M. A. B., Coughlin, L. L., Tytell, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+lateral+line+ablation+and+regeneration+in+schooling+giant+danios%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The effects of lateral line ablation and regeneration in schooling giant danios.</a> The Journal of Experimental Biology. 221, Pt 8 175166(2018).</li>
<li>Palmer, L. M., Giuffrida, B. A., Mensinger, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+recordings+from+the+lateral+line+in+free-swimming+toadfish%2C+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22The+Biological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Neural recordings from the lateral line in free-swimming toadfish, Opsanus tau.</a> The Biological Bulletin. 205 (2), 216-218 (2003).</li>
<li>Ayali, A., Gelman, S., Tytell, E. D., Cohen, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+line+activity+during+undulatory+body+motions+suggests+a+feedback+link+in+closed-loop+control+of+sea+lamprey+swimming%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Zoology%22%5BJournal%5D)">Lateral line activity during undulatory body motions suggests a feedback link in closed-loop control of sea lamprey swimming.</a> Canadian Journal of Zoology. 87 (8), 671-683 (2009).</li>
<li>Mensinger, A. F., Van Wert, J. C., Rogers, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+line+sensitivity+in+free-swimming+toad+fish+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Lateral line sensitivity in free-swimming toad fish Opsanus tau.</a> The Journal of Experimental Biology. 222, Pt 2 190587(2019).</li>
<li>Montgomery, J., Bodznick, D., Halstead, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hindbrain+signal+processing+in+the+lateral+line+system+of+the+dwarf+scorpionfish+Scopeana+papillosus%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Hindbrain signal processing in the lateral line system of the dwarf scorpionfish Scopeana papillosus.</a> The Journal of Experimental Biology. 199, Pt 4 893-899 (1996).</li>
<li>Montgomery, J. C., Bodznick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+adaptive+filter+that+cancels+self-induced+noise+in+the+electrosensory+and+lateral+line+mechanosensory+systems+of+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">An adaptive filter that cancels self-induced noise in the electrosensory and lateral line mechanosensory systems of fish.</a> Neuroscience Letters. 174 (2), 145-148 (1994).</li>
<li>Palmer, L. M., Deffenbaugh, M., Mensinger, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+the+anterior+lateral+line+to+natural+stimuli+in+the+oyster+toadfish%2C+Opsanus+tau+%28Linnaeus%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of the anterior lateral line to natural stimuli in the oyster toadfish, Opsanus tau (Linnaeus).</a> The Journal of Experimental Biology. 208, Pt 18 3441-3450 (2005).</li>
<li>Russell, I. J., Roberts, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+spontaneous+lateral-line+activity+of+efferent+nerve+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Inhibition of spontaneous lateral-line activity of efferent nerve stimulation.</a> The Journal of Experimental Biology. 57, 77-82 (1972).</li>
<li>Lunsford, E. T., Skandalis, D. A., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efferent+modulation+of+spontaneous+lateral+line+activity+during+and+after+zebrafish+motor+commands%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Efferent modulation of spontaneous lateral line activity during and after zebrafish motor commands.</a> Journal of Neurophysiology. 122 (6), 2438-2448 (2019).</li>
<li>Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pharmacology+of+efferent+synapses+in+the+lateral-line+system+of+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The pharmacology of efferent synapses in the lateral-line system of Xenopus laevis.</a> The Journal of Experimental Biology. 54 (3), 643-659 (1971).</li>
<li>Roberts, B. L., Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+activity+of+lateral-line+efferent+neurons+in+stationary+and+swimming+dogfish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The activity of lateral-line efferent neurons in stationary and swimming dogfish.</a> The Journal of Experimental Biology. 57 (2), 435-448 (1972).</li>
<li>Flock, A., Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+post-synaptic+action+of+efferent+fibres+in+the+lateral+line+organ+of+the+burbot+Lota+lota%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">The post-synaptic action of efferent fibres in the lateral line organ of the burbot Lota lota.</a> The Journal of Physiology. 235 (3), 591-605 (1973).</li>
<li>Montgomery, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noise+cancellation+in+the+electrosensory+system+of+the+thornback+ray%3B+common+mode+rejection+of+input+produced+by+the+animal%27s+own+ventilatory+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Noise cancellation in the electrosensory system of the thornback ray; common mode rejection of input produced by the animal's own ventilatory movement.</a> Journal of Comparative Physiology. 155, 103-111 (1984).</li>
<li>Tricas, T. C., Highstein, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+the+octavolateralis+efferent+system+upon+the+lateral+line+of+free-swimming+toadfish%2C+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Action of the octavolateralis efferent system upon the lateral line of free-swimming toadfish, Opsanus tau.</a> Journal of Comparative Physiology. 169 (1), 25-37 (1991).</li>
<li>Weeg, M. S., Land, B. R., Bass, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vocal+pathways+modulate+efferent+neurons+to+the+inner+ear+and+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Vocal pathways modulate efferent neurons to the inner ear and lateral line.</a> The Journal of Neuroscience. 25 (25), 5967-5974 (2005).</li>
<li>Elgoyhen, A. B., Johnson, D. S., Boulter, J., Vetter, D. E., Heinemann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B19%3A+an+acetylcholine+receptor+with+novel+pharmacological+properties+expressed+in+rat+cochlear+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">α9: an acetylcholine receptor with novel pharmacological properties expressed in rat cochlear hair cells.</a> Cell. 79 (4), 705-715 (1994).</li>
<li>Masino, M. A., Fetcho, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fictive+swimming+motor+patterns+in+wild+type+and+mutant+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Fictive swimming motor patterns in wild type and mutant larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 93 (6), 3177-3188 (2005).</li>
<li>Hentschke, H. abfload. 1.4.0.0. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHentschke%2C+H+%22MATLAB+Central+File+Exchange%22">MATLAB Central File Exchange</a>. , (2020).</li>
<li>Harris, G. G., Milne, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Input-output+characteristics+of+the+lateral-line+sense+organs+of+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Input-output characteristics of the lateral-line sense organs of Xenopus laevis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 40 (1), 32-42 (1966).</li>
<li>Liao, J. C., Haehnel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+afferent+neurons+in+larval+zebrafish+provides+a+functional+framework+for+lateral+line+somatotopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Physiology of afferent neurons in larval zebrafish provides a functional framework for lateral line somatotopy.</a> Journal of Neurophysiology. 107 (10), 2615-2623 (2012).</li>
<li>Song, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mathematical+modeling+and+analyses+of+interspike-intervals+of+spontaneous+activity+in+afferent+neurons+of+the+zebrafish+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Science+Reports%22%5BJournal%5D)">Mathematical modeling and analyses of interspike-intervals of spontaneous activity in afferent neurons of the zebrafish lateral line.</a> Nature Science Reports. 8, 14851(2018).</li>
<li>Liao, J. C., Fetcho, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shared+versus+specialized+glycinergic+spinal+interneurons+in+axial+motor+circuits+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Shared versus specialized glycinergic spinal interneurons in axial motor circuits of larval zebrafish.</a> The Journal of Neuroscience. 28 (48), 12982-12992 (2008).</li>
<li>von Holst, E., Mittelstaedt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+principle+of+reafference%3A+interactions+between+the+central+nervous+system+and+the+peripheral+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Die+Naturwissenschften%22%5BJournal%5D)">The principle of reafference: interactions between the central nervous system and the peripheral organs.</a> Die Naturwissenschften. 37, 463(1950).</li>
<li>Crapse, T. B., Sommer, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corollary+discharge+across+the+animal+kingdom%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Corollary discharge across the animal kingdom.</a> Nature Reviews. Neuroscience. 9 (8), 587-600 (2008).</li>
<li>Brichta, A. M., Goldberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+to+efferent+activation+and+excitatory+response-intensity+relations+of+turtle+posterior-crista+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Responses to efferent activation and excitatory response-intensity relations of turtle posterior-crista afferents.</a> Journal of Neurophysiology. 83 (3), 1224-1242 (2000).</li>
</ol>

ولا يعلن صاحبا البلاغ عن وجود مصالح مالية متنافسة.

يوفر البروتوكول التجريبي الموصوف إمكانية مراقبة التغيرات الذاتية في المدخلات الحسية عبر السلوكيات الحركية في فقاريات سليمة ومتصرفة. على وجه التحديد ، فإنه يفصل نهج في الجسم الحي لأداء التسجيلات خارج الخلية في وقت واحد من الخلايا العصبية الجانبية الخط النافر والجذور الحركية البطنية في حمار وحشي اليرقات. وقد تم وصف النشاط التلقائي afferent سابقا في حمار وحشي دون النظر في النشاط الحركي المتزامنالمحتملة 1،2،39،<sup class=...

تنقل الخلايا العصبية الأفرنتة في الأنظمة الحساسة الميكانيكية المعلومات من خلايا الشعر إلى الدماغ أثناء السمع والتوازن. يمكن أن يكشف علم الفيزيولوجيا الكهربية عن حساسية الخلايا العصبية من خلال التسجيلات المباشرة. في حين أن ترقيع الخلايا بأكملها من خلايا الشعر يمكن أن يكون تحديا، وتسجيل من الخلايا العصبية afferent المصب أسهل ويسمح تقييم إمكانات العمل استجابة لتحفيز تسيطر عليها1،2،3. تحفيز خلايا الشعر يؤدي إلى انحرافها، الذي يعدل هياكل الميكانيكا، وبالتالي يؤدي إلىزيادةفي إمكانات العمل (المسامير) في الخلايا العصبية afferent 4،5،6. في غياب المحفزات الخارجية ، ترتفع الخلايا العصبية الأفرنت أيضا تلقائيا بسبب تسرب الغلوتامات من خلايا الشعر إلى محطات ما بعد الاشتباك العصبي7،8، وقد ثبت أنها تساهم في الحفاظ علىالحساسية 9،10. التصحيح تسجيل المشبك من النشاط afferent تمكن من مراقبة حساسية خلايا الشعر وديناميات إشارة التي لا يمكن استخدام تقنيات ذات دقة زمنية أقل، كما هو الحال في microphonics11،12 أو التصوير الوظيفي الكالسيوم13،14،15. سيسمح البروتوكول التالي بتسجيل النشاط البؤري المتزامن مع الأوامر الحركية للكشف عن التغيرات الفورية في حساسية خلايا الشعر.
حمار وحشي (دانيو rerio) استخدام خلايا الشعر الواردة في الأورام العصبية التي تشكل نظام الخط الجانبي للكشف عن حركة المياه بالنسبة لجسمهم, الذي يترجم إلى إشارات عصبية ضرورية للملاحة16,17,18, تجنب المفترس, فريسة التقاط19,20, والتعليم21. ويمكن أيضا أن يكون تدفق المياه الذاتي ولدت من قبل حركات السباحة22،23،24، التنفس22،25،26، وتغذية27. وتشمل هذه السلوكيات الحركات المتكررة التي يمكن أن تعب خلايا الشعر وضعف الاستشعار. لذلك، من الضروري أن يميز نظام الخط الجانبي بين محفزات التدفق الخارجية (الخارجية) والمحفزات التدفقية ذاتية المولدة (إعادة الالتقيب). التفريغ الطبيعي يخفف إشارات التدفق الذاتي المولدة أثناء الحركة في حمار وحشي. يتم ترحيل هذه الإشارة الحركية التنبؤية المثبطة عبر الخلايا العصبية التنازلية إلى المستقبلات الحسية لتعديل الإدخال أو مقاطعة معالجة ردود الفعل reafferent28،29. عمل المنوية المساهمة في فهمنا المبكر لهذا النظام feedforward تعتمد على الاستعدادات في المختبر حيث لم يتم الحفاظ على الاتصال والنشاط الداخلي للدائرة العصبية28،30،31،32،33،34،35. يصف هذا البروتوكول نهجا للحفاظ على دائرة عصبية سليمة حيث يتم الحفاظ على ديناميكيات التغذية المرتدة الذاتية مما يتيح فهما أفضل للإفرازات الطبيعية في الجسم الحي.
يصف البروتوكول المبين هنا كيفية مراقبة الخلايا العصبية الجانبية الخلفية ونشاط الخلايا العصبية الحركية في وقت واحد في سمك الحمار الوحشي اليرقات. إن توصيف ديناميكيات الإشارات البؤرية قبل وأثناء وبعد الأوامر الحركية يوفر رؤى حول التغذية المرتدة الذاتية في الوقت الفعلي من الجهاز العصبي المركزي الذي يعدل حساسية خلايا الشعر أثناء الحركة. يحدد هذا البروتوكول المواد التي يجب إعدادها قبل التجارب ثم يصف كيفية شل يرقات حمار وحشي وإعدادها. وسوف يصف البروتوكول كيفية إنشاء تسجيل التصحيح فضفاضة مستقرة من الخلايا العصبية الأفرنت والجذر البطني خارج الخلية (VR) تسجيلات الخلايا العصبية الحركية. وتقدم البيانات التمثيلية التي يمكن الحصول عليها باستخدام هذا البروتوكول من فرد نموذجي، وقد أجريت تحليلات على نسخ متماثلة متعددة للبروتوكول التجريبي. يتم إجراء المعالجة المسبقة للبيانات باستخدام البرامج النصية المكتوبة المخصصة في MATLAB. وعموما، فإن هذا النموذج التجريبي في الجسم الحي يستعد لتوفير فهم أفضل لردود الفعل الحسية أثناء الحركة في نظام خلايا الشعر الفقارية النموذجية.

<table><tbody><tr><td>100 مل دورق</td><td>PYREX</td><td>1000</td><td>وعاء للحفر</td></tr><tr><td>10x الغمر في الماء الهدف</td><td>أوليمبوس</td><td>UMPLFLN10xW</td><td>تكبير منخفض لتحديد المواقع والقطب الكهربائي</td></tr><tr><td>40x هدف الغمر في الماء</td><td>أوليمبوس</td><td>LUMPLFLN40XW</td><td>تكبير أعلى لطرف القطب الكهربائي وإنشاء abfload.m</td></tr><tr><td></td><td></td><td>ملف الترميز التكميلي</td> نص <td>MATLAB مكتوب مخصص لتحويل تسجيلات الفيزيولوجيا الكهربية الخام إلى ملفات .mat</td></tr><tr><td>AffVR_preprocess.m</td><td></td><td>ملف الترميز التكميلي</td> المكتوب <td>مخصص برنامج نصي MATLAB للمعالجة المسبقة لبيانات التسجيل</td></tr><tr><td>BNC الكابلات المحورية</td><td>ThorLabs</td><td>2249-C-12</td><td>توصيل مكبر الصوت وقنوات المحول الرقمي ؛ تتطلب 4</td></tr><tr><td>شعيرات دموية زجاجية من البورسليكات مع خيوط</td><td>Warner الأدوات</td><td>G150F-3</td><td>القطر الداخلي: 0.86 ، القطر الخارجي: 1.50 ؛ الزجاج الشعري المستخدم لتشكيل أقطاب تسجيل</td></tr><tr><td>burst_detect</td><td></td><td>ملف ترميز تكميلي</td><td>وظيفة MATLAB المكتوبة حسب الطلب اللازمة لتشغيل جهاز كمبيوتر AffVR_preprocess.m</td></tr><tr><td></td><td>N / A</td><td></td><td>يجب أن يعمل أي جهاز كمبيوتر</td></tr><tr><td>DC Power Supply</td><td>Tenma</td><td>72-420</td><td>المستخدم في دبابيس تشريح النقش كهربائيا</td></tr><tr><td>الفيزيولوجيا الكهربية الرقمية</td><td>أدوات Axon ، الأجهزة الجزيئية</td><td>Axon DigiData 1440A</td><td>تمكن من الحصول على خيوط بيانات مشبك</td></tr><tr><td></td><td>التصحيح Sutter Instrument Company</td><td>FB255B</td><td>خيوط صندوقية مقاس 2.5 مم تستخدم في ملقط مجتذب الماصات</td></tr><tr><td>الدقيقة</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>Dumont # 5 (0.05 × 0.02 مم) رقم الصنف 11295-10</td><td>يستخدم لمعالجة اليرقات وإدخال المسامير DIC</td></tr><tr><td>للمرحلة الثابتة المجهر</td><td>أوليمبوس</td><td>BX51WI</td><td>المجهر يستخدم لتصور وإنشاء تسجيلات مشبك التصحيح طرف</td></tr><tr><td>ماصة مرن مدبب</td><td>فيشر Scientific</td><td>02-707-169</td><td>نصائح مرنة تمكن من الإدراج في قطب التسجيل للاستغناء عن محلول خارج الخلية عند طرف</td></tr><tr><td>FluoroDish</td><td>World Precision Instruments Inc.</td><td>FD3510-100</td><td>غطاء زجاجي ذو قاع طبق</td></tr><tr><td>تسجيل طبق KimWipe</td><td>KimTech</td><td>34155</td><td>، ويستخدم لفتل السوائل الزائدة من اليرقات</td></tr><tr><td>Kwik-Gard</td><td>World Precision Instruments Inc.</td><td>710172</td> خلط <td>ذاتي الخلط المطاط الصناعي</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>MathWorks</td><td>R2020b</td><td>برنامج سطر الأوامر لمعالجة البيانات</td></tr><tr><td>المسبق مضخم القطب الكهربائي الدقيق</td><td>أدوات Axon Instruments ، الأجهزة الجزيئية</td><td>MultiClamp 700B</td><td>مضخم مشبك التصحيح للتسجيلات ثنائية القناة</td></tr><tr><td>microforge</td><td>Narishige</td><td>MF-830 microforge</td><td>لتلميع</td></tr><tr><td>جهاز التحكم الدقيق لتسجيل القطب الكهربائي وحدة التحكم</td><td>Siskiyou</td><td>MC1000-eR / T</td><td>4 محاور منسق الاتصال الهاتفي للتحكم</td></tr> في <tr><td>مجتذب الماصات الدقيقة</td><td>Sutter Instrument Company</td><td>Flaming / Brown P-97</td><td>لسحب الزجاج الشعري إلى</td></tr><tr><td>وحدة التحكم في المجهر</td> أقطاب تسجيل <td>Siskiyou</td><td>MC1000e</td><td>يضع المجهر حول المرحلة الثابتة وإعداد</td></tr><tr><td>الملاعب</td> <td>الدقيقة الآليةيضع Siskiyou</td><td>MX7600</td><td>منصة الرأس وقطب التسجيل المرفق لتسجيل التصحيح المشبك</td></tr><tr><td>MultiClamp</td><td>Commander Molecular Devices</td><td>2.2.2</td><td>يمكن تنزيله من Axon MultiClamp 700B Commander تنزيل صفحة</td></tr><tr><td>طاولة الهواء البصرية</td><td>طاولة الهواء الضوئية Newport Corporation</td><td>VH3036W-OPT</td><td>لتعويم المجهر وتقليل الاهتزازات أثناء التسجيلات</td></tr><tr><td>pCLAMP</td><td>الأجهزة الجزيئية</td><td>10.7.0</td><td>قابلة للتنزيل من Axon pCLAMP 10 الحصول على بيانات الفيزيولوجيا الكهربية & برنامج التحليل تنزيل صفحة</td></tr><tr><td>علامة الحبر الدائم</td><td>طلب Sharpie</td><td>من amazon.com</td><td>لتمييز الجانب الأمامي لقطب VR لضمان الاتجاه الصحيح عند إدخاله في حامل الماصة</td></tr> طبق <tr><td>البيتري</td><td>Falcon</td><td>35-3001</td><td>المستخدم لغمر اليرقات في</td></tr><tr><td>حامل الماصة</td> الشللي <td>الأجهزة الجزيئية</td><td>1-HL-U</td><td>عقد قطب تسجيل القطب الكهربائي وتوصيله بمنصة الرأس</td></tr><tr><td>محول هوائي</td><td>Fluke Biomedical instruments</td><td>DPM1B</td><td>للتحكم في تسجيل القطب الكهربائي الضغط الداخلي</td></tr><tr><td>هيدروكسيد البوتاسيوم</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>221473-25G</td><td>حفر لنقش دبابيس التشريح أنابيب</td></tr><tr><td>السيليكون</td><td>Tygon</td><td>14-169-1A</td><td>لتوصيل محول الطاقة الهوائي بحامل الماصة</td></tr><tr><td>spike_detect</td><td></td><td>ملف</td> <td>الترميز التكميليوظيفة MATLAB المكتوبة حسب الطلب ضرورية لتشغيل مجهر مجسمة AffVR_preprocess.m</td></tr><tr><td></td><td>Carl Zeiss</td><td>Stemi 2000-C</td><td>تستخدم لتصور أطراف الدبوس وأثناء تحضير</td></tr><tr><td>شفرة الحلاقة ذات الحافة المستقيمة</td><td>لليرقات ، طلب Canopus</td><td>من amazon.com</td><td>يقطع سلك التنغستن أثناء عمل دبابيس تشريح</td></tr><tr><td>swimbout_detect</td><td></td><td>ملف</td> <td>ترميز تكميليوظيفة MATLAB المكتوبة حسب الطلب ضرورية لتشغيل حقنة AffVR_preprocess.m</td></tr><tr><td></td><td>Becton Dickinson Compoany</td><td>مملوءة 309602 بمحلول خارج الخلية للحقن في</td><td></td></tr> تسجيل <tr><td>ماصة نقل</td><td>الأقطاب الكهربائية Sigma-Aldrich</td><td>Z135003-500EA</td> للاستخدام <td>الفردي ، ماصة غير معقمة لنقل يرقات</td></tr><tr><td>tricaine methanesulfonate</td><td>Syndel</td><td>12854</td><td>مخدر صيدلاني يستخدم للقتل الرحيم لليرقات بجرعة عالية.</td></tr><tr><td>سلك التنغستن</td><td>شركة World Precision Instruments Inc.</td><td>715500</td><td>0.002 بوصة ، 50.8 مو ؛ م القطر تستخدم لصنع دبابيس تشريح</td></tr><tr><td>وحدة الترشيح الفراغي</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SCGVU11RE</td> وحدات <td>الترشيح الفراغية ذات الاستخدام الفردي والمعقمة وتستخدم لتعقيم المحلول خارج الخلية المستخدم في الفيزيولوجيا الكهربية الكهربائي جرس</td></tr><tr><td>الجهد المشبك الحالي المشبك الرأس</td><td>الأجهزة الجزيئية</td><td>CV-7B</td><td>المزودة بمكبر للصوت MultiClamp 700B المستخدم كمنصات الرأس اليمنى</td></tr> <tr><td>واليسرى &alpha ؛ - bungarotoxin</td><td>ThermoFisher</td><td>B1601</td><td>لتثبيت اليرقات قبل التسجيل</td></tr></tbody></table>

نشاط الخلايا العصبية الجانبية الخلفية afferent خلال السباحة في حمار وحشي

Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish

تجمع الأنظمة الحسية الإشارات الضرورية لتوجيه السلوك ، ولكن يجب على الحيوانات فك شفرة المعلومات ذات الصلة بيولوجيا. يولد Locomotion إشارات إعادة أحشاء أن الحيوانات يجب أن تنفصل عن الإشارات الحسية ذات الصلة للبيئة المحيطة. على سبيل المثال، عندما تسبح سمكة، يتم الكشف عن التدفق المتولد عن تموج الجسم من قبل الأورام العصبية الميكانورية، التي تتألف من خلايا الشعر، التي تشكل نظام الخط الجانبي. خلايا الشعر ثم نقل معلومات حركة السوائل من جهاز الاستشعار إلى الدماغ عن طريق الخلايا العصبية الحسية afferent. في الوقت نفسه ، يتم ترحيل التفريغ الطبيعي للأمر الحركي إلى خلايا الشعر لمنع الحمل الزائد الحسي. ولذلك، فإن حساب التأثير المثبط للإشارات الحركية التنبؤية أثناء الحركة أمر بالغ الأهمية عند تقييم حساسية نظام الخط الجانبي. لقد طورنا نهجا كهربيا في الجسم الحي لمراقبة الخلايا العصبية الجانبية الخلفية ونشاط الجذر الحركي البطني في يرقات حمار وحشي (4-7 أيام بعد الإخصاب) في وقت واحد يمكن أن تستمر لعدة ساعات. يتم تحقيق التسجيلات خارج الخلية من الخلايا العصبية afferent باستخدام تقنية المشبك التصحيح فضفاضة، والتي يمكن الكشف عن النشاط من الخلايا العصبية واحد أو متعددة. يتم إجراء تسجيلات الجذر البطني من خلال الجلد مع أقطاب زجاجية للكشف عن نشاط الخلايا العصبية الحركية. يوفر بروتوكولنا التجريبي إمكانية مراقبة التغيرات الذاتية أو المثارة في المدخلات الحسية عبر السلوكيات الحركية في فقاريات سليمة ومتصرفة.

بعد شل حركة يرقات حمار وحشي بشكل صحيح وتحقيق العقدة الجانبية الخلفية وتسجيل الواقع الافتراضي ، يمكن قياس النشاط في كل من الخلايا العصبية الأفرنتة والحركية في وقت واحد. يتم عرض قنوات التسجيل باستخدام بروتوكولات تسجيل خالية من الثغرات (الخطوة 1.4) للرصد المستمر لنشاط afferent وVR. في الوقت الحقيقي ، يمكن ملاحظة انخفاض في معدل الارتفاع التلقائي في afferent بالتزامن مع نشاط الواقع الافتراضي الذي يدل على نوبات السباحة الوهمية(الشكل 1E). وجدنا أن أفضل النتائج والكشف الدقيق عن المسامير كانت منتجات ...

نحن نصف بروتوكول لرصد التغيرات في نشاط الخلايا العصبية afferent خلال الأوامر الحركية في نموذج نظام خلايا الشعر الفقارية.

نشاط الخلايا العصبية الجانبية الخلفية Afferent خلال السباحة في حمار وحشي

Sensory systems gather cues essential for directing behavior, but animals must decipher what information is biologically relevant. Locomotion generates ...

هذا البروتوكول يمكن الباحث من رصد نشاط واستجابة الخلايا العصبية الحسية واحدة لتحفيز تسيطر عليها في فقرات سليمة تتصرف. هذا التصحيح الكهربية هو وسيلة سريعة ومباشرة لتسجيل من النشاط ارتفاع الخلايا العصبية الفردية في الوقت الحقيقي. وهذا يوفر دقة وقت وحساسية أفضل بتكلفة أقل من معظم تقنيات التصوير البصري.خلايا الشعر الخط الجانبي هي متجانسة لتلك التي من الأذن الداخلية البشرية. لذلك تستعد هذه التقنية للكشف عن خصائص دوائر خلايا الشعر التي تنطبق على الصمم البشري واضطرابات السمع. علم الفيزيولوجيا الكهربية هو حرفة تستخدم المهارات الحركية الدقيقة التي تحتاج إلى أن ينظر إليها وتقليدها جسديا.التعليمات النصية فقط تترك مساحة كبيرة جدا لسوء التفسير. للبدء، والاستغناء عن طبقة رقيقة من الاستومر السيليكون الذاتي خلط مثل سيلغارد في طبق زراعة الأنسجة غطاء الزجاج القاع لجعل طبق تسجيل أسفل elastomer السيليكون. لجعل دبابيس تشريح، وتوفير تهمة سلبية من خمسة فولت إلى كوب 100 ملليلتر من إيشانت باستخدام إمدادات الطاقة DC وإرفاق سلك التنغستن إلى الإخراج مشحونة إيجابيا.تراجع مرارا وتكرارا غيض من السلك في حمام إيشانت حتى يضيق الطرف إلى نقطة حادة. تحت مجهر ستيريو، قطع السلك ما يقرب من ملليمتر واحد من طرف مع شفرة حلاقة حافة مستقيمة. كرر هذا ثلاث مرات ثم إدراج دبابيس في طبق تسجيل الشفاء باستخدام ملقط ناعم.لإعداد أقطاب تسجيل، سحب أنابيب الشعيرات الدموية الزجاجية borosilicate باستخدام سحب micropipette مع خيوط مربع. يجب أن يكون القطب طرف قطرها 30 ميكرومتر مع تفتق التي سيتم استخدامها لتسجيل الخلايا العصبية afferent من الخط الجانبي الخلفي. سحب أنبوب إضافي البوروسيليكات الزجاج الشعرية في زوج من الأقطاب الكهربائية مع أصغر قطر تلميح واحد إلى خمسة ميكرومتر.عقد قطب واحد في كل يد، تشغيل بلطف نصائح عبر بعضها البعض لكسر النصائح. باستخدام مثقبية، قم بتلميع الطرف المفلت حتى يصبح ناعما. يجب أن يتراوح قطر الطرف النهائي بين 30 إلى 50 ميكرومتر.شل يرقات حمار وحشي ونقلها إلى طبق بتري 35 ملليمتر باستخدام طرف كبير لنقل ماصة. إزالة أكبر قدر ممكن من الحل المحيطة بها. تزج اليرقات في 10 ميكرولتر من 0.1٪ ألفا-Bungarotoxin لمدة خمس دقائق تقريبا.اغسل اليرقة المشلولة بمحلول خارج الخلية لمدة 10 دقائق. ثم استخدم ماصة نقل لنقل اليرقة من حمام المحلول خارج الخلية إلى طبق التسجيل القاعي للسيليكون. تحت مجهر ستيريو ، ضع اليرقات برفق مع ملقط ناعم فوق مركز حصيرة السيليكون هذه ، الجانب الجانبي مع النهايات الأمامية والخلفية للجسم التي تعمل من اليسار إلى اليمين.باستخدام ملقط يميل غرامة، إدراج دبوس حافة متعامدة إلى السيليكون من خلال نوتوشورد الظهري من اليرقات الظهرية مباشرة إلى فتحة الشرج. إدراج دبوس الثاني من خلال notochord قرب نهاية الذيل وإدراج دبوس الثالث من خلال ظهرية notochord من المثانة الغاز. إدراج دبوس الرابع من خلال الحويذ فيتيك مع توفير دوران طفيف كما يدخل دبوس في encapsulant.كما يتم تطبيق دوران طفيف، ومشاهدة للأنسجة بين الحويزل المشقوق وotic للكشف عن مجموعة من سوماتا أففيرنت. ضع يرقة الدبوس تحت هدف 10 مرات على مرحلة ثابتة من مجهر DIC وتوجيه الشقوق الميسيبتية للكتل العضلية الموازية لنواقل مرحلة الرأس الأيسر. ضع السلك الأرضي في محلول الحمام وتأكد من توصيله بمرحلة الرأس اليسرى.املأ قطب تسجيل الواقع الافتراضي ب 30 ميكرولتر من المحلول خارج الخلية باستخدام طرف ماصة مرن لتحميل الجل وأدخله في حامل ماصة مرحلة الرأس اليسرى. زيادة التكبير إلى 40 مرة وخفض ماصة التسجيل في محلول الطبق مع تطبيق الضغط الإيجابي الناتج عن محول هوائي. جلب طرف القطب على myoseptum بين اثنين من المايوميرات البطني إلى الخط الجانبي حتى يتم تركز الشق في فتحة طرف القطب VR خفض ماصة حتى حافة متخلفة من فتحة طرف الاتصالات بلطف الظهارة.بعد الاتصال الأولي، والمناورة ماصة قطريا لضمان حافة الرائدة يجعل الاتصال ويمكن أن تولد ختم. تطبيق الضغط السلبي مع محول هوائي وعقد عليه. في برنامج المشبك التصحيح، انقر على زر التشغيل على شريط الأدوات لمراقبة إشارة VR.تأكد من أن يتم تحقيق تسجيل VR مرة واحدة يتم ملاحظة نشاط الخلايا العصبية الحركية مع ديناميات إشارة انفجار ويلز النمطية. ملء القطب تسجيل afferent مع 30 ميكرولتر من محلول خارج الخلية وإدراجه في حامل ماصة مرحلة الرأس الأيمن. ثم خفضه في محلول الطبق مع تطبيق الضغط الإيجابي الناتج عن محول هوائي.حدد موقع القطب الكهربائي وأحضر طرف القطب الكهربائي فوق العينة. باستخدام ميكرومانيبولاتور، خفض طرف القطب afferent حتى يتم عقد موقف فوق cleithrum. زيادة التكبير إلى 40 مرة الغمر وتحديد موقع تقاطع العصب الخط الجانبي الخلفي وcleithrum.جلب طرف القطب فوق العقدة afferent وخفض ماصة حتى طرف الاتصالات ظهارة. بلطف، مناورة القطب بحيث محيط طرف كامل الاتصالات العقدة afferent. تطبيق الضغط السلبي مع محول هوائي وعقد عليه.بعد النقر فوق تشغيل في برنامج المشبك التصحيح، تأكد من أن يتم تحقيق تسجيل التصحيح فضفاضة الخلية بأكملها من الخلايا العصبية afferent عندما تحدث طفرات تلقائيا تقريبا كل 100 إلى 200 مللي ثانية. مرة واحدة يتم الكشف عن الخلايا العصبية afferent ونشاط الخلايا العصبية الحركية على حد سواء، انقر على زر تسجيل على شريط الأدوات في ذروة المشبك 10 لالتقاط التسجيلات الحرة الفجوة في وقت واحد في كل من القنوات. إجراء معالجة مسبقة للبيانات كما هو موضح في المخطوطة النصية.باستخدام بروتوكول التسجيل الخالي من الفجوات هذا ، يمكن قياس النشاط في الوقت الفعلي للخلايا العصبية الأفرنت وVR في وقت واحد. مخصص مكتوبة ، قبل معالجة البرامج النصية توليد المؤامرات للمساعدة في التصور من الكشف عن ارتفاع باستخدام معلمات مثل عتبة ، والحد الأدنى من المدة والحد الأدنى الفاصل الزمني بين البينية. تم الحصول على إشارات معزولة عن طريق ضبط المتغيرات الكشف الحد السفلي والمرتبط العلوي في البرنامج النصي قبل المعالجة.تتبع عملية الكشف عن ارتفاع الجذور البطنية معلمات متطابقة مع مدخلات إضافية. يتم تعريف رشقات نارية داخل قيادة المحرك من قبل ما لا يقل عن اثنين من المسامير في غضون 0.1 مللي ثانية دائم لمدة خمس مللي ثانية على الأقل ورسمها ما لا يقل عن ثلاث رشقات نارية مع فترات فاصلة بين أقل من 200 مللي ثانية قبل المعالجة البرامج النصية سوف تراكب أجزاء من النشاط afferent دخلت في فترة محددة جيدا من الفائدة. في هذه الحالة، يظهر النشاط التلقائي المتوسط تغيرات جذرية استجابة لبداية النشاط الحركي المصور على المحور X كزالوقت المساوي للصفر.تم الكشف عن اختلافات كبيرة في معدلات الارتفاع البؤري بين معدلات الارتفاع قبل السباحة ومعدلات الارتفاع في كل من فترات السباحة وما بعد السباحة. وارتبطت معدلات الارتفاع الحاد سلبا بمدة السباحة. لا يوجد أي ارتباط تم اكتشافه بين معدل الارتفاع النسبي وتواتر السباحة.صحة الحيوان هو أهم شيء عند محاولة هذا الإجراء. من المهم مراقبة تدفق الدم السريع ليس فقط لضمان رفاهية الحيوان ولكن أيضا لزيادة احتمال نجاح التسجيل العصبي. من خلال الاستفادة من الأدوات الوراثية المتاحة في Zebrafish ، يمكن تكملة بروتوكول الفيزيولوجيا الكهربية هذا بخطوط معدلة وراثيا للتحقيق بقوة في اتصال الدائرة التشريحية والوظيفية في أنظمة خلايا الشعر وخارجها.هذا التعديل المبسط لتقنية المشبك التصحيح يسمح لنا لرصد كيفية عمل النظم الحسية في الجسم الحي.

activity-posterior-lateral-line-afferent-neurons-during-swimming

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

يصف هذا الفيديو مقايسة الانجذاب في الزرد. تتضمن الطريقة قياس سلوك اتجاه أسماك الزرد استجابة لمعدلات تدفق المياه المختلفة تحت تأثير المجالات المغناطيسية المختلفة.

فحص تقلب أسماك الزرد: طريقة لقياس سلوك الاتجاه استجابة لمعدلات تدفق المياه المختلفة

يصف هذا الفيديو تقنيات البصريات الوراثية عن طريق تنشيط الخلايا العصبية الحسية الجسدية المعدلة وراثيا وتسجيل الاستجابة السلوكية المستحثة باستخدام كاميرا فيديو عالية السرعة.

علم البصريات الوراثي لسمك الزرد: تنشيط الخلايا العصبية الحسية الجسدية المعدلة وراثيا لدراسة الاستجابات السلوكية لليرقات

يوضح هذا الفيديو تسجيل الإشارات الكهربائية من الخلايا العصبية الواردة في يرقة الزرد المشلولة عن طريق وضع ماصة دقيقة بالقرب من عقدة الخط الجانبي وتشكيل ختم فضفاض لالتقاط الإشارة. يحافظ المحلول خارج الخلية على قابلية الخلايا العصبية أثناء هذه العملية.

مراقبة الإشارات الكهربائية من الخلايا العصبية الواردة في يرقة الزرد المجمدة

لأنه يتم دراسة العديد من النماذج الزرد من الأمراض العصبية وغير العصبية في الأسماك البالغة بدلا من الجنين / اليرقات، وضعنا كمية الجانبي الخط التجديدي الفحص التي يمكن تطبيقها على نماذج المرض الزرد الكبار. تشارك مقايسة القرار في 1) neuromast و2) مستويات خلية الشعر الفردية.

على الفحص لتجديد الخط الجانبي في اسماك الزرد الكبار

يعتبر الزرد نموذجا ممتازا لدراسة وظيفة العضلات والأمراض. خلال التطور الجنيني المبكر ، تبدأ أسماك الزرد في تقلصات عضلية منتظمة مما ينتج عنه سلوك سباحة إيقاعي ، والذي يتغير عندما تتعطل العضلات. نصف هنا الاستجابة التي يتم استثارتها باللمس ومقايسة الحركة لفحص أداء السباحة كمقياس لوظيفة العضلات.

عن طريق الاستجابة أثار اللمس والحركة فحوصات لتقييم أداء العضلات وظيفة في الزرد

توضح هذه المخطوطة طرق التسجيلات الكهربية من الخلايا العصبية في العمود الفقري من الأجنة الزرد واليرقات. إعداد يحافظ على الخلايا العصبية في الموقع وغالبا ما ينطوي على الحد الأدنى تشريح. تسمح هذه الطرق لدراسة الكهربية من مجموعة متنوعة من الخلايا العصبية في العمود الفقري، من الأولي للاكتساب استثارة الكهربائية من خلال مراحل اليرقات في وقت مبكر.

الزرد<em&gt; في الموقع</em&gt; الحبل الشوكي التحضير للتسجيلات الكهربية من العمود الفقري الحسية والحركية العصبية

الزرد هو نظام نموذج العديد من الميزات القيمة بما في ذلك الوضوح البصري، التنمية الخارجية السريعة،، وأهمية خاصة في مجال السمع والتوازن، خارجياً يقع خلايا الشعر حسية. توضح هذه المقالة الزرد كيف المحورة وراثيا يمكن استخدامها للاعتداء ميتشانوسينسيشن خلايا الشعر والدالة بريسينابتيك بكاملها.

في تصوير الكالسيوم فيفو خلايا الشعر الخط الجانبي في الزرد اليرقات

الاستئصال بالليزر هو تقنية قابلة للتطبيق على نطاق واسع لدراسة التجديد في النظم البيولوجية. يصف البروتوكول المعروض استخدام مجهر confocal المسح الضوئي بالليزر القياسي للاستئصال بالليزر والتصوير اللاحق للفاصل الزمني للخلايا المُتدرِّب في الخط الجانبي للحمار الوحشي.

الاستئصال الليزري القائم على المجهر والتجدد في خلايا الحمار الوحشي Interneuromast

الزرد البالغ قادر على التعافي الوظيفي بعد إصابة الحبل الشوكي ، وهو نظام نموذجي رئيسي لتوضيح الآليات الفطرية للتجديد العصبي. هنا ، نصف اختبارات تحمل السباحة وسلوك السباحة كقراءات وظيفية لتجديد الحبل الشوكي.

تقييم القدرة على التحمل على السباحة وسلوك السباحة في أسماك الزرد البالغة

هنا ، نقدم بروتوكولا لإجراء تصوير الكالسيوم ثنائي الفوتون في الدماغ الأمامي الظهري لسمك الزرد البالغ.

تصوير الكالسيوم ثنائي الفوتون لنشاط الدماغ الأمامي في تصرف الزرد البالغ

يعد التقاطع العصبي العضلي ليرقة الزرد نموذجا جذابا لدراسة فسيولوجيا التشابك. إنه قابل للعديد من التقنيات التجريبية ، بما في ذلك الفيزيولوجيا الكهربية والتصوير البصري. هنا ، نصف بروتوكولا لتصوير الإرسال المشبكي باستخدام مسبار قائم على pHluorin تحت مجهر التألق المستقيم.

تصوير مباشر لإعادة تدوير الحويصلة المشبكية في الوصلة العصبية العضلية لسمك الزرد اليرقي المقطوع

اكتشف تسجيل النشاط العصبي الحسي في الوقت الفعلي باستخدام تقنية التصحيح الكهربائي في يرقات حمار وحشي. تُسهم هذه الطريقة في فهم آليات السمع والتنويرات العصبية ذات الصلة باضطرابات السمع البشري.

نشاط الخلايا العصبية الجانبية الخلفية Afferent خلال السباحة في حمار وحشي

استكشف المزيد من الفيديوهات