نموذج جراحي معدل لإقفارية الأطراف الخلفية في ApoE^-/- الفئران باستخدام شق مصغر

ما قدمناه اليوم هو طريقة مبسطة معدلة وفعالة جراحيا ، لإنشاء نقص التروية في الأطراف الخلفية في فئران ApoE. ويمكن تنفيذ هذه الطريقة في أي مرفق الحيوان. الميزة الرئيسية لطريقة الزليلي هي انخفاض الغازية ، وذلك باستخدام شق أقل من خمسة ملليمترات.

الأسلوب لديه هوف التعلم. لذلك، ننصح بممارسة النماذج المجهرية قبل العمل على الحيوانات، والتي سيتم تضمينها في التحليل النهائي. سيتم إثبات هذه الطريقة من قبل كايشوان يان، طبيب الطب والطالب من مختبري.

ابدأ بإعداد المعدات والأدوات اللازمة للجراحة. بعد إعطاء التخدير إلى الماوس، وتطبيق هذا المرهم على العينين لمنع الجفاف. ثم ضع الماوس على وسادة التدفئة للحفاظ على درجة حرارة الجسم الأساسية في حوالي 37 درجة مئوية.

باستخدام مسحة القطن وكريم إزالة الشعر، وإزالة الشعر بعناية من الجلد الطرف الخلفي على الجانب الأيمن. ضع الماوس في وضع السطخ على وسادة التدفئة تحت مجهر تشريح. استخدام الكحول لتطهير الجلد ومسح مع القطن بعيدا عن الجانب النباتي من شق.

باستخدام ملقط مدببة ومقص الجراحية جعل شق ما يقرب من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات في وسط المنطقة الأربية. إزالة بعناية الأنسجة الدهنية تحت الجلد مع مساعدة من ملقط مدببة غرامة لفضح حزمة الأوعية الدموية العصبية الفخذية القريبة. باستخدام مسحة قطنية مبللة بالمحلول الملحي ، قم بتحريك الشريان الفخذي بعناية بعيدا عن العصب الفخذي والوريد الفخذي.

ثم باستخدام غيض من خياطة 7.0، تخترق بعناية غشاء غمد الفخذ. ثم تمرير إلى 7-0 غرز قابلة للامتصاص من خلال الشريان الفخذي القريب وجعل عقدة مزدوجة باستخدام مقص الينابيع. بعد ذلك عبر الشريان الفخذي بين العلاقات اثنين.

مرر الغرز القابل للامتصاص 6-0 عبر الحافة السفلية للشق واسحب الشق برفق إلى منطقة الجانب الأيمن من الركبة في الطرف الخلفي لكشف الشريان الفخذي البعيدة. تحرك بعناية الأنسجة تحت الجلد جانبا لفضح حزمة العصبية الوعائية. تشريح الشريان الفخذي من الوريد الفخذي والعصب الفخذي، واستخدام القطن لحماية العصب.

ثم باستخدام غيض من خياطة 7.0، بيرس غشاء غمد الفخذ. تمرير اثنين من الغرز 7-0 القابلة للامتصاص من خلال الشريان الفخذي البعيدة وجعل عقدة مزدوجة باستخدام مقص الربيع لتقطيع الشريان الفخذي بين اثنين من العلاقات. بعد ذلك، غرزة شق باستخدام الغرز 6-0 قابلة للامتصاص.

ضع الماوس على وسادة التدفئة في قفص نظيف ومواصلة رصد معالمها الحيوية حتى الانتعاش. تحديد نجاح الربط المزدوج للشريان الفخذي أو DLFA في اليوم التالي عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي. قبل إجراء DLFA ، تراوحت أوزان الفئران من 29.6 إلى 38.0 جرام.

بعد سبعة أيام من جراحة DLFA ، تراوحت الأوزان من 26.5 إلى 34.1 جرام ، وهو أقل بكثير من أوزان ما قبل DLFA. ولم تظهر المناطق القريبة والبادية في الاتحاد الإنجليزي الأيمن أي تغلغل. انخفضت نتائج مقياس تارلوف بشكل كبير بعد يوم واحد من الجراحة.

وعلى الرغم من أنها زادت ببطء خلال الأيام التالية، فإنها لا تزال أقل من خط الأساس حتى اليوم السابع. لم تتمكن كفوف الأطراف الخلفية الإقفارية في سبعة فئران من التمدد بشكل طبيعي مقارنة بالجانب المقابل. بالإضافة إلى ذلك ، أظهرت أربعة من الفئران تغيرا طفيفا في لون الكفوف مقارنة بالجانب المقابل.

كشف تلطيخ H &؛ E من العضلات المعدلة وراثيا الحق الألياف العضلية التي أظهرت نخر نقص التروية غير النظامية، حيث خلايا الأقمار الصناعية المنتشرة قد حلت محل الألياف العضلية النخرية ووزعت في كتلة أو مع تشتت منتظم. فقدت الألياف العضلية التي تظهر تسللا التهابيا بواسطة الضامة متعددة النوى خصائصها المورفولوجية الطبيعية ، مع وجود عدد قليل جدا من الألياف العضلية المجددة. كانت المقاطع العرضية من هذه الألياف العضلية المجددة مستديرة.

كانت السيتوبلازم حمراء ملطخة وكانت نواة صغيرة واحدة أو نواة متعددة موجودة في المركز. ومع ذلك ، لم يلاحظ هذا النوع من النمط الالتهابي في الآلية العالمية اليسرى. CD31 تلطيخ الأجسام المضادة التي أجريت لمراقبة كثافة الأوعية الدموية الدقيقة، وأشار إلى أن الأطراف الخلفية الإقفارية أظهرت كثافة الأوعية الدموية الدقيقة أكثر بكثير من الجانب غير الإقفاري. أهم شيء هو تشريح الشريان الفخذي.

المشغل يحتاج إلى أن يكون من ذوي الخبرة في التقنيات المجهرية، فضلا عن أن تكون على دراية تشريح الماوس الخلفي. من حيث المبدأ ، يمكن استخدام هذه الطريقة أيضا لدراسة إصابة الإقفارية في الساق. بموجب هذا ، يمكن انسداد الشريان بمشبك وعاء ناعم قبل السماح بإعادة التروية.