تطبيق التصوير بالموجات فوق الصوتية والقص موجة التصوير في نموذج الفئران من NAFLD / ناش

استخدام الموجات فوق الصوتية والقص موجة elastography تمكن الباحثين لقياس التغيرات في الدهون في الكبد والتليف الضمني في نماذج التهاب الكبد الدهني غير الكحولية. طريقة التصوير هذه هي تقنية غير جراحية وعالية الإنتاجية وقابلة للترجمة سريريا ، ويمكن استخدامها لتقييم مرحلة المرض وفعاليته في نماذج التهاب الكبد الستاتي غير الكحولي أثناء اكتشاف الدواء. للبدء، ضع فئران Wistar Han الذكور التي تتراوح أعمارهم بين ستة وسبعة أسابيع وزنها 150 إلى 175 جراما في أزواج في أقفاص ذاتية التهوية مع فراش مناسب عند حوالي 22 درجة مئوية ورطوبة نسبية تتراوح بين 40 و70٪ مع دورة خفيفة / داكنة تتراوح بين 12 و12 ساعة.

توفير 20 الفئران مع نقص الكولين, حمية عالية الدهون مع 1٪نسبة الكولسترول, وآخر 20 الفئران مع تشاو القوارض مختبر القياسية. لإعداد أداة التصوير، ضع سطحا دافئا في منطقة التصوير للحفاظ على دفء الحيوان أثناء التصوير، وإصلاح مخروط الأنف التخديري لتوصيل التخدير المستنشق. استخدم حامل مسبار الموجات فوق الصوتية لنقل مسبار الموجات فوق الصوتية إلى الموقع المطلوب ومنع المسبار من الراحة على الحيوان.

بمجرد تخدير الجرذ بالكامل ، قم بنقله من غرفة التعريفي إلى بطانية متداولة بالماء الساخن الدافئ. استخدام كريم إزالة الشعر الكيميائية لإزالة الشعر من القفص الصدري إلى الحوض على الجانب الأيمن من الفئران. ضع الجرذ في وضع الرصانة الجانبي الأيسر وألصق الكفوف العلوية فوق الرأس على منصة تصوير دافئة.

اضغط على مفتاح المريض على لوحة التحكم في الجهاز وحدد الموضوع وفقا لتصميم الدراسة. تطبيق كمية صغيرة من هلام الموجات فوق الصوتية الدافئة على منطقة الجلد depilated من الفئران. حرك مسبار الموجات فوق الصوتية للمس المنطقة المغطاة بالجل.

بمجرد ظهور صورة وضع B الحية للأعضاء الداخلية على الشاشة ، حرك مسبار الموجات فوق الصوتية إلى المنطقة أعلى الورك قليلا ، بالتوازي مع الفقرات القطنية. استخدم عرض وضع B لتحديد موقع الكلى اليمنى من خلال تحديد الشريان الكلوي الكبير وفصل النخاع القشري. مراقبة جزء من الكبد في مستوى واحد من الصورة وضمان أن فقاعات الهواء أو الظلال ليست موجودة في الصورة.

ضبط التركيز وتأكد من أن القشرة الكلوية والكبد parenchyma في نفس المستوى للحصول على صورة واضحة. تأكد من أن الحيوان بين الأنفاس عند تجميد الشاشة لتجنب التقاط صور ضبابية. حدد نسبة وضع B لقياس السطوع النسبي للأنسجة من المنطقة المختارة ذات الاهتمام.

إنشاء دائرة مليمترين ووضعها على المنطقة ذات الاهتمام في صورة الكبد، الذي يقع على يمين الكلية. ضع دائرة جديدة على صورة قشرة الكلى، مع الحفاظ على أعماق الدوائر على قشرة الكبد والكلى على حالها. اضغط على زر التحديد على لوحة التحكم لعرض مؤشر الكبد الكلوي كنسبة وضع B وكرر القياس ثلاث مرات في أعماق وطائرات مختلفة من الأنسجة ، ثم حساب المتوسط.

حرك المسبار بشكل عرضي في المنطقة الفرعية اليمنى لتحديد موقع الكبد باستخدام وضع B. حدد موقع منطقة واضحة من الكبد معظمها بارنشيما وخالية من الأوعية الدموية الكبيرة، مثل الوريد البوابة والشريان الكبدي، ثم اضغط على زر SWE على لوحة التحكم لتوليد خريطة مرونة القص من الأنسجة. ضبط حجم وموضع مربع SWE أسفل كبسولة الكبد في منطقة خالية من الظلال.

عندما يكون الصندوق ممتلئا ومستقرا، اضغط على زر التجميد على لوحة التحكم بينما يكون الجرذ بين الأنفاس. اضغط على Q-Box على شاشة اللمس للأداة لحساب مرونة المنطقة ذات الاهتمام على خريطة مرونة موجة القص. ستظهر دائرة ومربع بيانات.

ضع الدائرة في منطقة خالية من الظل مع تلوين موحد ، وتجنب مناطق التصلب. كرر الإجراء ثلاث مرات عن طريق تحريك المسبار صعودا وهبوطا أو جانبيا على البطن لجمع الصور المرسومة بواسطة SWE من مناطق مختلفة من الكبد. عند الانتهاء، قم بإزالة الشريط من الكفوف ومسح الجل الزائد.

ضع الجرذ مرة أخرى في قفص دافئ وجاف والسماح لها بالتعافي بشكل كامل. حدد جميع عمليات المسح المطلوبة لتحليل البيانات عن طريق تحديد المربع المجاور لاسم المريض باستخدام كرة المسار وزر التحديد. بعد تصدير الملفات، افتح ملف JPG فردي لكل مسح ضوئيا ولاحظ البيانات على الجانب الأيمن من الصورة.

نسخ كافة البيانات في جدول بيانات أو برامج إدارة قاعدة بيانات أخرى، وإجراء التحليلات الإحصائية المطلوبة. الصور التمثيلية للمؤشرات الكبد الكلوي من السيطرة والكولين ناقص, مجموعات النظام الغذائي عالية الدهون تبين أن سطوع الكبد في قشرة الكلى كان تقريبا نفس, وكان مؤشر الكبد الكلوي أقل من واحد في مجموعة التحكم. في مجموعة النظام الغذائي الغنية بالدهون ، زاد سطوع الكبد ، وارتفع مؤشر الكبد الكلوي إلى 1.91 في ستة أسابيع و 1.79 في نقاط زمنية 12 أسبوعا.

ارتفعت قيم مؤشر الكبد الكلوي لمجموعة النظام الغذائي الغني بالدهون بسرعة طوال الأسابيع الثلاثة إلى الستة الأولى، قبل أن تصل إلى الهضبة. وأظهرت أقسام الكبد الملطخة بصبغة O الحمراء النفطية زيادة كبيرة في المنطقة الملطخة في مجموعة النظام الغذائي الغني بالدهون مقارنة بمجموعة التحكم. كما تم العثور على ارتباط بين المنطقة الملطخة في المئة ومؤشر الكبد الكلوي.

ازداد تصلب الأنسجة تدريجيا في مجموعة النظام الغذائي الغني بالدهون على مدى 12 أسبوعا ، ووصل إلى 23.1 كيلوباسكال بسبب التليف. كانت عينات الكبد ملطخة بالأحمر picrosirius لترجمة الكولاجين كمؤشر على التليف. ولوحظت زيادة كبيرة في نسبة المنطقة الملطخة في مجموعة النظام الغذائي الغني بالدهون مقارنة بمجموعة التحكم.

كما تم العثور على ارتباط قوي بين المنطقة الملطخة في المئة وأرقام معامل موجة القص E. من المهم وضع محول ودوائر القياس أو مربعات بشكل صحيح. تجنب القطع الأثرية في الصور سيسمح للقياسات المتكررة ومتسقة.

بعد العملية، يمكن أيضا إجراء قياسات الجسم الحي السابق للدهون الثلاثية في الكبد والتعبير الجيني الكولاجين على أنسجة التشريح لتأكيد النتائج التي شوهدت في التصوير.