تنميط المركبات المتطايرة في فاكهة الكشمش الأسود باستخدام الاستخراج المجهري للمرحلة الصلبة في مساحة الرأس إلى جانب كروماتوغرافيا الغاز - قياس الطيف الكتلي

تحسين رائحة الفاكهة هو أحد الأهداف الرئيسية في برامج التربية. لهذا ، نحتاج إلى تقنية موثوقة تسمح لنا بقياس المكونات المتطايرة في الفواكه. هذه التقنية سريعة وشبه آلية ، مما يسمح بقياس ما يصل إلى 22 عينة في اليوم.

بالإضافة إلى ذلك ، فهي رخيصة نسبيا وتتطلب الحد الأدنى من معالجة العينات. يمكن تطبيق هذه الطريقة بسهولة على جميع أنواع الفاكهة ، مثل محاصيل التوت المهمة اقتصاديا. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن زيادة حجم مكتبة المركب المكتشف بسهولة.

للبدء ، أضف ملليلتر واحد من محلول كلوريد الصوديوم إلى أنبوب خمسة ملليلتر يحتوي على عينة الويد المجمدة. هز الأنبوب حتى تذوب العينة تماما وتتجانسها. ثم جهاز الطرد المركزي في 5،000 مرة غرام لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة.

اقطع نهاية طرف الماصة 1000 ميكرولتر واستخدمه لنقله إلى supernatant إلى ملف مساحة الرأس المكون من كلوريد الصوديوم. أضف خمسة ميكرولترات من المعيار الداخلي إلى كل عينة تحتوي على ملف مساحة الرأس. ضع ملف مساحة الرأس المغلقة في جهاز أخذ العينات التلقائي GC-MS، في درجة حرارة الغرفة، لتشغيل HS-SPME/GC-MS تلقائي، مع التأكد من عدم وضع النسخ المتماثلة البيولوجية في مواضع متتالية في جهاز أخذ العينات التلقائي.

قم باحتضان ملفات مساحة الرأس مسبقا لمدة 10 دقائق عند 52 درجة مئوية مع الإثارة عند 17 مرة G.أدخل جهاز SPME في القارورة لتعريض الألياف إلى مساحة الرأس وقم بإجراء استخراج المركبات العضوية المتطايرة لمدة 30 دقيقة عند 50 درجة مئوية مع الإثارة عند 17 مرة G.أدخل الألياف في منفذ الحقن لمدة دقيقة واحدة عند 250 درجة مئوية في وضع الامتزاز المتطاير. ثم قم بتنظيف الألياف في محطة تنظيف SPME بالنيتروجين لمدة خمس دقائق عند 250 درجة مئوية. تحليل المركبات العضوية المتطايرة باستخدام كروماتوغراف غازي مقترن بمطياف كتلة مصيدة الأيونات كما هو موضح في مخطوطة الكشف.

افتح ملفات ملف تعريف GC-MS الخام. لتحديد المركبات، قارن أوقات الاستبقاء وأطياف الكتلة ومؤشرات الاحتفاظ الخطية Kovats مع مؤشرات الاستبقاء التي تم الحصول عليها من المعايير الأصلية. لكل معيار تجاري ، قم بالتعليق على وقت الاحتفاظ في الكتلة الأكثر وفرة لشحن الأيونات.

ثم حدد أيون M by Z محدد لكل VOC. احسب مساحة الذروة لكل VOC بالنسبة إلى مساحة المعيار الداخلي لتقليل التباين الفعال وانجراف الكثافة. لتصحيح تأثير الدفعة، قم بتطبيع منطقة ذروة المركبات العضوية المتطايرة لكل عينة إلى منطقة الذروة المقابلة في عينة التحكم التي تم تحليلها في نفس التشغيل.

حدد ملف تعريف كروماتوجرام أيون الكلي المتطاير لفاكهة الكشمش الأسود الناضج الذي تم الحصول عليه بواسطة HS-SPME / GC-MS 63 من المركبات العضوية المتطايرة التي تنتمي إلى الإسترات والألدهيدات والكحول والكيتونات والتربينات والفيورانات استنادا إلى مكتبة تم تطويرها لتحديد أنواع فاكهة التوت. تتوافق بعض القمم الأكثر وفرة التي لوحظت مع اثنين من أحاديات التربين ، لينالول وتيربينيول ، واثنين من مركبات C6 ، 2-Hexenal و 3-Hexenal. تظهر أطياف الكتلة التي تم الحصول عليها من ملامح التيار الأسود في مقارنتها بأطياف المعايير التجارية البحتة ل 2-Hexenal و terpineol.

أظهر PCA من ملفات تعريف VOC لأربعة أصناف مختلفة من التيار الأسود ، أن البيئة تؤثر بقوة على المحتوى المتطاير ، حيث يفصل PC1 العينات بناء على موقعها. يمكن ملاحظة النمط الوراثي الفعال مع PC2 ، حيث يتم فصل Ben Tirran بوضوح عن الأصناف المتبقية. يؤكد المحتوى النسبي للينالول و 2-Hexenal في الصنف الحالي الأسود الأربعة الذي تم تقييمه أن محتوى لينالول كان أعلى بشكل عام في بولندا منه في اسكتلندا ، في حين أظهر 2-Hexenal الاتجاه المعاكس.

كانت نسبة لينالول هي الأعلى في أصناف بن تيران ، في أن 2-Hexenal كانت الأعلى في أصناف بن ترون. من المهم البدء بالمواد المجمدة ، وطحنها إلى مسحوق ناعم لضمان استخراج متطاير مناسب. بمجرد استخراجها ، يجب وضع العينة في جهاز أخذ العينات التلقائي ، في أقرب وقت ممكن.

يمكن دمج هذه الطريقة مع منصة التمثيل الغذائي الأخرى لتحديد التمثيل الغذائي المهم الآخر ، لطعم الطعام أو القيمة الغذائية ، لتربية الأصناف ذات الخصائص الحسية المعززة.