تقنيات التعامل مع الحد من الإجهاد في الفئران

اسمي الدكتور توماس بريفوت. أنا عالم في مركز الإدمان والصحة العقلية، أو CAMH، وأستاذ مساعد في جامعة تورنتو في قسم الطب النفسي. مجموعتي لديها مصلحة خاصة في الحد من القلق الأساسي والتفاعل في الفئران من أجل الحد من تقلب البيانات وتحسين رفاهية الحيوان.

وقد أثبتت الفئران أن أصول لا تقدر بثمن في العلوم الأساسية والبحوث قبل السريرية، ومع ذلك، عدد قليل جدا من المختبرات في جميع أنحاء العالم السيطرة على القلق خط الأساس وصد الحيوانات مختبرهم، وبالتالي، مما يعقد تكرار البيانات بين المختبرات. ومن العوامل الرئيسية التي تسهم في القلق الأساسي المتغيرات البيئية غير المنضبطة، مثل ظروف السكن، والإثراء البيئي، والتعرض للإجهاد. وفي حين ساعد توحيد ظروف السكن والإثراء على تحسين هذه المسألة، فإن التعرض للإجهاد أثناء التفاعل مع المجربين لا يزال إلى حد كبير دون معالجة في الفئران.

معالجة الذيل ، وعملية رفع الماوس من الذيل ، لا يزال الماوس تستخدم على نطاق واسع الماوس معالجة تقنية ، على الرغم من كونها مرهقة بشكل خاص. على الرغم من أن البدائل للتعامل مع الذيل قد ظهرت بما في ذلك التعامل مع النفق والتعامل مع الكأس. وكان اعتماد هذه التقنيات بطيئا.

هنا نصف تقنية جديدة ، على غرار التعامل مع الكأس ، والتي يمكن تنفيذها مع أقل من ثلاثة أيام من التعود ، أو التعامل مع 3D. من خلال زيادة تدريجية في درجة وتعقيد التفاعل والتقدم استجابة لتفاعل الماوس إلى بعض معالم التعامل، يمكننا تقليل التوتر وتسهيل التعامل الروتيني. نحن نقيم فعالية التعامل ثلاثي الأبعاد في الفئران في الاختبارات السلوكية ، وتقييم السلوكيات الشبيهة بالقلق ، والتفاعل مع المجربين وهرمون الإجهاد المحيطي ، والكورتيكوسترون ، والمستويات ، وتوفير مقارنة مع تقنيات التعامل مع النفق والتعامل مع الذيل.

افتح القفص برفق وضع الغطاء على الجانب. أدخل يدك القفاز إلى القفص المنزلي قبل محاولة التقاط الماوس. السماح للفأر habituate إلى وجود اليد لمدة 30 ثانية.

ثم محاولة لالتقاط الماوس في أيدي مقبب. إذا كان الماوس لا يمكن بسهولة التقطت، كوب كلتا يديه معا واستخدامها لتوجيه الماوس إلى زاوية القفص. ثم استخدم كلتا يديه لالتقاط الماوس.

بمجرد إزالة الماوس من القفص، والحفاظ على يديك مسطحة ومفتوحة قدر الإمكان. السماح للفأر لاستكشاف بحرية. وهذا يوفر منصة مسطحة للفأرة على خطوة ويحد من خطر العض.

عقد اليد مفتوحة ومسطحة، مع النخيل حتى. ضع يدك الأخرى المجاورة للفأرة والسماح للفأر بالتحرك بحرية من يد إلى يد، دون أي قيود. بعد دقيقة واحدة من التعامل مع الأيدي المسطحة، والاسترخاء راحة يدك، وكوب قليلا الماوس في رأسك، قبل المتداول بلطف الماوس بين اليدين.

استمر لمدة أربع دقائق، بالتناوب بين المتداول اللطيف بين اليدين والاستكشاف المجاني ليديك المفتوحتين. خلال الدقيقتين الأخيرتين، قم بإجراء اختبار المأوى. السماح للفأرة التحرك إلى حافة يدك وجلب اليدين معا.

ببطء شديد، كوب يديك حتى الماوس يناسب داخل ملجأ شكلتها اليدين. تأكد من ترك فتحة، حتى يتمكن الماوس من الهرب إذا لزم الأمر. في محاولة للحفاظ على الماوس في المأوى لمدة خمس إلى 10 ثوان دون أي ضبط النفس.

كرر اختبار المأوى ثلاث إلى أربع مرات خلال الدقيقتين الماضيتين. لا تستعجل العملية. إذا كان الماوس يبدو وشدد من خلال كونها محصورة داخل اليد، والاستمرار في المتداول بين اليدين والاستكشاف مجانا لمدة 30 ثانية، ومن ثم إعادة محاولة اختبار المأوى.

السماح بالاستكشاف المجاني في أيدي لمدة 30 ثانية، ثم استبدال بلطف الماوس في قفصه. تنظيف الجزء العلوي من مقاعد البدلاء من أي البراز والبول مع 70٪ الإيثانول أو محلول التنظيف المناسب. تنظيف قفازات البراز والبول حسب الضرورة، وعند تغيير إلى قفص جديد، شطف قفازات مع 70٪ الإيثانول أو تغيير القفازات.

بحلول اليوم الثاني ، ينبغي أن يكون من الممكن بالفعل لإزالة الماوس من القفص في أيدي مقبب. إذا كان الماوس يبدو رد الفعل، أداء اليد المسطحة والاستكشاف الحر للرؤوس مفتوحة لمدة 30 ثانية إلى دقيقة. خلاف ذلك، انتقل إلى لفة بين اليدين واختبار المأوى.

قم بأداء الدور بين اليدين وخطوات المأوى من اليوم الأول لمدة دقيقتين إلى ثلاث دقائق. تنفيذ كل خطوة عدة مرات. إذا كان الماوس يبدو في سهولة في اختبار المأوى، حاول الحيوانات الأليفة الماوس على ظهره والرأس.

إذا لم يحاول الماوس الفرار من جهة الاتصال، انتقل إلى كزة الأنف. المس الماوس برفق على طرف خطم. إذا لم يعض أو يحاول أن يقلب رأسه ، فهذه علامة جيدة على التعود.

لاختبار مداعبة وكزة الأنف، لا تتسرع في العملية. إذا ظهر الماوس مضغوطا بسبب تقييده داخل اليدين، أو إذا لم يرغب في لمسه، فاستمر في الدوران بين اليدين لبضع دقائق ثم أعد المحاولة. وقف هذه الدورة بعد حوالي ثلاث دقائق من التعامل، إذا كان الحيوان يتفاعل بشكل جيد مع المأوى، رئيس المداعبة وكزة الأنف.

وإذا كان الحيوان يبدو على استعداد لاستكشاف يديك دون أي علامات الإجهاد، مثل محاولات الهرب، والقفز من اليدين أو تجنب الاتصال مع اليدين. إذا استمر الماوس في إظهار علامات الإجهاد أو لم يكن يتفاعل بشكل جيد مع اختبار المأوى أو اختبار كزة الأنف ، فاستمر في الجلسة حتى تصل إلى خمس دقائق ، كما هو الحال في اليوم الأول. استبدال الماوس في قفصه وتنظيف أعلى مقاعد البدلاء والقفازات.

في اليوم الثالث، انتقل من خلال نفس الخطوات في اليوم الثاني. التقط الماوس في راحة اليد. نقل الماوس بين اليدين.

حصر الماوس برفق في أيدي مقبب. إذا كان الماوس يستجيب بشكل جيد لهذه الخطوات، حاول مداعبة الماوس ومحاولة اختبار كزة الأنف. في اليوم الثالث، يجب أن يكون الماوس استرخاء بما فيه الكفاية للجلوس في راحة أيديهم دون تحريك قبالة، ويجب أن تكون قادرة على المضي قدما من خلال هذه الخطوات على مدى ما يقرب من دقيقتين إلى ثلاث دقائق.

استبدال الماوس في قفصه، وتنظيف أعلى مقاعد البدلاء والقفازات. في اليوم الثالث إذا كان الحيوان سيتم تقييده لأغراض تجريبية ، مثل الغاف أو الحقن داخل الصفاق ، يمكن أن تخضع الفئران لاختبار قرصة الرقبة.

امسك الماوس من مؤخر الرقبة، بين الإبهام والسبابة وارفع الماوس خمسة سنتيمترات فوق يدك لمدة ثانيتين إلى ثلاث ثوان. هذا هو عادة موقف غير مريح للفئران الكبار، وإذا كانت الفئران لا تزال قريبة من الحركة، فهي معتادة بشكل جيد على التعامل مع وسيكون من السهل كبح جماح للحقن. ضع الماوس مرة أخرى على يدك المسطحة والسماح لها باستكشاف بحرية لمدة دقيقة واحدة.

تم اختبار الحيوانات لاستعدادها للتفاعل طوعا مع المجرب وسهولة التعامل معها في سياق تجريبي. في الدراسة الأولى، كانت الفئران التي يتم التعامل معها إما عن طريق التعامل مع الأنبوب أو المناولة ثلاثية الأبعاد أقل عرضة للفرار عندما يحاول المجرب التقاط فأرة. بالإضافة إلى ذلك ، قضت دراسة فئران واحدة تم التعامل معها باستخدام تقنية ثلاثية الأبعاد المزيد من الوقت في نفس الربع الذي قضته يد المجرب ، مما يشير إلى زيادة الرغبة في التفاعل مع المجرب.

في الدراسة الثانية ، كانت الفئران التي يتم التعامل معها إما عن طريق التعامل مع الأنبوب أو المناولة ثلاثية الأبعاد أقل عرضة للفرار عندما يحاول المجرب التقاط الماوس مقارنة بالفئران التي تتعامل مع الذيل. ومع ذلك ، في الدراسة الثانية ، لم تؤثر تقنية المناولة بشكل كبير على الوقت الذي يقضيه في نفس الربع الذي تقضيه يد المجرب. تمت مقارنة تأثير التعامل مع الأنفاق ثلاثية الأبعاد والأنفاق بالتعامل مع الذيل في اختبارين للسلوكيات الشبيهة بالقلق ، واختبار التغذية المكبوت الجدة ومتاهة زائد مرتفعة.

في الدراسة الأولى ، في اختبار التغذية المكبوم الجدة ، كان هناك اتجاه إلى تقليل القلق في النفق التعامل مع الفئران والتعامل معها 3D. في متاهة مرتفعة بالإضافة إلى ذلك ، لم يكن هناك أي تأثير عام للتعامل معها. عندما لخصت على أنها Z-score، كان هناك انخفاض كبير في القلق العام في نفق التعامل معها والفئران التعامل مع 3D بالمقارنة مع الفئران الذيل التعامل معها.

في الدراسة الثانية ، لم يكن هناك تأثير عام للتعامل مع تدابير القلق في اختبار التغذية المكبوتة الجدة أو المتاهة المرتفعة بالإضافة إلى. عندما يلخص على أنه Z-score، لم يكن لتقنية المناولة أي تأثير عام على القلق. كمقياس فسيولوجي للإجهاد ، جمعنا المصل من الذيل المعالج ، والتعامل مع 3D والتعامل مع الفئران النفق بعد 15 دقيقة من جلسة معالجة قصيرة ومستويات الكورتيكوستيرويد المختبرة.

لم يكن هناك أي تأثير عام للتعامل في الدراسة الأولى. في الدراسة الثانية، 3D التعامل مع انخفاض كبير في مستويات الكورتيكوستيرون بالمقارنة مع التعامل مع الذيل. واستنادا إلى الملاحظات التي تفيد بأن تقنيات المناولة في الفئران غير معترف بها على نطاق واسع من قبل المجتمع العلمي، وصفنا استخدام تقنية معالجة جديدة.

في كلتا الدراستين المقدمتين، قللت معالجة النفق والمناولة ثلاثية الأبعاد من محاولات الفئران للفرار عند التقاطها، مما قد يسهل المناولة الروتينية. بالإضافة إلى ذلك ، في الفئران الذكور الأكبر سنا ، خفضت هذه التقنية السلوكيات الشبيهة بالقلق وزيادة التفاعل مع المجرب. في الإناث الشابات.

هذه التقنية انخفاض مستويات الكورتيكوستيرون لوحظ استجابة للتعامل. ويمكن لتنفيذ هذه التقنية أن يقلل من تقلب البيانات، ويحسن رفاه الحيوان، ويسهل المناولة الروتينية.