Nuclear Migration in the <em>Drosophila</em> Oocyte

Ma&#235;lys Loh; Antoine Guichet; Fred Bernard

doi:10.3791/62688

الهجرة النووية في كريات الدم البيضاء Drosophila

JoVE Journal
Developmental Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Developmental Biology

Nuclear Migration in the Drosophila Oocyte

الهجرة النووية في كريات الدم البيضاء Drosophila

Full Text

4,551 Views

04:17 min

May 13, 2021

DOI: 10.3791/62688-v

Maëlys Loh¹, Antoine Guichet¹, Fred Bernard¹

¹Université de Paris, CNRS, Institut Jacques Monod

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

في Drosophila، تخضع نواة البويضات لهجرة تعتمد على الميكروتبول أثناء تكوين الخلايا. هنا، ونحن نصف البروتوكول الذي تم تطويره لمتابعة الهجرة من خلال إجراء التصوير الحي على غرف البيض السابق فيفو. يحافظ إجراءنا على غرف البيض على قيد الحياة لمدة 12 ساعة للحصول على أفلام متعددة المواقع ثلاثية الأبعاد بفاصل زمني باستخدام المجهر confocal القرص الغزل.

هذه التقنية تجعل من الممكن مراقبة العمليات البيولوجية الطويلة في غرف بيض دروسوفيلا المتشرذم ، مثل الهجرة النووية البويضات ، باستخدام المجهر التصوير الحي. يصف هذا البروتوكول كيفية الحفاظ على غرف البيض المتشريح على قيد الحياة لمدة 12 ساعة لإجراء المجهر التصوير الحي. للبدء، ماصة 200 ميكرولتر من شنايدر المتوسطة وتكملة مع 30 ميكرولتر من 10 ملليغرام لكل ملليلتر الأنسولين، ثم إضافة أربعة ميكرولترات من الحرارة المعطل مصل العجل الجنين.

استخدام طرف ماصة لتطبيق كمية صغيرة من الشحوم السيليكون في جميع أنحاء حفرة على الجانب السفلي من الشريحة ثقب. ضع غطاء، واستخدم الطرف العريض من طرف ماصة للضغط على غطاء الغطاء لتسطيح شحوم السيليكون لإنشاء حلقة سيليكون داخلية على الشريحة. نقل الذباب الأنثوي المخدر إلى بئر التشريح الذي يحتوي على 150 ميكرولتر من وسيط التصوير.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos