تحليل ^{الكم 31}P NMR من التينين والعفص

³¹ P NMR هو أداة قوية لتوضيح الهيكلية من البوليفينول. هذا الإجراء التحليلي السريع والسهل والدقيق والكمي والعالي التكاثر ، الذي يسمح بالتحديد الكمي والتمايز لمختلف أنواع المجموعات الهيدروكسية والفينولية والكاربوكسيليك في الليجين والعفص أصبح الآن أداة تحليلية روتينية.

يمثل الفوسفور الكمي NMR واحدة من أهم الاختراقات في الكيمياء التحليلية اللجنين والتانين خلال العقود الثلاثة الماضية. تقدم هذه التقنية معلومات سريعة وموثوقة وكمية لمختلف مجموعة الهيدروكسي في العينة. هذه الأساليب NMR لها قيمة هائلة في فهم هيكل lignans والعفص.

كما تم تطبيقه على مجموعة متنوعة من النظم الأخرى التي لديها مجموعات هيدروكسيل تفاعلية. تبدأ قبل علاج 100 ملليغرام من عينة اللجنين أو التانين عن طريق التجفيف بين عشية وضحاها في فرن فراغ في 40 درجة مئوية. بعد التجفيف، نقل العينة بسرعة إلى مزيل كبريتات الكالسيوم اللامائية حتى تصل إلى درجة حرارة الغرفة.

لإعداد العينة للمنظار NMR، تزن بدقة حوالي 30 ملليغرام من العينة في قارورة ملليلتر اثنين مجهزة شريط اثارة. بعد ذلك، أضف 500 ميكرولتر من محلول المذيبات الطازج إلى قارورة العينة وختم القارورة بغطاء. باستخدام ميكروباينيت، إضافة 100 ميكرولتر من الحل القياسي الداخلي لقارورة العينة، ثم تحريك مغناطيسيا التشتت الناتج في 500 دوران في الدقيقة الواحدة.

عندما تذوب العينة تماما، نقل 100 ميكرولتر من رباعي ميثيل ديوكسيفوسفولان أو TMDP إلى حل العينة أثناء العمل تحت غطاء محرك السيارة وختم حل العينة قبل وضع العينة لتحريك المغناطيسي قوية. عند هذه النقطة، يحدث رد الفعل المشار إليه على عينات اللجنين والتانين. باستخدام ماصة باستور، نقل حل العينة إلى أنبوب NMR للتحليل.

إذا لوحظ ترسب أصفر في العينة، كرر الإجراء عن طريق ضمان تجنب جميع تلوث الرطوبة المحتمل. تحميل أنبوب عينة في أداة NMR مجهزة مسبار واسع النطاق وتعيين المعلمات التجريبية. باستخدام تردد الرنين من الكلوروفورم deuterated، تعيين التردد في مطياف.

شيم العينة وضبط مطياف قبل البدء في الاستحواذ. ابدأ بمعالجة البيانات الأولية من التحليل الطيفي P31 NMR من خلال إجراء تحويل فورييه. ضبط مرحلة تلو أخرى تصحيح المرحلة اليدوية عن طريق توسيع علامة التبويب معالجة وتحديد تصحيح المرحلة والتصحيح اليدوي.

قم بتصحيح الأساس يدويا عن طريق تعيين النقاط الصفرية بعناية بعد النقر فوق معالجة وتحديد خط الأساس وتصحيح الأساس متعدد النقاط. لمعايرة الإشارة، قم بتعيين الإشارة للمياه الفوسفورية بقيمة التحول الكيميائية التي تبلغ 132.2 جزء في المليون عن طريق فتح علامة التبويب التحليل، ثم حدد المرجع في علامة التبويب المرجعية. لدمج الإشارة، افتح جزءا لا يتجزأ من قائمة التحليل.

لتطبيع التكامل، قم بتعيين المعيار الداخلي إلى 1.0 بالنقر على الذروة لتحديد تحرير التكامل وإدخال القيمة 1.00 في علامة التبويب العادية، ثم قم بإجراء تكامل الطيف وفقا للتحولات الكيميائية المبلغ عنها في المخطوطة. استخدم المعادلة لحساب تركيز الأضراس للمعيار الداخلي، أو IS، واستخدم القيمة المحسوبة لتقدير الكمية المكافئة للإشارة المحددة لكل غرام من العينة. تم تسجيل قياس الطيف لمجموعات هيدروكسي مختلفة في ليجنين حرفة الخشب اللين المستمدة من TMDP باستخدام 300 ميغاهيرتز و 700 مطياف NMR ميغاهيرتز.

وفي أطياف الرنين المغناطيسي النووي، تم الكشف عن قمم حادة وقوية عند 144 و132 PPM بسبب المعيار الداخلي والهيدروكسيليشن TMD على التوالي. وكانت الإشارات المختلفة لمجموعات الهيدروكسي واضحة في جميع أطياف P31 NMR الكمية من الليغنينز. في الطيف الكمي P31 NMR من عينة تانين المستمدة باستخدام TMDP، كانت إشارة مميزة من وحدات مختلفة من اليفوغالي OH بيروغالول والكاتيكول مرئية بشكل جيد.

وسجلت المقارنة بين الطيف NMR من اللجنين قبل وبعد الأكسدة باستخدام مطياف NMR 300 ميغاهيرتز تبين انخفاض في كثافة قمم مجموعات الهيدروكسي. والخطوات الحاسمة هي تلك المتعلقة بتجفيف العينة وترجيمها، ومعلمات المعالجة بالرنين المغناطيسي التي ستستخدم. والأهم من ذلك ، على مراحل من الأطياف التي تم الحصول عليها.

عندما يقترن هذا الأسلوب مع NMR ثنائي الأبعاد والكروماتوغرافيا تتغلغل هلام، قد تظهر صورة مفصلة جدا من البوليفينول الطبيعية، وتقديم معلومات هيكلية لم يسبق لها مثيل ورؤى جديدة.