تطوير عملية إنتاج وتنقية الفيروسات المرتبطة أدينو (AAV)2 ناقلات باستخدام نظام زراعة خلايا فيروس الحشرات Baculovirus

9.9K مشاهدة

استشهد بها 4

10:31 دقيقة

يناير 13, 2022

10.3791/62829-v

يناير 13, 2022

9.9K مشاهدة

Md Nasimuzzaman¹^,² , Sophia Villaveces¹ , Johannes C. M. van der Loo¹^,²^,³ , Sivani Alla¹

¹Division of Experimental Hematology and Cancer Biology, Cincinnati Children's Hospital Medical Center, ²University of Cincinnati College of Medicine, ³Raymond G. Perelman Center for Cellular and Molecular Therapeutics, The Children's Hospital of Philadelphia

في هذا البروتوكول ، يتم إنتاج ناقل AAV2 عن طريق زراعة خلايا الحشرات Spodoptera frugiperda (Sf9) مع فيروس الكولو (BV) - AAV2 - بروتين الفلورسنت الأخضر (GFP) أو الجين العلاجي وBV-AAV2-rep-cap المصابة خلايا Sf9 في ثقافة التعليق. يتم تحرير جزيئات AAV من الخلايا باستخدام المنظفات ، وتوضيحها ، وتنقيتها عن طريق الكروماتوغرافيا عمود تقارب ، وتتركز عن طريق ترشيح تدفق عرضي.