في فيفو طرق لتقييم خلية العقدة الشبكية ووظيفة العصب البصري وهيكل في الحيوانات الكبيرة

مرحبًا بالجميع. هذا ييكوي زانغ من مستشفى ونتشو للعيون العصب العلوي يفتقر إلى إكسون من خلايا العقدة orexin، ومن ثم نقل الإشارة البصرية إلى الدماغ.

نموذج أكبر من إصابة العصب العلوي ضرورية لترجمة العلاج الجديد من نموذج الروبوت إلى تطبيق الليمفاوية. هنا، ونحن نصف بعض في أساليب الجسم الحي لتقييم هيكل ووظيفة خلايا العقدة orexin في العصب العلوي في الحيوانات الكبيرة. من خلال تقديم هذه الطريقة خطوة بخطوة، نأمل في زيادة الإعاقات الإنجابية التجريبية وتسهيل استخدام نماذج أكبر من العصاب البصري.

حلق مع شفرة الحلاقة الإلكترونية. و، الإعدادية مع الكحول 70٪ثلاث مرات، لتنظيف الجلد وفضح الوريد تحت الجلد. إدراج الخروع الوريدي المحيطي عن طريق الوريد.

ثم بالتنقيط الأتروبين والبروبوفول. Intubate الماعز مع أنبوب القصبة الهوائية ستة ملليمتر والاتصال بجهاز تنفس اصطناعي. تم الحفاظ على التخدير مع 3.5٪ isoflurane في الأكسجين بمعدل تدفق ثابت اثنين لتر المدارة.

ضع مستشعر درجة الحرارة تحت لسان الماعز. قص تشبع الأكسجين يشق إلى نهاية قريبة من أذن الماعز. ربط الكفة ضغط الدم إلى قاعدة الفخذ.

المشبك ECG يشق على الأطراف في النظام. ثم، يمكننا مراقبة المؤشرات الحيوية للماعز. حلق الشعر وتطهير الجلد مع بيتادين والكحول 70٪ ثلاث مرات في وسط العظام الأمامية.

افتح كيس التعقيم الذي يحتوي على مقص والأظافر. جعل شقوق الجلد لفضح الجمجمة مع مقص. مسامير الصلب لزرعها في وسط العظام الأمامية.

حلق الشعر وتطهير الجلد مع بيتادين والكحول 70٪ ثلاث مرات في نقطة وسطى من أذنين في عظم القذالي. جعل شقوق الجلد. مسامير الصلب لزرعها في النقطة الوسطى من أذنين في عظم القذالي.

يتم إدخال قطب الإبرة الأرضية تحت الجلد تحت المسمار الجمجمة الأمامية. يتم توصيل القطب النشط والقطب المرجعي بمسامير أمامية وقذالية على التوالي مع مقاطع التمساح للحد من العجز الكهربائي. رقعة عين واحدة.

تطبيق موضعي قطرات العين التخدير على سطح العين. يتم توسيع التلاميذ على كلا الجانبين عن طريق قطرات العين النخر. ضع رأس الماعز في محفز مملوء بالغاز يهدف إلى ضوء النتوء.

ضع البطانية السوداء فوق المحفز ورأس الماعز لمدة خمس دقائق التكيف. يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. تحقق من العجز الجنسي الاتصال الأنسجة القطب.

تأكد من أن العجز الجنسي أقل من 10 كيلومترات لكل لتجنب التداخل الكهرومغناطيسي من الأجهزة الكهربائية الأخرى في نفس الغرفة. تحقق من الضوضاء الأساسية دون تحفيز الضوء. بدء تسجيل FVEP.

لاحظ أن تسجيل FVEP في كل كثافة الضوء يتم تنفيذ مرتين. لاحظ أن ترطب القرنية مع المسيل للدموع الاصطناعية إذا كان يبدو الجافة. كرر عن خطوات للعين الكونترالاتال.

بدء تسجيل FVEP في كثافة الضوء المختلفة على التوالي. لكل تسجيل، يتم متوسط 64 آثار لتسفر عن شكل موجة واحدة. تم تعيين أول ذروة إيجابية ونشطة في شكل موجة FVEP ك P1 و N1. يتم وضع القطب الأرضي المعقم في شحمة الأذن.

يتم إدخال الأقطاب الكهربائية النشطة والمرجعية المعقمة تحت الجلد على طول الخط الوسطي والعظام الأمامية والعظم القذالي على التوالي. يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. رقعة عين واحدة.

تسجيل استجابات VEP نمط العين الأخرى في ترددات مكانية مختلفة على التوالي. الاتصال بالقطب الأرضي مع مقطع التمساح. يتم وضع اثنين من الأقطاب المرجعية إبرة معقمة تحت الجلد سنتيمتر واحد وراء canthus الجانبية على كلا الجانبين.

يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. يتم توسيط اثنين من أقطاب تسجيل ERG المطهرة على حد سواء القرنية بعد التطبيق الموضعي للتمزق الاصطناعي. يتم وضع اثنين من المحفزات أمام كل عين مع مسافة مشاهدة 50 سم.

تأكد من أن العجز الجنسي أقل من 10 كيلومترات. تتبع الضوضاء الأساسية دون تحفيز الضوء. صوب الضوء النتوئ.

بدء نمط تسجيل ERG من كلتا العينين في وقت واحد على ترددات مكانية مختلفة على التوالي. وأخيرا، عودة الشاشة لتسجيل نمط ERG دون المحفزات البصرية والتحكم النشط. تم تعيين مرشح ممر النطاق لتتراوح من 1 إلى 75 هيرتز لثلاثة CPD نمط ERG.

مرشح ممر باند من 1 إلى 50 هيرتز لتنعيم الشكل دون التأثير على اتساعه. يتم تعيين القمم الإيجابية والنشطة الأولى في شكل موجة P1 و N1. نمط ERG السعة تقاس من N1 إلى P1.To الحد من العجز الكهربائي، يتم وضع مرجع إبرة معقمة تحت الجلد الأمامي. ويتم وضع قطب مرجعي إبرة معقمة تحت الجلد سنتيمتر واحد وراء canthus الجانبية على جانب واحد.

يتم وضع قطب تسجيل ERG مطهر على القرنية على تطبيق موضعي للتمزق الاصطناعي. رقعة عين واحدة. يتم وضع شاشة عرض على مسافة عرض 50 سنتيمترا.

يتم استخدام منظار الجفن لفضح تلميذه بالكامل. ثم، يتم وضع الماعز على بقية الذقن. محاذاة الماعز مع الكاميرا لإرسال رأسه العصب البصري في صورة فحص الليزر confocal ophthalmoscopy عن طريق تعديل موقفها الرأس.

انقر فوق زر البدء لإدخال مرحلة نهاية الكشف. انتظر حتى ينتهي الجهاز من التحميل. اضغط على زر البدء الأصفر لبدء التصوير الرسمي.

ضبط عصا التحكم لإلقاء الضوء بالتساوي على صورة الأشعة تحت الحمراء لتحسين جودة الصورة. مرر الكاميرا للأمام حتى تظهر صورة OCT الشبكية المستقيمة على الشاشة اليمنى العليا. تعديل عصا التحكم أن يكون الرقص بالتساوي في صورة أكتوبر الشبكية الأفقي.

اضغط على الزر الموجود على عصا التحكم لالتقاط صورتك تلقائيا. أمسك عصا التحكم هذه للحفاظ على جودة الصورة على شاشة الصورة المباشرة حتى يتم الانتهاء من تنفيذ الصورة. ثم اضغط على اكتساب.

حدد صورة أولية عالية الجودة. انقر بزر الماوس الأيمن وحدد تعيين مرجع. اضغط على زر المتابعة للسماح للبرنامج بمضاهاة المسح الضوئي الحالي تلقائيا بالمسح الأساسي.

مرة واحدة مطابقة، الضغط على الزر على عصا التحكم لتنشيط التلقائي تتبع الوقت الحقيقي. انقر فوق زر القياس لإدخال منصة القياس. اختر الممحاة أداة ومسح خط RFL، الذي يتم تصنيفه تلقائيا بواسطة الجهاز.

اختر أداة رسم الخط لتحديد الحدود بين IPL و INL يدويا. بين الخطين الأحمر والأزرق هو مجمع دول مجلس التعاون الخليجي. يتم إجراء التصوير المعدل الشبكية في المكاك ريسوس باستخدام نفس المعدات والإجراءات مثل تلك المستخدمة في الماعز.

الشكل A يظهر ممثل FVEP في الماعز. يظهر الشكل B نموذج موجة ERG التمثيلية في الماعز. يظهر الشكل C نمط تمثيلي FVEP في المكاك ريسوس.

ويظهر الشكل D نموذج موجة ERG التمثيلية في المكاك ريسوس. يظهر الشكل الثاني صور أكتوبر الشبكية التمثيلية حول رأس العصب البصري وسماكة مجمع دول مجلس التعاون الخليجي في المناطق الطرفية المختلفة في الماعز والمكاك ريسوس. يلعب النموذج الحيواني الكبير دورا مهما في الأبحاث التحويلية.

وفي كثير من الحالات، فشلت الآثار العلاجية الواعدة في النماذج الحيوانية الصغيرة في ترجمتها إلى المرضى البشر. في هذه الدراسة، قدمنا بروتوكول الفيديو من FVEP، PERG، وأكتوبر في الماعز والمكاك ريسوس. يمكن تطبيق هذا في طريقة الجسم الحي في نموذج أكبر من مختلف العصاب البصري، مثل الجلوكوما الإقفارية أو الاعتلال العصبي البصري الرضي والتهاب العصب البصري.