-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

AR

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ar

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
قياس تدفق الركيزة الميتوكوندريا في الخلايا المتالفة Perfringolysin O-Permeabilized
قياس تدفق الركيزة الميتوكوندريا في الخلايا المتالفة Perfringolysin O-Permeabilized
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Measuring Mitochondrial Substrate Flux in Recombinant Perfringolysin O-Permeabilized Cells

قياس تدفق الركيزة الميتوكوندريا في الخلايا المتالفة Perfringolysin O-Permeabilized

Full Text
2,824 Views
06:17 min
August 13, 2021

DOI: 10.3791/62902-v

Moustafa Elkalaf1,2, Karolína Vaněčková1,2, Pavla Staňková1, Zuzana Červinková1, Jan Polák*2,3, Otto Kučera*1

1Department of Physiology, Faculty of Medicine in Hradec Králové,Charles University, 2Department of Pathophysiology, Third Faculty of Medicine,Charles University, 3Department of Internal Medicine,University Hospital Kralovske Vinohrady

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a modified protocol for assessing mitochondrial respiratory substrate flux using recombinant perfringolysin O in conjunction with microplate-based respirometry. The research highlights the impact of metformin on mitochondrial respiration across two distinct tumor cell lines, A549 and Hep G2.

Key Study Components

Research Area

  • Mitochondrial metabolism
  • Cellular response to pharmacological treatments
  • Oncology and cancer research

Background

  • The importance of mitochondrial function in various pathologies
  • How drugs like metformin influence cancer cell metabolism
  • Previous methods to assess mitochondrial respiration

Methods Used

  • Microplate-based respirometry
  • A549 and Hep G2 tumor cell lines
  • Recombinant perfringolysin O for permeabilization

Main Results

  • Metformin treatment increased succinate-induced respiration in A549 cells compared to Hep G2 cells.
  • Similar enhancements observed in pyruvate malate and glutamate malate induced respiration.
  • The findings validate the potential of utilizing mitochondrial respiration assays to explore drug impacts in cancer research.

Conclusions

  • The study demonstrates a novel method for evaluating drug effects on mitochondrial function in cancer cells.
  • This could facilitate further research into metabolic targeting in oncology.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using microplate respirometry?
Microplate respirometry allows for high-throughput screening, requiring minimal samples while providing reliable data on mitochondrial function.
How does metformin affect mitochondrial respiration?
Metformin alters mitochondrial respiration, which can reveal important insights into the metabolic adaptation of cancer cells.
What cell lines were used in this study?
A549 and Hep G2 tumor cell lines were analyzed for their mitochondrial respiration responses to metformin treatment.
Why is recombinant perfringolysin O important in this protocol?
Recombinant perfringolysin O is used to permeabilize cell membranes, facilitating the assessment of mitochondrial function without the interference of cellular metabolic processes.
What was a key finding regarding mitochondrial respiration between the two cell lines?
A549 cells exhibited a higher rate of mitochondrial respiration induced by succinate when compared to Hep G2 cells.
Can this method be applied to other types of cancer research?
Yes, this method is versatile and can be adapted to study various cancer types and other conditions affecting mitochondrial metabolism.
How is the assay prepared before measurement?
The assay involves cell seeding, treatment with substrates, and calibration of the respirometry analyzer to ensure accurate results.

في هذا العمل، ونحن نصف بروتوكول معدل لاختبار تدفق الركيزة التنفسية الميتوكوندريا باستخدام perfringolysin O المؤتلف في تركيبة مع قياس التنفس القائم على الصفائح الدقيقة. مع هذا البروتوكول، نظهر كيف يؤثر الميتفورمين على تنفس الميتوكوندريا لخطين مختلفين للخلايا السرطانية.

لأنه يختبر تدفق الركيزة الميتوكوندريا التي يمكن أن تتأثر مع أمراض مختلفة أو العلاجات. على سبيل المثال، اليوم سوف نستخدمها للكشف عن استجابة الخلايا السرطانية لعلاج الميتفورمين. فإنه يتطلب الحد الأدنى من عدد الخلايا في حين وجود تكرارات كافية والسيطرة المناسبة لكل مادة متميزة.

محلل هو للاستخدام البحثي فقط. هذه التقنية يمكن تحديد الأخطاء في التمثيل الغذائي الميتوكوندريا ويمكن استخدامها لتقييم المحاربين المخدرات التي تؤثر على الميتوكوندريا. إثبات الإجراء سيكون كارولينا Vaneckova طالب جامعي وفني البحوث من مختبري.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

علم الأحياء العدد 174 قياس التنفس المجهري الميتوكوندريا الميتفورمين الخلايا permeabilized perfringolysin O ركائز الميتوكوندريا

Related Videos

متعدد المعلمة قياس نفاذية المسام افتتاح المرحلة الانتقالية في القلب ماوس متفرقة الميتوكوندريا

13:42

متعدد المعلمة قياس نفاذية المسام افتتاح المرحلة الانتقالية في القلب ماوس متفرقة الميتوكوندريا

Related Videos

22.1K Views

عن طريق عزل الميتوكوندريا من كميات الحد الأدنى من الفأر العضلات الهيكلية لارتفاع صفيحة ميكروسكوبية الإنتاجية قياسات الجهاز التنفسي

10:39

عن طريق عزل الميتوكوندريا من كميات الحد الأدنى من الفأر العضلات الهيكلية لارتفاع صفيحة ميكروسكوبية الإنتاجية قياسات الجهاز التنفسي

Related Videos

14.3K Views

عالية الدقة قياس التنفس لتقييم وظيفة الميتوكوندريا في Permeabilized وخلايا سليمة

08:33

عالية الدقة قياس التنفس لتقييم وظيفة الميتوكوندريا في Permeabilized وخلايا سليمة

Related Videos

42.8K Views

قياس استهلاك الأوكسجين المتقدرية في ألياف بيرميبيليزيد من المورفولوجية استخدام كميات ضئيلة من الأنسجة

14:55

قياس استهلاك الأوكسجين المتقدرية في ألياف بيرميبيليزيد من المورفولوجية استخدام كميات ضئيلة من الأنسجة

Related Videos

12.4K Views

تقييم وظيفة الميتوكوندريا في العصب الوركي عن طريق قياس التنفس عالي الدقة

08:19

تقييم وظيفة الميتوكوندريا في العصب الوركي عن طريق قياس التنفس عالي الدقة

Related Videos

2.9K Views

القياس في الوقت الحقيقي لملف الطاقة الحيوية للميتوكوندريا للعدلات

09:39

القياس في الوقت الحقيقي لملف الطاقة الحيوية للميتوكوندريا للعدلات

Related Videos

2.6K Views

المقايسات المستقلة عن الأكسجين لقياس وظيفة الميتوكوندريا في الثدييات

05:59

المقايسات المستقلة عن الأكسجين لقياس وظيفة الميتوكوندريا في الثدييات

Related Videos

3.5K Views

قياس تنفس الميتوكوندريا في ألياف العضلات الهيكلية للإنسان والفأر عن طريق قياس التنفس عالي الدقة

08:12

قياس تنفس الميتوكوندريا في ألياف العضلات الهيكلية للإنسان والفأر عن طريق قياس التنفس عالي الدقة

Related Videos

2.3K Views

قياس الفلورة عالي الدقة لتقييم التغيرات الديناميكية في إمكانات غشاء الميتوكوندريا في الخلايا المناعية البشرية

07:18

قياس الفلورة عالي الدقة لتقييم التغيرات الديناميكية في إمكانات غشاء الميتوكوندريا في الخلايا المناعية البشرية

Related Videos

1.7K Views

قياس تدفق الركيزة الميتوكوندريا في الخلايا المتالفة Perfringolysin O-Permeabilized

06:17

قياس تدفق الركيزة الميتوكوندريا في الخلايا المتالفة Perfringolysin O-Permeabilized

Related Videos

2 Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code