DUCT: الصب الراتنج المزدوج تليها التصوير المقطعي المحوسبة الدقيقة لتحليل الكبد 3D

تسمح لنا هذه الطريقة بتحليل تصور وقياس بنية أنظمة الأوعية الدموية والبيليارية في الكبد ثلاثي الأبعاد. يمكننا الآن فهم أفضل للجوانب المكانية لأمراض الكبد والتجديد. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها لا تعتمد على وجود أجسام مضادة أو تصوير مضان.

كما يسمح بالتصور المباشر للشبكات التي يتم تجويفها بشكل صحيح. هذه الطريقة مناسبة لتحليل الأنظمة الأنبوبية ، وبالتالي فإن أبحاث الأوعية الدموية والقنوات الصفراوية والشعب الهوائية هي مناطق مثالية. استخدمنا DUCT لفهم التغيرات الهيكلية المتعلقة بالتجديد الصفراوي.

قبل حقن الراتنج في النظام الصفراوي للفأر ، ابدأ في تحريك الأمعاء والبنكرياس إلى الجانب الأيسر من الماوس ، باستخدام مسحة قطنية مبللة ب PBS لفضح القناة الصفراوية الشائعة وعروق البوابة. ثم جعل شق عرضية صغيرة في الوريد الأجوف أدنى. الوجه الجانب البطني من الكبد نحو القلب لفضح السطح الحشوي ومنطقة مرح، وتحديد موقع القناة الصفراوية المشتركة التي تمتد من منطقة مرح عبر البنكرياس، وإلى الأمعاء في العضلة العاصرة من أودي.

استخدم ملقط مستقيم لمسح منطقة الأنسجة المحيطة بها من حوالي خمسة ملليمترات من القناة الصفراوية المشتركة. ثم، عن طريق وضع خيط خياطة الحرير تحت القناة الصفراوية المشتركة، ربط عقدة فضفاضة فوق حول القناة الصفراوية المشتركة. عقد مقص الربيع شقة ضد القناة الصفراوية المشتركة لجعل شق مائل إلى القناة الصفراوية المشتركة في المكان الذي تدخل القناة الصفراوية المشتركة البنكرياس والأمعاء بجوار العضلة العاصرة من أودي.

بعد ذلك، اخلطي ملليلتر واحد من الراتنج الأصفر مع 50 ميكرولتر من عامل المعالجة MV، واملأ حقنة لوير ملليلتر واحدة بخليط عامل معالجة الراتنج. ربط حقنة مليئة مع مجموعة أنابيب واحدة، واضغط على المكبس لملء الأنابيب حتى خليط وكيل علاج الراتنج يقطر من غيض من الأنابيب. استخدم ملقط لتقويم المنطقة المحيطة بشق القناة الصفراوية المشتركة.

قبل إدخال الأنابيب في الفتحة في القناة الصفراوية المشتركة مع أطول حافة من طرف مشطوف إلى أسفل نحو الجانب الظهري من القناة الصفراوية. ثم تشديد عقدة الخيط الحرير لتأمين الأنابيب داخل القناة الصفراوية المشتركة. بعد حقن الراتنج في القناة الصفراوية المشتركة ، لاحظ المرارة فصوص الكبد الفردية.

تدليك الكبد مع مسحة القطن PBS الرطب للمساعدة في نشر الراتنج على قدم المساواة. سوف تكون فروع محطة القنوات الصفراوية المملوءة بالراتنج مرئية بشكل ضعيف على سطح الكبد. توقف عن حقن الراتنج عندما تظهر نقاط الراتنج على سطح الكبد أو عندما يتم الوفاء بالمقاومة.

ثم إزالة الأنابيب عن طريق الانسحاب من القناة الصفراوية المشتركة وتشديد بسرعة عقدة الحرير باستخدام ملقط لمنع الراتنج من التسرب. قطع نهايات فضفاضة من خياطة الحرير، حتى أنها لا تتداخل مع حقن الوريد البوابة. قبل حقن الراتنج في الوريد المدخلي، قم بمسح الوريد البوابي من الأنسجة المحيطة به حوالي سنتيمترين من دخوله إلى الكبد، باستخدام ملقط مستقيم.

ثم ضع الخيط خياطة الحرير تحت منطقة تطهير الوريد البوابة لربط عقدة فضفاضة overhand. في الوريد المدخلي البعيدة إلى الكبد، وجعل شق طولي قبل ربط العقدة. بعد ذلك، قم بإعداد خليط عامل معالجة الراتنج الأخضر في الحقنة وملء الأنابيب بالخليط كما هو موضح سابقا.

استخدم ملقط لتقويم الوريد المدخلي عن طريق سحب الأنسجة المحيطة نحو جانب الذيل قبل إدخال الأنابيب بأطول حافة من الطرف المفلح نحو الجانب الظهري للوعاء. شد الخيط الحريري لتأمين الأنابيب في الوريد المدخل. بعد حقن الراتنج في الوريد البوابة، ومراقبة الأوعية الدموية ملء مع الراتنج، وتدليك الكبد مع مسحة القطن PBS الرطب للمساعدة في نشر الراتنج.

عندما يتم تعبئة جميع الأوعية الدموية، وسحب الأنابيب من الوريد البوابة، وتشديد بسرعة عقدة الحرير باستخدام ملقط لمنع الراتنج من التسرب. بالنسبة للتصوير المقطعي المحوسب الدقيق أو مسح MicroCT للكبد المفرغ من الماوس ، ضع فص الكبد الوسطي الأيمن في أنبوب مخروطي 15 ملليلتر ، وملء الأنبوب بهلام agarose بنسبة 1٪ إلى ما يقرب من ثلث الحجم الإجمالي للأنبوب لتقليل حركة العينة غير المرغوب فيها أثناء قياس MicroCT. قم بتركيب الأنبوب المخروطي 15 ملليلتر مع العينة في مرحلة الدوران لجهاز CT.

السماح للأنبوب بالتكيف حراريا مع غرفة القياس لمدة ساعة واحدة على الأقل. عندما يتم تكييفها حراريا العينة، مركز في مجال الرؤية أو FOV، ثم تحسين العينة المصدر ومسافات كاشف العينة، أو SSD وSDD للوصول إلى دقة voxel كافية. بمجرد تعيين المعلمات، ابدأ قياس CT.

استخدم برنامج مخصص لإعادة البناء المقطعي لإعادة بناء بيانات التصوير المقطعي. لتحليل بيانات CT تحميل الملفات عن طريق تحديد الملف والاستيراد والأمر. استخدم وظيفة تحديد السطح على اللوحة العلوية لتقسيم الراتنج في البيانات باستخدام العتبات العالمية.

في إطار الحوار، حدد قيمة العتبة مع تقييم الرسم البياني عن طريق تعيين موضع خط النظائر الأحمر لتقسيم السفن المملوءة بالراتنج فقط. على اللوحة اليسرى، حدد الوحدة النمطية إنشاء عائد الاستثمار من حجم أو CAD أو شبكة لإنشاء منطقة اهتمام أو عائد الاستثمار من السفن المليئة الراتنج. في إطار الحوار، استخدم الخيار إنشاء ROIs من الصلبة لتحديد وتأكيد اسم وحدة التخزين المعالجة.

القضاء على تجزئة خاطئة من مجموعات الضوضاء في المنطقة الخلفية من هذا العائد على الاستثمار. ضع علامة على عائد الاستثمار على اللوحة اليمنى بالنقر بزر الماوس الأيمن وتحديد عائد الاستثمار المقسم للوحدة النمطية. في إطار الحوار، قم بتعيين المعلمة voxel الحد الأدنى لحجم لاستبعاد جميع جزيئات الضوضاء.

قيمة المعلمة هي التجربة والبيانات التابعة، والأمثل لكل عينة لتحليلها. على اللوحة اليسرى استخدام وحدة تنعيم لخلق سلس ومستمر وصلب أقنعة القناة دون التحف، مثل وجود فقاعات الهواء أو تسرب الراتنج في تكلفة الراتنج عائد الاستثمار. إنشاء عائد استثمار منفصل كما هو موضح من قبل للنظام مليئة الراتنج أكثر absorptive مثل الراتنج الأصفر المستخدمة لحقن القناة الصفراوية المشتركة مع قيم كثافة أعلى في البيانات CT.

علامة والراتنج قناع عائد الاستثمار الجديد عن طريق النقر بزر الماوس الأيمن قبل تحديد طرح ROIs، ومن ثم طرح عائد الاستثمار الجديد من ROI قناع الراتنج لإنشاء عائد استثمار جديد للنظام أنبوبي المتبقية. تصدير ROIs الناتجة عن كلا النظامين أنبوبي في أشكال مختلفة استنادا إلى المراجع المشغل للمعالجة اللاحقة في برامج مختلفة. مزيد من معالجة ROIs الناتجة في برنامج رسومات وحدة التخزين لتصدير التصور النهائي في شكل صورة أو فيديو.

في هذه الدراسة، تم تحقيق حقنة ناجحة مزدوجة الراتنج مع القنوات الصفراوية داخل الهيباتية مملوءة جيدا، وبوابة الوريد الأوعية الدموية. يوضح التحليل التمثيلي نتيجة البيانات المجزأة من كبد تم حقنه جيدا لفأر P15 ، وفأر بالغ حيث يكون الراتنج مرئيا في الفروع الجانبية. في المثال النموذجي للحقن غير الناجح ، أدى الضرر البدني للكبد أثناء العملية الجراحية إلى تسرب الراتنج.

أيضا تصلب سابق لأوانه من الراتنج في الإبرة أو غيض من الأنابيب قبل الحقن، وعدم كفاية التشوه عبر القلب تسبب النظام تحت ملء. ويمكن تصحيح التسرب الطفيف للراتنج يدويا أثناء تجزئة بيانات MicroCT. يمكن أن يؤدي ارتفاع ضغط الحقن إلى تمزق الأوعية أو القنوات ، وإلحاق ضرر لا رجعة فيه ببنية الأوعية أو القناة.

بالإضافة إلى ذلك ، كانت الفقاعات قطعة أثرية حقن شائعة جدا أخرى أدت إلى ملء متناثرة من الشبكات الأنبوبية. عند استخدام الراتنج الطازج، لوحظ اختلاف واضح في التباين بين القنوات الصفراء التي تحقن بالراتنج والأوردة البوابية الخضراء التي تحقنها الراتنج. بعد ثلاثة أشهر من التخزين ، كان التباين كافيا لتمييز الوريد البوابي عن القناة الصفراوية.

ومع ذلك ، فإن هطول الأمطار أثرت خلط الراتنجات اثنين ، والتي كانت مرئية باعتبارها التعتيم غير متجانسة في الوريد بوابة مليئة. عندما كان الراتنج أقدم من ستة أشهر ، تدهور التباين إلى درجة أنه لم يكن من الممكن التمييز بين القناة الصفراء المحقونة من الوريد البوابي الذي يتم حقنه باللون الأخضر ، استنادا إلى تباينها وحده. من المهم إجراء شق مائل في القناة الصفراوية الشائعة.

وإلا سيكون من الصعب جدا إدراج الأنابيب. تقنية DUCT تنير آليات معمارية جديدة للتجديد الصفراوي في نموذج ذي صلة سريريا مع ميزات متميزة في مناطق الفص الهلالي والمحيطي.