إعداد عينة للتصور ثلاثي الأبعاد القائم على التصوير المقطعي المحوسب لأوعية الأطراف الخلفية الفئرانية

هنا ، نصف طريقة التصور والقياس الكمي لأوعية الأطراف الخلفية الفئرانية باستخدام التصوير المقطعي المحوسب بالأشعة السينية الدقيقة.

من الممكن التقاط صور بالأشعة المقطعية للأوعية الدموية في الأطراف السفلية وأعضاء البطن باستخدام بروتوكول الخطوة. تمكن هذه الطريقة من تقييم الأوعية الدموية بأكملها بشكل شامل. بالإضافة إلى ذلك ، من الممكن تقييم الشرايين فقط أو في نفس الوقت الشرايين والأوردة.

من المهم جدا منع تجلط الدم أو تسربه أو الدم بشكل جيد ، وتجنب فقاعات الهواء. قبل العملية ، حقن 1 وحدة / غرام الهيبارين في PBS في تجويف الصفاق من الماوس. بعد 30 دقيقة ، قم بعمل شق خط الوسط في قص الفأر الرحيم وقم بإصلاح الصدر المفتوح بالدبابيس.

قطع الشريان الأورطي الصاعد قبل إزالة القلب ، ثم إزالة الرئة لفضح الشريان الأورطي الهابط. قطع الشريان الأورطي الهابط قطريا للكشف عن المقطع العرضي للسفينة. بعد ذلك، أدخل قسطرة قياس 22 في الشريان الأورطي الهابط أثناء تشغيل المخزن المؤقت لتوسيع الأوعية.

قم بتثبيت جذر القسطرة وقم بعمل عقدة لمنع التسرب بسبب التدفق العكسي. بمجرد الانتهاء من ذلك ، ابدأ التروية بمحلول موسع للأوعية الدموية دافئ عند ضغط ثابت يتراوح بين 13 إلى 15 كيلو باسكال. بعد ثلاث دقائق ، قم بدمج محلول 4٪ paraformaldehyde في PBS لمدة 3 دقائق.

أوقف التروية ، واملأ أنبوب التمديد المتصل بالقسطرة ب 2 مل من وسط التباين المحضر حديثا المخفف بنسبة 1: 1 إلى النفاذية عند 13 إلى 15 كيلو باسكال ثابت. لتصور الشرايين ، تحقق من ظفر الفم للتأكد من أن وسط التباين قد وصل إلى الشريان. بنفس الطريقة ، تحقق من الوريد الأجوف السفلي للحجاب الحاجز لتأكيد الدوران الكامل لوسط التباين وتصور جميع الأوعية.

إذا اكتمل دوران وسط التباين ، فأغلق الإيقاف الثلاثي الاتجاه وقم بإزالة الأنبوب. احتضان العينة بين عشية وضحاها عند 4 درجات مئوية. في هذا البروتوكول ، تم تصور جميع الأوعية في الأطراف السفلية للفأر.

أكدت نتائج نموذج نقص تروية الأطراف الخلفية أن الشريان الفخذي غير المربوط كان يعمل بالتوازي مع الوريد الفخذي. أيضا ، جعل الانقطاع في وسائط التباين من السهل رؤية الشريان الفخذي المربوط وتطوير الأوعية الجانبية. يمكن مشاهدة عدد قليل من السفن المملوءة بوسط التباين.

من ناحية أخرى ، لوحظ أيضا الاضطراب في وسائط التباين بسبب خلط الوسائط غير المتناقضة ، أو عدم كفاية التروية. كان من المستحيل رؤية الشرايين على سطح الجسم عن طريق المراقبة المجهرية المجهرية المجسمة لوسط التباين ، مما جعل من السهل تقييم العيوب في الأوعية الدموية. من المهم جدا تجنب فقاعات الهواء عند إدخال القسطرة.

نظرا لأن أعضاء البطن مسترخية أيضا ، فمن الممكن إخراج الأعضاء وإجراء فحص بالأشعة المقطعية. باستخدام هذه الطريقة ، تمكنا من تحديد ربع جديد من التشبع.