الحفاظ على الثقافات المختبرية ل Gryllus bimaculatus ، وهو نموذج Orthopteran متعدد الاستخدامات لزراعة الحشرات وفسيولوجيا اللافقاريات

تصور هذه التقنيات طرقا عملية ومثبتة لتربية Gryllus bimaculatus ، وهو نوع رئيسي من الماشية الصغيرة المستزرعة لتغذية الحيوانات والغذاء البشري وكائن حي بديل متزايد الأهمية. هذه الطرق المختبرية لزراعة Gryllus bimaculatus مستمدة من التقنيات الشائعة في جميع أنحاء صناعة زراعة الكريكيت في أمريكا الشمالية وتمثل فاكسا على نطاق المختبر لعمليات زراعة الكريكيت. للبدء ، قم بتعرية حاوية نظيفة على ميزان ، ووزن كتلة من جوز الهند الجاف بحجم قبضة بشرية تقريبا.

ثم ، ضع جوز الهند في حاوية نظيفة وقابلة للإغلاق ، والتي يمكن أن تستوعب توسعا يصل إلى ستة أضعاف الحجم الأصلي. بأيدي نظيفة ، قم بتفتيت كتل جوز الهند بلطف من القطعة التي تمت إزالتها من الكتلة الأكبر. بعد ذلك ، باستخدام أسطوانة متدرجة سعة 250 ملليلتر ، قم بقياس الحجم الصحيح للمياه منزوعة الأيونات لتحقيق نسبة خمسة إلى واحد من حيث الكتلة من خمسة أجزاء من الماء إلى جزء واحد من جوز الهند الجاف ، وأضف الماء منزوع الأيونات المقاس ببطء ، مع ترطيب جميع جزيئات جوز الهند بالتساوي.

بعد ذلك ، قم بنقع الكتل يدويا لضمان الترطيب المتساوي ، وإعادة تدوير الحاوية التي كان وزن جوز الهند فيها سابقا. وزن 75 غراما من جوز الهند المبلل ، ونقله إلى طبق بتري 100 ملم × 15 ملم باستخدام ملعقة بلاستيكية نظيفة لضمان توزيع جوز الهند بالتساوي حول قاع الطبق وعدم وجود كتل. بعد ذلك ، قم بتسمية جانب طبق بتري بشريط مختبر مع علامة تشير إلى مستعمرة الولادة وتاريخ حدث جمع البيض.

قم بقياس 45 ملليلتر إضافية من الماء منزوع الأيونات في أسطوانة متدرجة ، وأضف الماء بالتساوي على سطح جوز الهند المعبأ في طبق بتري لضمان ترطيب متساو. بمجرد تعبئة طبق بتري ، قم بإغلاق جوز الهند المبلل المتبقي في وعاء محكم الإغلاق للتخزين عند 20 درجة مئوية تحت الصفر. ضع ركيزة البيض المائية في أقفاص تحتوي على مخزون الوالدين المطلوب من الصراصير بعيدا عن العلف قدر الإمكان ، وقم بتوثيق التاريخ والوقت.

ثم ضع وعاء قمامة صغير قابل للتعقيم على سطح العمل. بعد ذلك ، ضع قفصا بلاستيكيا نظيفا وفارغا سعة 29.3 لترا على المقعد بجوار وعاء القمامة. ضع قفصا آخر سعة 29.3 لترا يحتوي على مخزون الكريكيت الأصلي وركيزة وضع البيض على الجانب الآخر من وعاء القمامة من القفص الفارغ.

بعد 24 ساعة ، قم بإزالة ركيزة وضع البيض من قفص الكريكيت الأصلي ، وحدد موقعه فوق وعاء نفايات قابل للتعقيم. افحص الجزء العلوي من ركيزة وضع البيض بحثا عن أي جزيئات من الفرس أو الأعلاف التي قد تكون الصراصير قد ركلتها على سطح جوز الهند. بعد ذلك ، قم بإزالة ملوثات جوز الهند في وعاء النفايات باستخدام Scoopula نظيفة أو ملعقة بلاستيكية ، وضع الملعقة البلاستيكية في وعاء النفايات.

ثم ، ضع ركيزة البيض النظيفة في القفص النظيف سعة 29.3 لتر. بعد ذلك ، ضع القفص في حاضنة تم ضبطها على 27 درجة مئوية عند رطوبة نسبية 60٪ في فترة ضوئية مظلمة لمدة 12 ساعة و 12 ساعة. أعد القفص الذي يحتوي على مخزون التربية إلى الموقع الأصلي ، وامسح جميع العناصر من سطح العمل.

ثم ضع وعاء النفايات في ثلاجة داخل المنشأة مخصصة لتخزين العناصر التي يحتمل أن تكون ملوثة ببيض الكريكيت. بعد ذلك ، قم بتعقيم سطح العمل بمحلول تبييض 10٪ ، واتركه لمدة 60 ثانية. امسح سطح العمل جافا بمنشفة ورقية نظيفة.

بعد فتح الفريزر ، تخلص من المنشفة الورقية في وعاء النفايات. اختر شقتين غير مستخدمتين بسعة 30.8 سم × 30.8 سم من قرمزي البيض التجاريين. وباستخدام سكين فائدة أو مقصات قوية ، قم بتقطيعها إلى ستة شرائح منفصلة بعرض 10.1 سم متساوية الحجم.

ثم ، قم بتنظيف الحواف المقطوعة باليدين لإزالة جزيئات الورق المقوى المتدلية. بعد ذلك ، ضع القطع الكرتونية الفردية الستة التي يبلغ طولها 10.1 سم × 30.8 سم عموديا في الجزء السفلي من القفص ، مع امتداد المحور الأطول للكرتون على المحور الأفقي الأضيق لقفص سعة 29.3 لتر. ضع قطعة سابعة من الكرتون بشكل مسطح على الجزء العلوي من القطع الست المستقيمة.

بعد اختيار ثلاث قطع من منشفة ورقية بنية خشنة حوالي 25 سم × 25 سم ، قم بطي كل منها إلى النصف. ثم ضع اثنين بحيث يغطيان الجزء العلوي من الجانب القريب من هيكل الكرتون ، وضعا واحدا فوق كومة الكرتون على الجانب البعيد. في اليوم 11 بعد وضع البيض ، حرك ركيزة وضع البيض إلى الزاوية اليمنى القريبة من القفص.

عندما يتم ملاحظة فتحة ، قم برش المناشف الورقية الموضوعة فوق الجزء العلوي من الكرتون ، حتى يتم ترطيبها ، ولكن لا تسفك الماء بنشاط. بعد ذلك ، امسح جانبي غطاء Petri مقاس 100 ملم جيدا باستخدام 70٪ من الإيثانول ، واتركه حتى يجف. بعد ذلك ، قم بمغرفة 50 جراما من العلف في خلاط 60 واط ، أحادي الخدمة ، وطحنه عند 10،000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة.

بعد قياس غرام واحد من العلف ، رجه على غطاء طبق بتري في القفص. باستخدام الطرف النظيف من ملعقة أو سكوبولا ، انشر العلف بشكل موحد قدر الإمكان على قاع الطبق. بعد ذلك ، استبدل الخلاصة كل يومين.

تخلص من العلف القديم في حاوية النفايات القابلة للتعقيم. رصد لنمو العفن على الأعلاف. وإذا بدأت العلف في الظهور باللون الأبيض أو الأخضر ، فتجاهل طبق بتري وقم بإطعامه على الفور.

في 14 يوما بعد وضع البيض، استخدمي فرشاة طلاء بطول 2.54 سم لإزالة الصراصير المتشبثة بركيزة جوز الهند عن طريق تنظيف جميع الصراصير من سطح جوز الهند وجوانب طبق بتري في القفص. بعد ذلك ، ضع ركيزة البيض التي تمت إزالتها في وعاء النفايات القابل للتعقيم ، وقم بتخزينه في الفريزر حتى يتم تعقيمه. ثم استبدلي الركيزة المولودة بطبق جوز الهند الطازج للترطيب.

باستخدام زجاجة غسيل ماء منزوعة الأيونات ، أضف الماء حتى يتلألأ سطح جوز الهند ، ولكن لا يتم تجميعه. تم تخزين الصراصير من مجموعة سكانية يبلغ متوسط كتلتها 21 ملليغرام. في نهاية التجربة ، كان متوسط كتلة جميع الصراصير اليافعة والبالغة مجتمعة 0.724 جرام.

في عمر 65 يوما ، عندما انتهت التجربة ، كان هناك 30 ذكرا بالغا ، وكان متوسط الكتلة 0.721 جراما ، بينما بالنسبة للإناث البالغات البالغ 58 ، كان متوسط الكتلة 0.841 جراما. كان البقاء على قيد الحياة بين التخزين والحصاد 89٪ وتم قياسه أسبوعيا من خلال إجمالي عدد الصراصير الفردية في جميع الأقفاص. في اليوم 65 ، وصل ما يقرب من 68٪ من جميع الصراصير إلى النجم البالغ.

تجنب تكوين قطرات الماء على قاع العلبة عند الري أو التغشية. يسمح وضع منشفة ورقية فوق refugia بتدرج الرطوبة ويمتص قطرات الماء من التغشية. يعمل هذا الإجراء كنموذج للباحثين في العديد من مجالات علوم الحياة لدعم Gryllus bimaculatus ككائن حي نموذجي.

حتى الآن ، تم نشر عدد قليل من البروتوكولات الرسمية لتربية Gryllus bimaculatus أو أي كائن حي نموذجي آخر من paurometabolous. إن تدوين وتوحيد طرق تربية الحشرات المستخدمة في زراعة الحشرات سيمكن بشكل أفضل من مقارنة النتائج بين مجموعات البحث.