نموذج التبرع الحيواني الكبير بعد موت الدورة الدموية والتروية الإقليمية النورمومية لتقييم القلب

يصف هذا البروتوكول نموذجا حيوانيا كبيرا للتبرع بعد موت الدورة الدموية متبوعا بالتروية الإقليمية للحرارة الطبيعية الصدرية البطنية التي تحاكي بدقة زراعة القلب السريرية. يمكن استخدام هذا لتقييم الاستراتيجيات المحتملة في البحث الانتقالي. الميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هي أنه يوفر نموذجا مناسبا قبل السريري لزراعة القلب نظرا لأوجه التشابه بين التقنيات التشريحية والجراحية بين الخنازير وقلوب البشر.

ابدأ باستخدام قلم الكي لإجراء شق في خط الوسط على مخدر من منطقة منتصف عنق الرحم إلى الخنجري. ثم ، قسم الدهون تحت الجلد ، طبقة تلو الأخرى ، على طول خط الوسط باستخدام الكي الكهربائي للوصول إلى peristernum. بعد القطع حول الشق القصي ، استخدم إصبعا لسحب الأنسجة الرخوة واكتساحها من تحت القص.

افتح القص بمنشار عظمي ، وتأكد من أن القص مقسم تماما ، مع توخي الحذر مع الوريد أسفل الجزء العلوي من عظم القص. ثم ، كي القص أو تطبيق شمع العظام لضمان الارقاء الكافي. بعد ذلك ، باستخدام الكي الكهربائي ، قم بتشريح الغدة الصعترية وإزالتها عن طريق رفعها من التامور وكي الأوعية التي تغذي الغدة الصعترية من الشريان الأورطي والوريد الأجوف العلوي لمنع النزيف.

قطع بعناية التامور مفتوحة مع الكي. أثناء القطع ، أدخل الأصابع تحت التامور لتجنب إصابة القلب. بعد ذلك ، يتم تطبيق 300 وحدة لكل كيلوغرام من الهيبارين عن طريق الوريد لتحقيق منع التخثر الجهازي.

إذا كان الاختبار متاحا ، فتأكد من أن وقت التخثر المنشط يزيد عن 300 ثانية. تطبيق بلعة من ثلاثة ملليغرام لكل كيلوغرام بروبوفول عن طريق الوريد. ثم ، توقف عن التهوية الميكانيكية وافصل الأنبوب الرغامي.

مراقبة الضغط الشرياني وتشبع الأكسجين المحيطي. عندما يكون الضغط الانقباضي أقل من 50 ملم من الزئبق ، ابدأ وقت نقص التروية الدافئ الوظيفي. إنشاء توقف الدورة الدموية عندما يكون هناك انقباض وغياب النبض الشرياني.

بعد انسحاب العلاجات التي تحافظ على الحياة وتأكيد الوفاة ، قم بسحب مجرى تدفق البطين الأيمن بشكل سفلي ، والشريان الرئوي إلى اليسار والشريان الأورطي إلى اليمين. ثم ، تشريح بعناية الفضاء الرئوي الشريان الأورطي باستخدام الكي. ضع مشبكا متقاطعا كبيرا على الأوعية فوق الأبهر لتجنب واستبعاد التروية الدماغية.

بعد ذلك ، باستخدام ملقط Metzenbaum والزاوية اليمنى ، قم بتشريح دقيق بين الوريد الأجوف العلوي والشريان غير المرشح وبين الوريد الأجوف السفلي والتامور. وقم بوضع دائرة حول الوريد الأجوف العلوي والسفلي باستخدام شريط سري أو خياطة حريرية صفرية بسيطة وقم بتثبيتها بعاصبة. باستخدام خياطة 3-0 ، ضع خيطين محفظتين متحدتي المركز على الشريان الأورطي الصاعد البعيد ، وتجنب الغرز ذات السماكة الكاملة.

بعد ذلك ، ضع خيطا محفظيا على الأذين الأيمن قبل تثبيت جميع الغرز باستخدام عاصبة. بعد ذلك ، قم بإعداد وتجهيز نظام التروية الإقليمية للحرارة العادية. بعد ذلك ، قم بتقليب الشريان الأورطي باستخدام قنية شريانية فرنسية من 17 إلى 21 وثبتها في مكانها عن طريق شد العاصبة ، مع تثبيت خياطة سلسلة المحفظة.

قم بإنشاء شق خمسة ملليمترات في مركز خيط المحفظة على الأذين الأيمن وقم بتوسيعه باستخدام أداة صغيرة بزاوية ، مثل الزاوية اليمنى أو المفاجئة. قم بتغطية الشق بإصبع لتجنب النزيف المفرط. بعد ذلك ، استخدم قنية وريدية مزدوجة المرحلة لقنية الأذين الأيمن.

بعد ذلك ، قم بتأمين القنية عن طريق شد خيوط سلسلة المحفظة باستخدام عاصبة. قم بتوصيل القنية بالخط الوريدي لدائرة التروية الإقليمية ذات الحرارة العادية باستخدام موصل نصف إلى ثلاثة على ثمانية بوصات ، مما يضمن إلغاء البث الكامل لتجنب غرفة معادلة الضغط في النظام. التأكد من مرور ما لا يقل عن 15 دقيقة بين إعلان الوفاة وبدء التروية الإقليمية الحرارية لتشمل الوقت اللازم في التحضير للممارسة السريرية واللف والوصول إلى القلب.

بعد 15 دقيقة من بدء وقت نقص التروية الدافئة الوظيفي ، ابدأ التروية الإقليمية الحرارية العادية واضبط معدلات التدفق تدريجيا للوصول إلى مؤشر تروية يبلغ 2.5 لتر في الدقيقة لكل متر مربع. أعد تشغيل التهوية الميكانيكية بجزء 50٪ من الأكسجين المستوحى وستة ملليلتر لكل كيلوغرام من حجم المد والجزر. عند استيفاء معايير الفطام ، توقف عن التروية الإقليمية السامة للحرارة.

قم بإزالة القنية من الأذين الأيمن وشد خيط المحفظة بسرعة لتقليل فقدان الدم. تأمين خياطة مع عقدة. ثم اتبع نفس الإجراء لإزالة قنية الأبهر.

تحليل وظيفة القلب من خلال تخطيط صدى القلب باستخدام مسبار قياسي عبر المريء ومسبار عبر الصدر يوضع مباشرة على القلب. أظهرت النتائج التمثيلية لوظيفة القلب انخفاضا كبيرا في وظائف القلب بعد التبرع بعد موت الدورة الدموية. ومع ذلك ، أظهرت هذه الأعضاء تعافيا وظيفيا مشابها بعد الزرع عند مقارنتها بالقلوب المزروعة تقليديا.

أكدت قياسات قياس التأكسج الدماغي أثناء التروية الإقليمية الحرارية العادية مع الأوعية فوق الأبهرية المثبتة عدم وجود نضح دماغي كاف ، في حين أن قياسات امتثال الرئة أثناء التروية الإقليمية الحرارية العادية وبعد الفطام من الدعم لم تظهر أي تغيير كبير عن خط الأساس. قدم تطوير هذه التقنية أهمية تقييم قابلية زرع الأعضاء الأخرى مثل الرئتين والكلى والكبد في سياق التبرع بعد موت الدورة الدموية والتروية الإقليمية المعيارية الحرارة.