بناء الببتيدات الحلقية باستخدام مركز السلفونيوم على الحبل

في هذا البروتوكول ، تم بناء ملح السلفونيوم الذي يمكن أن يكون بمثابة يد جديدة تتفاعل مع بروتين السيستين على القرب الخاص. كانت ميزة هذه التقنية هي أن هذا التفاعل كان سريعا وفعالا ، وخاليا من محفز الميت وطور طريقة بسيطة وفعالة لتثبيت الببتيدات. للبدء ، قم بإعداد محلول إزالة الحماية N-terminal 9-fluorinyl-methyloxycarbonyl من 20٪ بيبيريدين أو 50٪ مورفولين و DMF في دورق أو دورق سعة 500 ملليلتر.

بعد ذلك ، أضف 10 ملليلتر من محلول إزالة الحماية إلى العمود والنيتروجين الفقاعي في المحلول لمدة 30 دقيقة أو مرتين لمدة خمس دقائق. استنزاف الحل بواسطة مضخة فراغ وغسل الراتنج بالتتابع لمدة خمس مرات مع ثنائي كلورو ميثان و N، N-ثنائي ميثيل الفورماميد. للكشف عن الراتنج كمحلول أصفر داكن اللون ، أضف ملليلتر واحد من N ، N-dimethylformamide إلى كمية صغيرة من الراتنج وأضف 200 ميكرولتر من 5٪ نينهيدرين إلى أنبوب زجاجي.