Murine Fecal Isolation and Microbiota Transplantation

Jeanne A. Ishimwe; Jianyong Zhong; Valentina Kon; Annet Kirabo

doi:10.3791/64310

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Murine Fecal Isolation and Microbiota Transplantation

عزل براز الفئران وزرع الجراثيم

Full Text

5,780 Views

07:32 min

May 26, 2023

DOI: 10.3791/64310-v

Jeanne A. Ishimwe¹, Jianyong Zhong^2,3, Valentina Kon², Annet Kirabo¹

¹Division of Clinical Pharmacology, Department of Medicine Vanderbilt University Medical Center and Department of Molecular Physiology and Biophysics,Vanderbilt University, ²Division of Pediatric Nephrology Department of Pediatrics,Vanderbilt University Medical Center, ³Department of Pathology, Microbiology, and Immunology,Vanderbilt University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

الهدف هنا هو تحديد بروتوكول للتحقيق في آليات dysbiosis في أمراض القلب والأوعية الدموية. تناقش هذه الورقة كيفية جمع عينات براز الفئران وزرعها بشكل معقم ، وعزل الأمعاء ، واستخدام طريقة "Swiss-roll" ، تليها تقنيات التلوين المناعي لاستجواب التغيرات في الجهاز الهضمي.

لقد وصفنا هنا بروتوكولا لتوجيه الآخرين في التحقيق في آليات dysbiosis في المرض ، من جمع عينات البراز إلى استخدام طريقة اللفة السويسرية لدراسة التغيرات في الأمعاء. للبدء ، قم برش الصدر وجوانب الفأر الرحيم بنسبة 70٪ من الإيثانول ، وافتح الجلد والتجويف البريتوني بعناية لفضح الجهاز الهضمي. اعزل الأعور ، واستخدم مقصا جراحيا معقما لقطعه إلى نصفين.

فضح الأعور لفترة وجيزة ، وقطع 0.5 سم بالقرب من الدقاق و 0.5 سم بعيدا عند تقاطعه مع القولون. انقل الأعور المعزول إلى طبق بتري معقم. استخدم ملعقة معقمة لنقل محتوى cecal إلى أنابيب معقمة ، وقم بتخزين القسامات في فريزر 80 درجة مئوية.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos