تقنية معدلة لتضيق الأبهر المستعرض في الفئران
أغسطس 18, 2022
يصف هذا البروتوكول تقنية معدلة ومبسطة مع إجراء انقباض الأبهر المستعرض (TAC) طفيف التوغل باستخدام مبعدة عصامي. يمكن إجراء هذا الإجراء بدون جهاز التنفس الصناعي أو المجهر ويؤدي إلى زيادة الضغط ، مما يؤدي في النهاية إلى تضخم القلب أو فشل القلب.
يوفر هذا البروتوكول صدمة جراحية سريعة محدودة وغير معقدة وغير مكلفة لإجراء جراحة TAC. يقترب هذا النموذج من قوس الأبهر باستخدام مبعدة عصامي ولا يحتاج إلى مقياس جراحي مجهري أو تهوية ميكانيكية ، مما يحد بشكل كبير من الصدمات الجراحية. للبدء ، قم بإعداد حقنة خمسة ملليلتر.
ثم اجعل الإبرة حادة عن طريق الضغط على طرفها بحامل إبرة. قم بإعداد إبرة قياس 27 مثقوبة بحامل إبرة وثني طرفها عند 90 درجة. استخدم سلكا حديديا تم الحصول عليه تجاريا وقم بربطه حول الإبرة.
شكل فخا صغيرا أو حلقة عند الطرف الحاد للإبرة. تعقيم جميع الأدوات الجراحية قبل الجراحة عن طريق التعقيم. تأكد من عمق التخدير بقرصة إصبع القدم لمنع الجفاف أثناء التخدير.
ضع مرهم العيون على كلتا العينين. ثم ضع الماوس في وضع ضعيف على وسادة تدفئة مغطاة بستارة معقمة مع توجيه رأسها إلى المشغل. إصلاح أطرافها بشريط لاصق وقواطع مع خياطة 4-0.
الآن ، أدخل مسبار المستقيم لمراقبة درجة حرارة الجسم أثناء العملية. باستخدام مقص العيون المعقم ، قم بقطع ثقب في ثنى معقمة جديدة يمكن التخلص منها. ضع الستارة المعقمة فوق الماوس وتأكد من أن مجال التشغيل غير الشعر مرئي من خلال الفتحة.
بعد إجراء شق يفصل الجلد واللفافة السطحية ويعرض القصبة الهوائية والقصية القريبة. ثم قم بإجراء شق خط وسط طولي من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات بعناية إلى القص من الحافة العلوية إلى الزاوية القصية وارفع القص برفق بالملقط. باستخدام ملقط مستقيم تشريح بصراحة الوعاء المستهدف والأنسجة المحيطة به.
الآن ، أمسك المبعثر الذي كان عصاميا سابقا بفخ سلكي في اليد اليمنى. مرر بعناية فخ المبعدة تحت الشريان الأورطي بين الشريان السباتي المشترك الأيسر وأصل الشريان السباتي الأيمن. مرر المبعثر إلى اليد اليسرى.
امسك الملقط المجهري في اليد اليمنى وقم بتمرير خياطة حريرية 7-0 عبر حلقة الفخ في النهاية. اسحب المبشور. ضع إبرة قياس 27 موازية للشريان الأورطي واربط الخيط حول الإبرة والشريان الأورطي.
ثم امسك إبرة قياس 27 مع ملقط العيون والعقدة المربوطة بإبرة قياس 27 والشريان الأورطي بملقط آخر. اسحب إبرة قياس 27 بسرعة ولكن برفق من الربط. خياطة الجلد مع 4-0 خيوط أحادية الاصطناعية في نمط خياطة متقطعة.
ضع الماوس على وسادة دافئة وانتظر حتى ينتعش. بشكل عام ، ينعش الماوس في حوالي 60 دقيقة. بعد أربعة أسابيع من الجراحة.
تم تقليل الكسر القذفي والتقصير الكسري بشكل ملحوظ في الفئران الانقباضية الأبهرية المستعرضة مقارنة بالفئران الوهمية. ومع ذلك ، كانت كتلة البطين الأيسر والقطر الداخلي للبطين الأيسر مرتفعة بشكل ملحوظ في فئران انقباض الأبهر المستعرضة. الخطوة الأكثر أهمية في هذا الجسيم هي تمرير خياطة تحت قوس الأبهر.
يجب أن تكون جميع الأفلام لطيفة لتقليل الجر غير الضروري للشريان. بعد هذا الإجراء ، يمكن للباحثين تطبيق العلاج الطبي على النموذج الحيواني من أجل التحقيق في الأهداف العلاجية المحتملة للمرضى الذين يعانون من تضخم القلب أو قصور القلب.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
نظرة عامة
يوضح هذا البروتوكول إجراء تضيق الأبهر المستعرض (TAC) بأقل تدخل جراحي باستخدام مباعد ذاتي الصنع، والمصمم لتحفيز زيادة الضغط ودراسة تضخم القلب أو فشل القلب. يتميز هذا الإجراء بالبساطة ولا يتطلب تهوية ميكانيكية أو مجهراً متطوراً.
المكونات الرئيسية للدراسة
مجال البحث
- طب القلب
- النماذج الحيوانية لأمراض القلب
- التقنيات الجراحية
خلفية علمية
- يُعد نموذج ربط الشريان الأبهر المستعرض (TAC) بالغ الأهمية لدراسة تضخم القلب وفشل القلب.
- من الضروري تقليل الصدمات الجراحية لتعزيز التعافي وتحسين النتائج التجريبية.
- غالبًا ما تتطلب طرق TAC التقليدية معدات معقدة، ويهدف هذا البروتوكول إلى تبسيطها.
الطرق المستخدمة
- تم استخدام مبعد مُصنّع يدويًا وإبر غير مدببة لإجراء عملية TAC.
- النظام البيولوجي المستخدم هو نموذج فأر.
- تشمل التقنيات الرئيسية أدوات جراحية أساسية مع متطلبات محدودة للجراحة المجهرية.
النتائج الرئيسية
- بعد إجراء عملية ربط الشريان الأورطي المستعرض (TAC)، لوحظت تغيرات جوهرية في كتلة البطين الأيسر والكسر القذفي في نماذج تضخم القلب بعد أربعة أسابيع.
- تؤكد النتائج نجاح تحفيز الإجهاد القلبي والتضخم استجابةً للإجراء المتبع.
- ويثبت ذلك فائدة هذا النموذج لإجراء المزيد من الاستقصاءات العلاجية.
الاستنتاجات
- تقدم هذه الدراسة بنجاح طريقة مبسطة لمحاكاة فرط الحمل القلبي في الفئران.
- تعد هذه التقنية ذات أهمية للباحثين الذين يدرسون أمراض القلب والعلاجات المحتملة.
الأسئلة الشائعة
الأهمية الصناعية التنفيذية
يعتبر تضييق الأبهر المستعرض (TAC) في الفئران نموذجاً قبل سريري أساسياً لدراسة تضخم القلب وفشل القلب تحت تأثير فرط الضغط. تعمل تقنية تضييق الأبهر المستعرض المعدلة هذه، والتي تتسم بالتدخل الجراحي المحدود، على تقليل الصدمات الجراحية والتعقيدات التشغيلية، مما يسمح بنمذجة مرضية أكثر قابلية للتكرار والتوسع من أجل اكتشاف الأدوية القلبية الوعائية في مراحلها المبكرة. ويدعم هذا النهج التعافي السريع والملاءمة الفسيولوجية، مما يعزز الثقة التنبؤية للأبحاث الانتقالية وتقييم الأهداف العلاجية.
التطبيقات الاستراتيجية في البحث والتطوير الصيدلاني الحيوي
الاكتشاف المبكر والتحقق من صحة الهدف
- يُمكّن من النمذجة القوية لتضخم القلب الناجم عن فرط الضغط لدراسات الآلية.
- يسهل التحقق الوظيفي من الأهداف القلبية الوعائية في نظام متحكم به داخل الجسم الحي (in vivo).
- يدعم الاستقصاء القائم على الفرضيات لمسارات الإجهاد القلبي ذات الصلة بالأمراض البشرية.
الفحص وتطوير المقايسات
- يوفر منصة قياسية وقابلة للتكرار لتقييم التدخلات المرشحة داخل الجسم (in vivo).
- يقلل من التباين الإجرائي، مما يدعم الحصول على قراءات كمية متسقة مثل الكسر القذفي وكتلة البطين.
- يسهل عملية إعداد النموذج، مما يزيد من الإنتاجية في حملات الفرز قبل السريرية.
الأبحاث الانتقالية وما قبل السريرية
- يتماشى مع النقاط النهائية ذات الصلة بالمرض لتطوير المؤشرات الحيوية الانتقالية في أبحاث فشل القلب.
- يتيح الاستمرارية من مرحلة الاكتشاف المبكر وصولاً إلى تقييم الفعالية قبل السريرية للعلاجات المبتكرة.
- يدعم قرارات التقدم المعدلة حسب المخاطر من خلال نمذجة الأنماط الظاهرية القلبية ذات الصلة سريرياً.
تكامل خطوط الأنابيب وسير العمل
يدمج نموذج TAC هذا، الذي يتميز بكونه طفيف التوغل، في مسار اكتشاف أمراض القلب والأوعية الدموية، بدءاً من الدراسات الميكانيكية المبكرة وصولاً إلى تقييم المركبات الرائدة في المرحلة قبل السريرية.
- بيولوجيا الاكتشاف: تدعم اختبار الفرضيات وتوضيح المسارات في نماذج فرط تحميل القلب.
- الفحص: توفر قياسات كمية وقابلة للتكرار لوظائف القلب لتقييم المركبات.
- التحليلات: تتيح المقارنة الإحصائية لمعايير القلب عبر المجموعات التجريبية.
- البحث الانتقالي: توفر جسراً للصلة السريرية من خلال نمذجة الأنماط الظاهرية الرئيسية لفشل القلب.
- إعادة الاستخدام المؤسسي: توفر منصة قياسية وقابلة للتوسع للاستخدام المتكرر عبر برامج البحث والتطوير في أمراض القلب والأوعية الدموية.
التأثير التشغيلي والمؤسسي
- القيمة العلمية: تزيد من الثقة التنبؤية وتقلل من الغموض الميكانيكي في التحقق من صحة الأهداف القلبية.
- القيمة التشغيلية: تقلل من التعقيد الجراحي، وتوحد الإجراءات، وتسرع الجداول الزمنية للتعافي.
- القيمة الاستراتيجية: تحسن جودة قرارات المضي قدماً أو التوقف وكفاءة رأس المال من خلال تقليل المخاطر البيولوجية في المراحل المتأخرة.
- التأثير على المحفظة: تتيح تحديد أولويات الأصول القلبية الوعائية المعدلة حسب المخاطر بناءً على بيانات قوية قبل سريرية.
اعتبارات التنفيذ
- يتطلب خبرة في جراحة الحيوانات الصغيرة وفسيولوجيا القلب والأوعية الدموية.
- يحتاج إلى أدوات جراحية أساسية ومباعد مصنع يدويًا للتعامل مع الأوعية الدموية.
- يستلزم توحيداً في بروتوكولات الجراحة ومراقبة ما بعد الجراحة بين الفرق العاملة.
- قابل للتطبيق على سلالات مختلفة من الفئران ولكن قد يتطلب تحسيناً لخلفيات جينية محددة.
- تشمل القيود المحتملة التباين التقني في تضيق الأوعية وقياس نقطة النهاية.
