التلاعب الجيني بوساطة العاثيات لمرض لايم Spirochete Borrelia burgdorferi

هذا البروتوكول مهم لأنه يصف أداة مهمة أخرى لتشريح البيولوجيا الجزيئية لعامل مرض لايم Borrelia burgdorferi. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه باستخدام نقل العاثيات ، فإنه يوفر طريقة بديلة لإدخال الحمض النووي في Borrelia burgdorferi دون الحاجة إلى تطبيق نبضة كهربائية ، كما هو الحال في التثقيب الكهربائي. يمكن استخدام هذه الطريقة لتوفير مزيد من التبصر في الآليات الجزيئية التي يستخدمها Borrelia burgdorferi للاستمرار في دورته الحيوانية والتسبب في نهاية المطاف مرض لايم في البشر.

للبدء ، قم بتلقيح 150 ميكرولتر من استنساخ Borrelia burgdorferi المناسب إلى 15 ملليلتر من BSK في أنابيب طرد مركزي مخروطية معقمة بإحكام لبروتوكول النقل. بعد ذلك ، استكمل الوسط بالتركيز المناسب للمضادات الحيوية أو مجموعة من المضادات الحيوية لاختيار وصيانة الحمض النووي غير المتجانس داخل استنساخ Borrelia burgdorferi واحتضان العينة عند 33 درجة مئوية. بعد أن نمت الثقافة ، قم بالطرد المركزي الحجم المناسب للثقافة عند 6،000 غرام لمدة 10 دقائق.