القياس عبر الجلد لمعدل الترشيح الكبيبي في الخنازير ذات التهوية الميكانيكية

يقدم TGFR تقييما في الوقت الفعلي لوظائف الكلى. بالمقارنة مع العلامات التقليدية ، يمكن ل TGFR مراقبة التغيرات في وظائف الكلى في نفس الحيوانات عدة مرات. بالإضافة إلى ذلك ، لا تتطلب هذه التقنية أي جمع للدم أو البول.

مع التطورات الحديثة في زراعة الأعضاء ، سيتم إجراء المزيد من الأبحاث باستخدام نموذج الخنازير. لذلك نعتقد أن هذه الأداة ستكون ضرورية للبحث الانتقالي ، ومن المرجح أن يتم استخدامها سريريا في السنوات القادمة. أجريت التجربة على الخنازير التي يبلغ عمرها من ثلاثة إلى سبعة أيام.

الحيوانات عرضة لانخفاض حرارة الجسم ونقص حجم الدم والمضاعفات الأخرى الناشئة عن الجراحة. وبالتالي ، فإن المراقبة الدقيقة مطلوبة طوال الإجراء. أيضا ، تتطلب المنهجية الممارسة لأنها تنطوي على فغر القصبة الهوائية وقنية الأوعية.

بعد تحضير الحيوان لهذا الإجراء ، استخدم شفرة جراحية لإنشاء شق عمودي باراميدي أيسر من خمسة إلى ستة سنتيمترات ، حيث يقع الأعور في الخنازير في الحفرة القطنية اليسرى. تشريح طبقات جدار البطن ، وتجنب إصابة الأوعية الشرسوفية السطحية. بمجرد شق الطبقة البريتونية ، استخدم مبعدة لتحسين الوصول إلى الهياكل داخل البطن وتحديد القولون الحلزوني في الربع الأيسر العلوي من البطن.

لتحديد موقع الأعور ، تتبع القولون الحلزوني ذيليا وظهريا. يتم ربط القولون الحلزوني في قاعدة الأعور بالحرقفة. قم بربط الأعور فقط بعيدا عن تقاطع اللفائفي الأعور.

باستخدام إبرة قياس 18 ، قم بعمل سبعة ثقوب في الأعور وقذف البراز في المنطقة البريتونية. أغلق طبقات البطن بخياطة حريرية 3/0 ، باستخدام غرز بسيطة متقطعة أو مستمرة. يمكن أيضا استخدام دباسة لإغلاق طبقة الجلد إذا كانت متوفرة.

بعد ثماني ساعات من ربط cecal ، ابدأ قياس GFR عبر الجلد. استخدم الإصدار 3.0 من برنامج MB Service لضبط معدل أخذ العينات على جهاز GFR. باستخدام موصل USB ، قم بتوصيل جهاز GFR عبر الجلد بالكمبيوتر.

افتح برنامج خدمة MB. انقر فوق اتصال واضبط التوقيت على 4،000 مللي ثانية. انقر فوق كتابة لحفظ الإعدادات ثم انقر فوق قطع الاتصال.

قم بتوصيل اللاصقات اللاصقة على الوجهين بنافذة واضحة على جانب واحد من الجهاز. قم بتوصيل البطارية بالجهاز ، مما يضمن أن الصمام الثنائي الباعث للضوء يغطي النافذة الشفافة للسماح باكتشاف التتبع. بمجرد توصيل البطارية ، قم على الفور بلصق الرقعة اللاصقة مع الجهاز في مكانه.

تأكد من أنها مؤمنة بشكل جيد. نظرا لأن الخنازير يتم تخديرها بعمق ، فقد يكون الشريط غير ضروري لتثبيت الجهاز في مكانه. تحضير 50 ملليغرام لكل ملليلتر من محلول FITC-sinistrin مع محلول ملحي ورسم الجرعة المناسبة في حقنة.

قم بتوصيل المحقنة بالدواء على جانب واحد من محبس ثلاثي الاتجاهات ، وتدفق محلول ملحي على الجانب الآخر من المحبس. ادفع FITC-sinistrin ، متبوعا مباشرة بلعة ملحية بخمسة ملليلتر قبل إغلاق المحبس ثلاثي الاتجاهات على الوريد الصغير. الحفاظ على الجهاز تعلق على خنزير صغير لمدة أربع ساعات.

لتجنب القطع الأثرية المتحركة خلال هذا الوقت ، احتفظ بالخنزير الصغير تحت التخدير كما هو موضح في المخطوطة. في نهاية الساعات الأربع ، قم بإزالة الجهاز وافصل البطارية على الفور. قم بتوصيل جهاز GFR عبر الجلد بالكمبيوتر باستخدام موصل USB الذي يوفره المورد.

افتح برنامج مختبر MB لاسترداد البيانات من الجهاز. لحفظ البيانات الأولية، انقر فوق اتصال وحدد قراءة. ثم انتظر حتى ينتهي الجهاز من القراءة.

انقر فوق إعادة تسمية وأخيرا ، انقر فوق حفظ. معالجة وتقييم البيانات المحفوظة في برنامج التحليل وفقا لتعليمات الدليل. باختصار ، افتح استوديو MB وانقر فوق تحميل لاستيراد البيانات المحفوظة.

اضبط مواضع الإزاحة والبدء والإيقاف باستخدام العلامات الآلية. قم بإزالة القطع الأثرية إذا لزم الأمر. حدد النموذج المكون من ثلاث حجرات وانقر فوق fit للحصول على قراءة توضح تخليص FITC-sinistrin في دقائق وحساب TGFR باستخدام هذه المعادلة.

كان لكل من الحيوانات الزائفة والإنتان أوزان مماثلة. بعد 12 ساعة من الإنتان ، لوحظت زيادة مستويات مصل البروتين التفاعلي C ، وهو علامة على الإنتان ، في مجموعة الإنتان. تم عرض منحنيات إزالة FITC-sinistrin للخنازير الوهمية والإنتانية بعد 12 ساعة من الجراحة.

أظهرت الخنازير الصرف الصحي مع اختلال وظائف الكلى زيادة المساحة تحت المنحنى. أظهرت الخنازير المصابة بالإنتان ضعفا في إزالة FITC-sinistrin ، مما يشير إلى إصابة الكلى الحادة. كان متوسط عمر النصف ل FITC-sinistrin في مجموعتي الوهمية والإنتان 114 و 537 دقيقة على التوالي.

كان متوسط GFR في المجموعة الوهمية أعلى بكثير منه في مجموعة الإنتان. كان مستوى الكرياتينين في الدم عند صفر و 12 ساعة مشابها في المجموعة الوهمية. ومع ذلك ، لوحظت زيادة كبيرة في مستوى الكرياتينين في الخنازير الإنتانية بعد 12 ساعة.

تأكد من توصيل البطارية بشكل صحيح بالخنازير. إذا تم إزاحة البطاريات ، فلن يعمل الجهاز. حاول حقن FITC-sinistrin في بلعة سائلة واحدة لمنع القمم المتعددة.

تأكد أيضا من توصيل الجهاز بشكل صحيح بالخنازير لمنع القطع الأثرية للحركة. من خلال القياس في الوقت الفعلي ل GFR ، يمكننا تقييم وظائف الكلى بشكل صحيح للكشف عن المرحلة المبكرة من AKI وربما تقييم العوامل العلاجية قيد التحقيق.