طريقة إثراء للحويصلات الصغيرة خارج الخلية المشتقة من أنسجة سرطان الكبد

تسمح هذه الطريقة بعزل الحويصلات الصغيرة خارج الخلية المشتقة من أنسجة سرطان الكبد بنقاوة أعلى من تلك التي تحققها الطرد المركزي الكلاسيكي التفاضلي. هذه التقنية بسيطة ومريحة وسهلة التشغيل ، والتي يمكن أن توفر الدعم المنهجي لدراسة الحويصلات الصغيرة خارج الخلية. للبدء ، قم بإزالة عينة الأنسجة من الفريزر 80 درجة مئوية.

ضع ما يقرب من 400 ملليغرام من الأنسجة في طبق زراعة الخلايا 10 سم على صندوق الثلج ، وفرم الأنسجة جيدا بمشرط. نقل الأنسجة إلى لوحة ستة آبار مع 1.5 ملليلتر من محلول الجهاز الهضمي. بعد ذلك ، ضع اللوحة على شاكر إزالة اللون ، واحتضانها عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة للتفكك الكامل لأنسجة سرطان الكبد وإطلاق الحويصلات الصغيرة خارج الخلية ، أو sEVs.