الجراحة والاختبارات السلوكية في نموذج تبديل الورم العصبي الظنبوبي في الفئران

تساعد هذه الطريقة في إيجاد علاجات أفضل لألم الورم العصبي. ميزة هذه التقنية هي أنه يمكنك قياس كل من ألم الورم العصبي والألم المعمم بشكل مستقل في نفس نموذج التكرار. تم تركيب نموذج TNT بشكل خاص لاختبار ألم الورم العصبي ، حيث يمكن تحفيز الورم العصبي نفسه ميكانيكيا باستخدام خيوط Von Frey الأحادية.

ابدأ بوضع الجرذ المخدر على ظهره ورأسه إما إلى اليسار أو اليمين. ضع الساق المراد إجراء العملية عليها بالقرب من الجراح. قم بتدوير الطرف الخلفي السفلي بحيث يكون المليولوس الإنسي متجها لأعلى.

قبل وضع الفئران تحت المجهر الجراحي المجسم مع تكبير 6x ، قم بتطهير المنطقة المحلوقة بثلاث جولات متناوبة على الأقل من فرك اليود والكحول. حدد موقع الركبة وقم بعمل شق طولي برفق من 2 إلى 3 سنتيمترات على الجانب الإنسي من المخلب الخلفي من منتصف الساق إلى الكاحل باستخدام مشرط. إذا لزم الأمر ، افتح الجلد وتحت الجلد بشكل أكبر باستخدام مقص دقيق حتى تصبح طبقات العضلات مرئية.

حدد الحزمة الوعائية العصبية السطحية في صورة خطين أو ثلاثة خطوط بيضاء أو أرجوانية أو حمراء يمكن أن تتحرك بحرية فوق طبقات العضلات. الحفاظ على حزمة الأوعية الدموية العصبية سليمة. تشريح الخلفي من هذه الحزمة.

بعد ذلك ، تشريح لفتح اللفافة بين عضلات الساق. بين لفافة العضلات ، يمكن العثور على الحزمة الوعائية العصبية العميقة مع العصب الظنبوبي ، وهو حوالي ثلاثة أضعاف حجم الحزمة الوعائية العصبية السطحية. استخدم عظم الظنبوب كمعلم إضافي ، حيث يطير العصب الظنبوبي خلف عظم الظنبوب.

لتشريح العصب الظنبوبي الخالي من حزم الأوعية الدموية المحيطة ، حرك العصب الظنبوبي بصراحة واقطع الأنسجة المكشوفة التي تظهر بعض التمدد أثناء تحريك العصب الظنبوبي. بمجرد تعرض العصب الظنبوبي بأكمله ، ضع طبقات العضلات مرة أخرى لتجنب جفاف العصب حتى تشريح الجلد قبل الظنبوب من العضلات تحت الجلد. لتشريح الجلد pretibial من طبقة العضلات تحت الجلد وجعل نفق تحت الجلد ، امسك الجلد لأعلى وادفع الطرف الحاد إلى الأنسجة الموازية للجلد باستخدام أداة جراحة مجهرية حادة.

تأكد من أن نهاية النفق تقع قبل الظنبوب أو بشكل جانبي لسهولة الوصول إلى المنطقة لاختبار الورم العصبي. بعد قطع العصب الظنبوبي في الطرف البعيد بالقرب من الكاحل ، قم بتغيير تكبير المجهر إلى 10x أو 16x وحدد العصب فوق العصبي الظنبوبي القريب من القطع المصنوع بالقرب من الكاحل. أو ، في حالة التشعب الأقرب للعصب الظنبوبي ، حدد العصب لكل من فروع الغراس الإنسي والجانبي القريبة من القطع المصنوع بالقرب من الكاحل.

ضع بعناية 8-0 خياطة النايلون من خلال epineurium من نهاية العصب القريب عن طريق عقد epineurium مع ملاقط ووضع الإبرة بين العصب و epineurium مع لدغة من حوالي 0.5 ملليمتر. خذ لدغة بالإبرة تحت الجلد في نهاية النفق تحت الجلد واسحب الخيط لنقل العصب بشكل جانبي إلى النفق تحت الجلد. إصلاح خياطة عن طريق جعل عقدة.

ضع خياطة أكثر سمكا من 4-0 بلون غامق متدفق إلى نهاية العصب المثبت دون اختراق الجلد. تأكد من أن الخيط مرئي خارج الجلد. تحقق مما إذا كان العصب يبقى في مكانه بعد تحريك المخلب والعضلات.

قطع ينتهي خياطة مع نهاية خياطة أطول قليلا على 4-0 ، ثم على 8-0 خياطه. تغيير تكبير المجهر مرة أخرى إلى 6x وإغلاق الجلد مع الغرز داخل البشرة باستخدام 8-0 خياطه. نظف البشرة بلطف باستخدام 0.9٪ كلوريد الصوديوم باستخدام قطعة قطن.

إذا كانت الغرفة باردة ، ضع وسادة تدفئة تحت جزء من قفص نظيف وضع الفئران في القفص تحت منشفة ورقية في وضع مريح. ضمان سهولة الوصول إلى الطعام والماء. لتحفيز العصب المعقم لفرط الحساسية ، ضع الشعيرات الأحادية على الجانب الجانبي بالقرب من حدود الشعر دون لمس منصات القدم.

لتحفيز العصب الظنبوبي لنقص الحساسية ، ضع الشعيرات الأحادية في منتصف سطح الغراس للمخلب الخلفي. لاختبار موقع الورم العصبي ، امسك الفئران مع توجيه أنفها نحو طية الكوع. إذا تم وضع الجرذ في اليد اليمنى ، فيجب أن يتدلى مخلبه الخلفي الأيسر بحرية بين الإبهام الأيمن والسبابة.

بعد التحقق من أن الجرذ هادئ ومريح أثناء الإمساك ، عند خط الأساس ، ضع الشعيرات الأحادية التي يبلغ وزنها 15 جراما برفق على السطح الظنبوبي للمخلب الخلفي المكشوف. بعد الجراحة ، ضع الشعيرات الأحادية التي يبلغ وزنها 15 جراما على الخيط المرئي وقم بتطبيق قوة كافية على الشعيرات الأحادية لثني الشعر والاحتفاظ به لمدة ثانية واحدة. أظهر فون فراي من موقع الورم العصبي أنه عند خط الأساس ، استجابت الفئران ل 10٪ إلى 15٪ من تطبيقات خيوط أحادية 15 جراما.

بعد أسبوع واحد من جراحة تبديل ورم العصب الظنبوبي ، ارتفع معدل الاستجابة من 45٪ إلى 50٪على الجانب المقابل ، كانت الاستجابات بعد الجراحة مشابهة لخط الأساس. حوالي 20٪ من الفئران لم تصاب بورم عصبي مؤلم ولم يزداد معدل الاستجابة مقارنة بخط الأساس. في نهاية جذع العصب الظنبوبي المتقاطع والمنقول بعد 12 أسبوعا من الجراحة ، أصيبت جميع الفئران بورم عصبي.

يقلل استئصال العصب الظنبوبي من الحساسية الميكانيكية في منتصف جانب الغراس من المخلب الخلفي المعصب بواسطة العصب الظنبوبي. كان نقص الحساسية الموجود في أسبوع واحد بعد الجراحة مختلفا بشكل كبير عن الجانب المقابل وخط الأساس من ثلاثة أسابيع بعد الجراحة واستمر حتى 12 أسبوعا بعد الجراحة. في الجزء الجانبي من جانب الغراس من المخلب الخلفي المعصب بواسطة العصب الجداري السليم ، طورت الفئران فرط حساسية ميكانيكية مختلفة بشكل كبير عن الجانب المقابل وخط الأساس من أسبوع واحد بعد الجراحة.

استمر لمدة 12 أسبوعا بعد الجراحة. في المخلب المقابل ، لم تتأثر الحساسية الميكانيكية مقارنة بخط الأساس في المناطق المعصبة إما عن طريق العصب الجداري أو الظنبوبي. تذكر إنشاء مسافة بعيدة عن طول العصب الظنبوبي لنطاق الحركة للتبديل الجانبي.

تذكر أيضا أن تضع علامة على موقع الورم العصبي هذا بخياطة داكنة.