نظام الزرد Tol2: نهج وراثي معياري ومرن قائم على البوابة

أثبتت أسماك الزرد المعدلة وراثيا أهميتها لفهمنا لتطور الجنين. نظام Tol2 هو أداة متعددة الاستخدامات تمكن الباحثين من توليد العديد من أسماك الزرد المعدلة وراثيا بسرعة وبشكل منهجي لدراسات FASD. يجعل التصميم المعياري وسهولة توليد مكونات مجموعة جديدة من نظام Tol2 أداة متعددة الاستخدامات لتوليد جينات محورة جديدة دون الحاجة إلى إعادة تصميم أي مكونات للمجموعة.

نصيحتي للباحثين الذين يقومون بهذه التقنية لأول مرة هي إجراء العديد من التجارب للتدريب على دقة توليد وحقن التركيبات المعدلة وراثيا. للبدء ، قم بخطي بلازميد مجموعة Tol2 التي تحتوي على ترانسبوزاز مع نوكلياز داخلي مقيد من خلال الجمع بين 10 ميكرولتر من بلازميد الترانسبوزاز ، و 1.5 ميكرولتر من المخزن المؤقت لتفاعل النوكلياز الداخلي للتقييد ، و 0.3 ميكرولتر من نوكلياز واحد في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 500 ميكرولتر. املأ التفاعل حتى 20 ميكرولترا بالماء الخالي من الحمض النووي الريبي.