نموذج لنقص التروية وإصابة التروية في الأرانب

يوفر هذا البروتوكول منهجية بسيطة وموثوقة وقابلة للتكرار للحث على نقص تروية عضلة القلب الإقليمي الحاد في الموقع وإصابة إعادة التروية في نموذج أرنب لتجارب عدم البقاء على قيد الحياة والبقاء على قيد الحياة. هذه التقنية لديها الحد الأدنى من الوفيات والمراضة من خلال نهجين جراحيين مختلفين. المنهجية فعالة من حيث التكلفة ولها طلب تقني منخفض وبالتالي يمكن إجراؤها من قبل المحققين دون خبرة جراحية.

قد يكون تعريض LAD من خلال بضع الصدر المصغر أمرا صعبا. نوصي بإجراء شق رابع في الفضاء الوربي الأمامي يمتد من خمسة إلى ستة سنتيمترات بشكل جانبي وممارسة مثل هذا التعرض وتشريح الأرانب مسبقا. لإجراء بضع الصدر المصغر الأيسر لدراسات البقاء على قيد الحياة ، ارفع الجانب الأيسر من الأرنب المخدر حوالي 30 درجة باستخدام وسادة.

قم بجس المعالم العظمية وتحديدها بقلم وسم ذي رأس شعري. باستخدام شفرة رقم 10 ، شق الجلد فوق الضلع الخامس ، ويمتد من الحدود الجانبية للقص إلى خمسة إلى ستة سنتيمترات بشكل جانبي. باستخدام الكي الكهربائي ، قسم العضلة الصدرية الكبرى وسطيا ، تليها العضلة الأمامية المسننة بشكل جانبي.

ثم قسم العضلات الوربية فوق الضلع الخامس للحفاظ على الحزمة الوعائية العصبية. باستخدام تشريح حاد ، شق غشاء الجنب الجداري بمقص Metzenbaum ، وأدخل بعناية الفضاء الجنبي من خلال الفضاء الوربي الرابع ، وقم بتمديد الشق الجنبي الأولي في كلا الاتجاهين بالتوازي مع الضلع حتى يمكن إدخال مفرشة ضلع أو مبعثر قصي. ضع مفرشة ضلع أو ضاعدة قصية داخل مساحة الضلع وقم بتوسيعها لتصور القلب وكيس التامور.

استخدم ملقط DeBakey لرفع التامور. افتحه بمقص Metzenbaum وتابع عزل الشريان LAD. سيوفر هذا التصور الأمثل للسطح الأمامي الجانبي للقلب مع التعرض الكافي ل LAD وفروعه.

لعزل شريان LAD ، قم بتطويق فرعه القطري الثالث بخياطة بولي بروبيلين 3-0 على إبرة مستدقة ، ثم قم بإزالة الإبرة. في حالات البقاء على قيد الحياة ، قم بقص خيوط البولي بروبلين الثلاثة 3-0 المستخدمة لعزل LAD وربط الأطراف معا بشكل فضفاض. يتم استخدام خيوط البولي بروبلين الثلاثة 3-0 لتحديد المنطقة المعرضة للخطر ومنطقة الاحتشاء عند حصاد القلب.

بعد الجراحة ، اربط غرز Polyglactin 910 2-0 من ثمانية حول الضلوع. أغلق الطبقات العضلية وتحت الجلد بخياطة بوليديوكسانون 3-0 بطريقة جري. ثم أغلق الجلد بطريقة تحت الجلد باستخدام خياطة أحادية الشعيرات 5-0.

أخيرا ، قم بإجراء بزل الصدر بالإبرة لإخلاء الخطأ الجنبي. بالنسبة لدراسات عدم البقاء على قيد الحياة، تابع على الفور بضع القص في خط الوسط باستخدام مقص Mayo المنحني. باستخدام مبعدة القص لتصور القلب وكيس التامور ، افتح التامور كما هو موضح سابقا.

تصور حلقة خيط البولي بروبلين 3-0 الموضوعة أثناء جزء بضع الصدر الذي تم إجراؤه مسبقا من الإجراء. لعزل شريان LAD ، قم بتطويق فرعه القطري الثالث بخياطة بولي بروبيلين 3-0 على إبرة مستدقة. ثم قم بإزالة الإبرة والخيط على طرفي خيوط البولي بروبلين من خلال أنبوب فينيل صغير لتشكيل فخ.

باستخدام ملقط DeBakey ، ضع متعهد PTFE مستطيل بين خيطي البولي بروبلين ، وقم بوضعه بين شريان LAD المعزول وأنبوب الفينيل. شد هذا الفخ عن طريق الضغط لأسفل على أنبوب الفينيل وسحب خيوط خياطة البولي بروبلين لأعلى لإغلاق الشريان الإكليلي. قم بتثبيت الأنبوب باستخدام مشبك البعوض للحفاظ على الضيق المطلوب.

تأكيد نقص تروية عضلة القلب من خلال مراقبة زرقة إقليمية من النخاب. قم بإزالة الفخ بعد 30 دقيقة من تحريض نقص التروية. في نهاية التجربة ، احصد القلب لتحليل الكيمياء الحيوية والأنسجة.

أظهرت ECGs المسجلة في مرحلة ما قبل نقص التروية ، وأثناء نقص التروية ، وإعادة التروية عدم انتظام دقات القلب ، وعدم انتظام ضربات القلب ، وعيوب نظام التوصيل ، وتطوير موجات Q المرتبطة باحتشاء ، وانحراف مقطع ST. أظهرت قراءات الصدى 2D أن التقصير الجزئي انخفض أثناء نقص التروية وما بعد نقص التروية مقارنة بمرحلة ما قبل نقص التروية. بعد 30 دقيقة من نقص تروية عضلة القلب الإقليمية المستحثة ، لوحظ دليل على نخر عضلة القلب.

تتمثل أهم خطوات البروتوكول في تطويق LAD بعناية دون الإضرار بالشريان أو التسبب في نزيف وريدي ، ووضع تعهد PTFE بشكل مناسب لمنع التشنج الوعائي ، وتضمين LAD لإنشاء منطقة ثابتة معرضة للخطر. هذه المنهجية مفيدة في إصابة الأوعية الدموية ، ونقص تروية عضلة القلب المزمن ، والنماذج المذهلة لعضلة القلب الحادة للكشف عن الميكانيكا الجزيئية للقلب والأوعية الدموية ، والآليات الفيزيولوجية المرضية ، والأهداف العلاجية ، وإظهار سهولة الاستخدام وتطوير خوارزميات التشخيص والعلاج.