إنشاء نموذج شفاء تجويف استخراج ضرس الفك السفلي
يناير 13, 2023
يوضح هذا البروتوكول تفاصيل خطوة بخطوة حول كيفية استخراج الضرس الأول للفك السفلي في الماوس. يوفر طريقة بديلة للباحثين الذين يركزون على شفاء عظم الفك وتجديده.
يوفر هذا البروتوكول نموذج استخراج ضرس الفك السفلي الذي نادرا ما يتم تقديمه في دراسات تجديد العظام المتاحة. يعد تطوير نموذج استخراج ضرس الفك السفلي ضروريا باعتباره الفك السفلي الذي يكون أكثر قابلية للمقارنة واتساقا بين مجموعات التدخل المختلفة. الآثار المترتبة على هذه التقنية لا تمتد نحو علاج أي مرض.
ومع ذلك ، قد يساعد في الشفاء السريري وتجديد عظام الفك على المدى الطويل من خلال المساعدة في مراجعة الآليات الكامنة وراء هذه العملية. تم تطوير هذه التقنية لمساعدة الدراسات ، والكشف عن آليات الشفاء والتجديد المتاحة. للأسف ، لا يمكن تطبيق هذه الطريقة على أنظمة أخرى.
ابدأ في التخلص من المقاومة البعيدة للفأر المخدر عن طريق إمساك الضرس بملاقط وسطيا. ثم أدخل إبرة قياس 23 في العظم السنخي الشدقي للجذر البعيد وقم بعمل فاصل زمني. بعد ذلك ، قم بالتغيير إلى إبرة قياس 25 لمواصلة تمدد الفاصل الزمني.
تقدم بدقة نحو المنطقة المحيطة بالذروة مع تدوير الإبرة ببطء للأمام وبشكل ضعيف للضغط على الجذر خارج الحفرة السنخية. للتخلص من المقاومة المتوسطة ، أدخل إبرة قياس 23 في شوكة الجذر وارفع الضرس الإطباقي. بعد إمساك الضرس بإحكام ، خذ إبرة قياس 23 أخرى وأجبرها على الدخول في الغشاء اللثوي المتوسط اللساني لإنشاء فاصل زمني.
ثم استخدم إبرة قياس 25 وقم بتدويرها ببطء للأمام والشدق. إذا كانت بعض العوائق الأساسية تعيق خلع الضرس ، فاستخدم إبرة قياس 26 لاختراق قمة الجذر وتكرار العمليات. أثناء الاستخراج النهائي ، قلع السن للتأكد من أن التاج يرتفع فوق المستوى الإطباقي وأنه يمكن رؤية جذرين سليمين بوضوح.
بعد استخراج الضرس الأول للفك السفلي بنجاح ، ضع قطنا جافا لوقف النزيف ، وأعد وضع اللسان ، وقم بإدارة التسكين ، وضع الماوس على وسادة تسخين بدرجة حرارة ثابتة حتى يتعافى من التخدير. يمتلئ مقبس الأسنان على الفور بجلطة بعد الاستخراج. لوحظت عملية الشفاء من المقبس لمدة أسبوع واحد.
تشكلت بعض العظام التربيقية الشبيهة بالإسفنج ولكن الجلطة بقيت. في عملية الشفاء ، تم ملء التجويف بعظام الإسفنج بعد أسبوعين مما يشير إلى اكتمال التجديد. تم التعبير عن منظم رئيسي في تمايزات بانيات العظم Sp7 على نطاق واسع في خلايا نخاع العظم في الهامش وهو الجزء الأمامي المكون للعظام.
تحت حالة التوازن ، كانت العظام التربيقية متسقة ومتقاربة مع كتل خلايا نخاع العظم المتناثرة مثل الجزر. في أسبوع واحد بعد الجراحة ، ملأت العديد من الخلايا المعبرة عن Sp7 تجويف الاستخراج بالعظام التربيقية المشكلة حديثا المتناثرة حولها. في أربعة أسابيع بعد الجراحة ، انعكست الحالة وتحولت إلى الاندماج إلى حد كبير في العظام التربيقية .
انخفض نشاط الخلايا المعبرة عن Sp7 إلى مستوى يقترب من حالة التوازن. يمكن أيضا إجراء ذلك لإظهار عملية تجديد حديثي الولادة. يمكن أن تساعد هذه التقنية الباحثين على كشف الآليات الأساسية لعملية الشفاء والتجديد المتاحة من خلال توفير نموذج فأر جديد.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
نظرة عامة
يقدم هذا البروتوكول طريقة مفصلة لاستخراج الضرس الأول السفلي في الفئران، مما يوفر نموذجاً جديداً للفئران لدراسة التئام وتجدد عظم الفك. وتبحث الدراسة في عملية الالتئام بعد الاستخراج والآليات الخلوية المشاركة في تجدد العظم.
المكونات الرئيسية للدراسة
مجال البحث
- تجديد العظام
- النماذج الفأرية في أبحاث الأسنان
- آليات التئام عظام الفك
خلفية علمية
- الحاجة إلى نماذج متسقة في دراسات تجديد العظام
- فهم الآثار السريرية لالتئام عظم الفك
- رؤى حول آليات الالتئام والتجديد
الطرق المستخدمة
- خلع الضرس الأول السفلي في الفئران المخدرة
- استخدام إبر ذات مقاسات مختلفة لخلخلة السن
- تقييم الالتئام على مدى فترة أربعة أسابيع
النتائج الرئيسية
- تقنية استخلاص ناجحة أدت إلى ملاحظة التئام على مدار أسبوعين
- تكوّن عظم تربيقي جديد وتعبير عن Sp7 في خلايا نخاع العظم
- انخفاض في تعبير Sp7 مما يشير إلى العودة إلى حالة التوازن الداخلي
الاستنتاجات
- تُظهر الدراسة طريقة استخلاص موثوقة تساعد في فهم عمليات تجديد العظام
- يساهم هذا النموذج في تقديم رؤى قيمة حول آليات التئام عظم الفك، وهو أمر ذو أهمية للأبحاث البيولوجية المستقبلية.
الأسئلة الشائعة
الأهمية التنفيذية للصناعة
يوفر نموذج التئام سنخ خلع الضرس السفلي لدى الفئران منصة قياسية داخل الجسم الحي لدراسة تجديد العظم السنخي والتعظم الغشائي. ويتيح هذا النموذج تقليل المخاطر الميكانيكية والتحقق من الأهداف لمسارات التئام العظام، مما يدعم مراحل الاكتشاف المبكرة والأبحاث الانتقالية في تجديد الأنسجة الهيكلية. كما تسهل إمكانية تكرار هذا النموذج وأهميته البيولوجية اتخاذ قرارات التقدم المعدلة حسب المخاطر في محافظ البحث والتطوير قبل السريرية في مجال طب الأسنان والوجه والجمجمة.
التطبيقات الاستراتيجية في البحث والتطوير في مجال الصيدلة الحيوية
الاكتشاف المبكر والتحقق من الهدف
- يتيح استجواب المسارات المكونة للعظم والمنظمات الخلوية مثل Sp7 في سياق محكوم داخل الجسم الحي.
- يدعم تقليل المخاطر البيولوجية من خلال توفير نموذج متسق للتحقق الوظيفي من الأهداف في دراسات تجديد العظام.
- يعزز الثقة التنبؤية في اختيار المسارات المرشحة لإصلاح الأنسجة الهيكلية.
الفحص وتطوير المقايسة
- يوفر نظاماً بيولوجياً مُصادقاً لتقييم تدخلات التئام العظام والمؤشرات الجزيئية.
- يدعم توحيد المقايسات وقابلية تكرارها من خلال نقاط نهاية جراحية ونسيجية متسقة.
- يتيح التقييم الكمي لتكوين العظام والنشاط الخلوي بعد عملية الخلع.
الأبحاث الانتقالية وما قبل السريرية
- يتماشى مع الآليات ذات الصلة بأمراض التئام عيوب عظم الفك لاستكشاف المؤشرات الحيوية الانتقالية.
- يدعم الاستمرارية بدءاً من مرحلة الاكتشاف وصولاً إلى التحقق قبل السريري من استراتيجيات تجديد العظام.
- يقلل من الغموض الآلي في اختيار النماذج قبل السريرية للتطبيقات السنية والوجهية القحفية.
تكامل مسار العمل والتدفق التشغيلي
يقع هذا النموذج عند الواجهة الفاصلة بين مرحلة الاكتشاف المبكر والتحقق قبل السريري، مما يتيح اختبار الفرضيات وإجراء الدراسات الميكانيكية في سير عمل تجديد العظام.
- بيولوجيا الاكتشاف: تدعم الاستقصاء القائم على الفرضيات حول منظمات تكوين العظم والتئامه.
- الفحص: توفر نقاط نهاية قابلة للتكرار لتقييم التدخلات المرشحة والمؤشرات الجزيئية.
- التحليلات: تقدم قراءات كمية نسيجية ومناعية فلورية للتحليل المقارن.
- البحث الانتقالي: تربط نتائج الاكتشاف بالنماذج قبل السريرية ذات الصلة بإصلاح عظام الفك.
- إعادة الاستخدام المؤسسي: تؤسس منصة قابلة لإعادة الاستخدام داخل الجسم الحي لأبحاث تجديد العظام المستمرة.
التأثير التشغيلي والمؤسسي
- القيمة العلمية: تزيد من الثقة التنبؤية وتقلل من الغموض الميكانيكي في أبحاث التئام العظام.
- القيمة التشغيلية: توحد الإجراءات الحيوية والتقييمات النسيجية لضمان القابلية للتكرار.
- القيمة الاستراتيجية: تدعم قرارات المضي قدماً أو التوقف فيما يتعلق بأهداف ومسارات تجديد العظام.
- تأثير المحفظة: تتيح تحديد الأولويات لبرامج إصلاح الأنسجة الهيكلية بناءً على تقييم المخاطر.
اعتبارات التنفيذ
- يتطلب خبرة في التقنيات الجراحية للفئران وعلم أنسجة العظام.
- يتطلب الوصول إلى البنية التحتية للمجهر المجسم، والصبغ النسيجي، والفلورة المناعية.
- يستلزم توحيد البروتوكولات الجراحية والتحليلية بين الفرق المختصة.
- يقتصر على نماذج الفك السفلي للفئران؛ ولا يمكن تطبيقه على أنظمة أخرى وفقاً للتحقق الحالي.
- تشمل القيود العملية متطلبات المهارات التقنية والقيود الخاصة بالنموذج المستخدم.
