بروتوكول لبناء نموذج جرح الفئران لمرض السكري من النوع 1

العديد من تفاصيل عملية نمذجة جرح السكري من النوع 1 عرضة للخطأ. إنه تحد صعب للباحثين ذوي الخبرة. نتيجة لذلك ، من الضروري استخدام هذا البروتوكول.

بأبسط طريقة ممكنة ، يمكن لهذه التقنية أن تكرر بشكل فعال بعض خصائص جروح السكري المزمنة مثل عدم التئام الجروح ، وتأخر إعادة الظهارة ، وتقليل تكوين الأوعية. يجب استخدام محلول الستربتوزوتوسين مباشرة بعد التحضير. عند إنشاء الجرح ، انظر إلى أنه يجب تنظيم حجم وموقع الجرح.

ابدأ بإذابة مسحوق الستربتوزوتوسين بكمية مناسبة من 0.1 مول لكل لتر من سيترات الصوديوم لتحقيق تركيز 1٪ ورجه لمدة 30 ثانية باستخدام مذبذب الدواء قبل وضعه في صندوق جميل. للحقن داخل الصفاق من محلول الستربتوزوتوسين 1 ٪ ، أمسك الفئران وفضح جلد البطن في موقع الحقن. تطهير موقع الحقن مرتين باستخدام كرة القطن غارقة في 75 ٪ الكحول ووضع رأس الفئران تحت البطن.

أدخل الإبرة موازية لخط الوسط البطني عند 45 درجة. ثم قلل زاوية الإبرة إلى 30 درجة وأدخل ملليمترين إلى ثلاثة ملليمترات. اسحب سدادة الإبرة برفق ، وحقن محلول الستربتوزوتوسين ، واسحب الإبرة قبل وضع قطعة قطن.

لقياس مستويات الجلوكوز في الدم السببية في الساعة 9:00 صباحا في اليوم 3 واليوم 7 ، أوجد موقع الوريد الذيلي. تطهير ذيل الفئران مرتين باستخدام 75٪ كحول قبل ثقب الوريد الذيلي للحث على النزيف وقياس نسبة الجلوكوز في الدم باستخدام جهاز قياس السكر. بمجرد الانتهاء من ذلك ، أوقف النزيف بقطعة قطن.

احلق منطقة 5 × 5 سم على الجانب الظهري للفأر باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية قبل يوم واحد من نمذجة الجرح. امسح المنطقة المحلوقة بكرة قطنية مالحة عادية دافئة واتركها تجف لتطبيق كريم مزيل الشعر لمدة خمس دقائق. نظف المنطقة بالشاش واغسل أي كريم مزيل شعر متبقي بمحلول ملحي طبيعي دافئ.

ثم تطهير الجلد الظهري مرتين باستخدام كرات القطن غارقة في اليود ، و 75 ٪الكحول في الجولات البديلة. بعد التجفيف ، قم بقص الجلد بخزعة دائرية قطرها 20 ملم. اميل الجلد بالملقط ثم استخدم المقص الجراحي لإزالة السماكة الكاملة للجلد على طول علامات القطع المثقوبة.

بمجرد الانتهاء من ذلك ، أوقف النزيف باستخدام كرة قطنية مالحة طبيعية. تغطية الجرح باستخدام شاش الفازلين. تم تحفيز مرض السكري في جميع الفئران بعد ثلاثة أيام من حقن الستربتوزوتوسين ، مع ارتفاع مستوى الجلوكوز في الدم عن 16.7 ملليمول لكل لتر.

استقر مستوى الجلوكوز بعد خمسة أسابيع من الحث. زاد وزن مجموعة السكري تدريجيا بعد حقن الستربتوزوتوسين. انخفض الوزن في الأسبوع 3 وزاد ببطء مرة أخرى من الأسبوع 4.

في المقابل ، زاد وزن فأر المجموعة الطبيعية بشكل مطرد. كان متوسط وزنهم بعد ثلاثة أيام من تحريض مرض السكري أعلى من مجموعة مرضى السكري. كشف التحليل العياني الذي أجري في اليومين 7 و 14 بعد الجرح أن إعادة الظهارة كانت أكثر وضوحا في الفئران في المجموعة الطبيعية منها في مجموعة السكري.

كشفت النتائج الكمية لليوم 7 واليوم 14 أن معدل التئام الجروح كان أقل بكثير في مجموعة مرضى السكري منه في المجموعة العادية. ومع ذلك ، في اليوم 14 ، كان معدل التئام الجروح أعلى من 90 ٪ في مجموعة مرضى السكري. أظهرت جروح السكري فقدانا جزئيا لبصيلات الشعر والغدد الدهنية مع عدد أقل من الشعيرات الدموية المرئية.

في تكوين الأوعية الدموية للجرح الذي تم تحليله بواسطة التلوين المناعي CD31 ، أظهر متوسط الكثافة البصرية لتعبير CD31 أن تكوين الأوعية في موقع الجرح كان أعلى بكثير في الوضع الطبيعي منه في مجموعة السكري. عند نمذجة الجرح ، تأكد من إزالة الجلد بسمك المقدمة بما في ذلك البشرة والأدمة والأنسجة تحت الجلد.