تحسين هشاشة العظام في الفئران باستخدام جسيمات الفضة النانوية

هذه الطريقة لديها القدرة على استخدامها كاستراتيجية سريرية جديدة لالتهاب المفاصل في الركبة. هذه التقنية آمنة وبسيطة للحقن المحلية ، والعلاج فعال في التجارب على. قد تكون جسيمات الفضة النانوية قابلة للتطبيق في أمراض التهابية أخرى وتحتاج إلى مزيد من البحث.

من المهم بعد ذلك توخي الحذر عند حقن حجم الركبة للفئران ، وضمان الإجراء الصحيح. تقييم حشو اليد لمفصل الركبة عند الركبتين وتجنب أي تسرب للدواء. ابدأ بوضع فأر مخدر على طاولة جراحية.

قم بلصق أطراف الماوس ، ثم حلق الفراء بشفرة حلاقة. بعد ذلك ، قم بتطهير المنطقة المحلوقة ثلاث مرات باستخدام الدعك بالتناوب بنسبة 0.1٪ يودوفورم والكحول. باستخدام المقص ، قم بعمل شق على الجلد ، وفضح الأنسجة تحت الجلد ورباط الرضفة تحت الجلد بالتتابع.

مع حقنة الأنسولين ملليلتر واحد ، حقن 10 وحدات من كولاجيناز النوع الثاني في تجويف المفصل. خياطة الأنسجة تحت الجلد ، ثم خياطة الجلد. الآن تعقيم المنطقة خياطة مع 0.1 ٪ يودوفورم.

ضع الماوس في أقفاص جيدة التهوية بمجرد استيقاظه من التخدير. ابدأ بإضافة 400 ميكرولتر من الكولاجين من النوع الأول إلى أنبوب طرد مركزي صغير سعة 1.5 ملليلتر يوضع على الجليد. الآن ، أضف 200 ميكرولتر من PBX ، واخلطها جيدا وضع الأنابيب على الجليد.

أضف 400 ميكرولتر من جسيمات الفضة النانوية إلى هذا المعلق، مما يجعل تركيز الجسيمات النانوية النهائي ملي مول واحد. خلط التعليق جيدا. بعد أسبوع واحد من حقن كولاجيناز ، قم بإزالة فئران KOA من أقفاصها.

قبل حقن جسيمات الفضة النانوية ، قم بتخدير الفأر وتحضيره جراحيا كما هو موضح سابقا. استخدم المقص لكشف الجلد والأنسجة تحت الجلد وأربطة الركبة بالتتابع. ثم ، باستخدام إبرة حقنة الأنسولين ملليلتر واحد ، أدخل تجويف المفصل بزاوية 15 درجة وحقن ببطء 20 ميكرولتر من خليط الكولاجين النانوي الفضي.

أثناء الحقن ، سوف ينتفخ مفصل الركبة ، مما يضمن حقن الدواء بنجاح. بعد خياطة وتعقيم موقع الجراحة كما في وقت سابق ، ضع الفئران في أقفاص جيدة التهوية بمجرد زوال التخدير. تعقيم جراحيا وتشريح أطراف الفأر القتل الرحيم.

حصاد مفاصل الركبة بما في ذلك عظم الفخذ والساق ، وإزالة الأنسجة العضلية. اجمع أنسجة مفصل الركبة ، بما في ذلك عظم الفخذ والساق والرباط الرخو المحيط. غلاف في 10٪ فورمالين للحفظ والتثبيت.

بعد التثبيت بين عشية وضحاها من الأنسجة ، قم بتضمين الأقسام في البارافين. باستخدام microtome ، وقطع الأنسجة جزءا لا يتجزأ من 0.4 أقسام سميكة الصغرى. إخضاع الأنسجة لتقنيات تلطيخ مختلفة.

كان متوسط وزن الجسم لفئران KOA أقل بكثير من وزن الفئران في المجموعة الضابطة. كان متوسط وزن جسم الفئران في النوع الثاني من كولاجيناز ومجموعة الجسيمات النانوية الفضية أعلى مقارنة بفئران KOA. أظهر تلطيخ HE أن السماكة الزليلية للفئران في مجموعة KOA كانت أعلى بكثير مقارنة بالمجموعة الضابطة.

تم تقليل السماكة الزليلية للمجموعة المعالجة بالجسيمات النانوية بالنسبة لمجموعة KOA. لوحظ تضخم الأوعية الدموية في الغشاء الزليلي في مجموعة KOA ووجد أنه انخفض بشكل كبير في المجموعة المعالجة بالجسيمات النانوية. كشف تلطيخ Safranin-O عن مصفوفة غضروفية مدمرة في فئران KOA ، بينما أظهرت الفئران المعالجة بمزيج الكولاجين بالجسيمات النانوية مصفوفة غضروفية أفضل بكثير.

كانت درجات السمات المورفولوجية أعلى في المجموعة المعالجة بالكولاجين II بالنسبة للمجموعة الضابطة. أظهر التلوين المناعي الكيميائي انخفاض تسلل العدلات في المناطق الزليلية للفئران المعالجة بالجسيمات النانوية مقارنة بمجموعة KOA. من المهم تجنب انسداد الدواء أثناء حقن الكولاجين من النوع الثاني والعديد من الجسيمات النانوية.

يمكن محاولة التأثير العلاجي للعديد من الجسيمات النانوية على النماذج الحيوانية لإصابة الرباط الصليبي الأمامي.