تقطير عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية غير الباضع في الفئران

يقترح بروتوكولنا طريقة توصيل جديدة غير جراحية ل LPS من القصبة الهوائية إلى الرئة ، بشكل أكثر دقة. يجب على الأشخاص الذين يحاولون هذه الطريقة لأول مرة بذل الكثير من الجهد للعثور على موضع القصبة الهوائية. لتحضير منصة التنبيب ، مرر الخيط عبر الفتحتين واربط نهاياته بالنتوءات الصغيرة في الجزء العلوي من الناهض.

بعد ذلك ، قم بتوصيل شريطين مطاطيين بكل طرف من طرفي مشبك الورق وقم بلصقهما على ظهر الناهض. أخيرا ، ثبت الناهض على القاعدة بزاوية 90 درجة. قم بتجميع القنية على قلم قنية ، وقم بتشغيل ضوء القلم.

بعد ذلك ، قم بتطهير الملقط الجراحي الصغير وماصة باستور باستخدام 70٪ كحول. لتحضير محلول مركب الاختبار ، أضف ثلاثة ملليغرام من عديد السكاريد الدهني ، أو LPS ، في ملليلتر واحد من الرقم الهيدروجيني 7.2 PBS. بعد ذلك ، قم بإذابة 10 ملليغرام من الصوديوم بنتوباربيتال في ملليلتر واحد من محلول ملحي عادي ، وقم بتصفية المحلول باستخدام مرشح حقنة 0.45 ميكرومتر.

ضع الماوس المخدر على منصة التنبيب. ثم ثبت الأسنان الأمامية العلوية بالخيط ، والقدمين الأماميتين بالأشرطة المطاطية. باستخدام ملاقط ، اسحب اللسان للخارج وأمسكه.

ادفع القنية ببطء على طول الفم إلى لسان المزمار الفك السفلي. حدد موقع القصبة الهوائية بضوء قلم القنية وأدخل القنية فيه ببطء. ثم اسحب قلم التنبيب ، وترك القنية في الداخل.

أدخل ماصة باستور في مفصل القنية واضغط على الرأس. بعد التنبيب الرغامي الناجح ، باستخدام حقنة دقيقة مسطحة الرأس ، قم بغرس محلول LPS المحضر عند ثلاثة ملليغرام لكل جرعة كيلوغرام من خلال القنية. بمجرد الانتهاء ، أخرج المحقنة الدقيقة والقنية.

أخرج الماوس من منصة التنبيب وضعه في قفص منفصل للتعافي. راقب الحالة التنفسية للفأر حتى يتعافى ويستعيد وعيه. في 12 ساعة بعد تقطير القصبة الهوائية LPS ، تم تقييم التعبير عن السيتوكين الالتهابي ، TNF-alpha ، ونسبة الوزن الجاف إلى الرطب في الرئة ومقارنتها بطرق التقطير الأخرى.

زادت مستويات TNF-alpha في المصل في مجموعة التنبيب الفموي البلعومي غير الباضع بشكل ملحوظ مقارنة بمجموعة التحكم الفارغة. كما تمت زيادة نسبة الوزن الجاف إلى الرطب في الرئة ، لتصل إلى نفس المستوى كما في مجموعة التنبيب الرغامي الجراحي. من المهم عدم خدش القصبة الهوائية في عملية العثور على موقع القصبة الهوائية.

يمكن أيضا استخدام هذه التقنية لتوصيل أدوية أخرى تحتاج إلى الوصول إلى الرئة بطريقة غير باضعة.