Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

Nicolas Huyghe; Elena Benidovskaya; Simon Beyaert; Aur&#233;lie Daumerie; Finoula Maestre Osorio; Frank Aboubakar Nana; Caroline Bouzin; Marc Van den Eynde

doi:10.3791/65220

التألق المناعي المتعدد جنبا إلى جنب مع تحليل الصور المكانية للتقييم السريري والبيولوجي للبيئة الم...

JoVE Journal
Cancer Research

This content is Free Access.

JoVE Journal Cancer Research

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

التألق المناعي المتعدد جنبا إلى جنب مع تحليل الصور المكانية للتقييم السريري والبيولوجي للبيئة المكروية للورم

Full Text

9,757 Views

06:05 min

June 2, 2023

DOI: 10.3791/65220-v

Nicolas Huyghe¹, Elena Benidovskaya¹, Simon Beyaert¹, Aurélie Daumerie⁴, Finoula Maestre Osorio¹, Frank Aboubakar Nana^2,3, Caroline Bouzin⁴, Marc Van den Eynde^1,5

¹Institut de Recherche Expérimentale et Clinique (IREC), Pôle MIRO,Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ²Institut de Recherche Expérimentale et Clinique (IREC), Pôle de Pneumologie, ORL et Dermatologie (PNEU),Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ³Division of Pneumology, Cliniques Universitaires St-Luc,Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ⁴IREC Imaging Platform,Université Catholique de Louvain (UCLouvain), ⁵Institut Roi Albert II, Department of Medical Oncology and Gastroenterology,Cliniques Universitaires St-Luc

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

في هذه المقالة ، تم وصف بروتوكول لتضخيم إشارة التيراميد اليدوي (TSA) متعدد الإرسال المناعي (mIF) جنبا إلى جنب مع تحليل الصور والتحليل المكاني. يمكن استخدام هذا البروتوكول مع أقسام البارافين المضمنة في الفورمالين (FFPE) لتلطيخ اثنين إلى ستة مستضدات لكل شريحة اعتمادا على ماسح الشرائح المتاح في المختبر.

في مختبرنا ، ندرس سرطان القولون والمستقيم البشري. تقدمه إلى المرض النقيلي واستجابته للعلاج ، بما في ذلك العلاج المناعي. نحن نحاول إيجاد مؤشرات حيوية تنبؤية ونذير جديدة من خلال التحقيق في البيئة المكروية المناعية للورم والميكروبيوم داخل الورم في المرض الأولي والنقيلي.

في مشروعنا ، نقوم حاليا بتنفيذ العديد من التقنيات مثل تسلسل الحمض النووي الريبي ، وتسلسل الإكسوم الكامل ، وتسلسل TCR لتحليل الحمض النووي الخالي من الخلايا ، والتألق المناعي ، وتهجين معهد التألق. في هذه اللحظة ، يتمثل التحدي الرئيسي الذي يواجهنا في الجمع بين تلطيخ تهجين معهد التألق مع التألق المناعي المتعدد لتضخيم إشارة التيراميد لدراسة التفاعل بين الميكروبيوم والخلايا المناعية. طريقتنا قوية وقابلة للتكرار وسهلة الاستخدام وفعالة من حيث التكلفة.

يمكن إعداده في أي مختبر يمتلك ماسح ضوئي فلوري بالإضافة إلى أنه يمكن استخدام الطريقة مع أي جسم مضاد IHC متاح تجاريا على عكس المجموعات المتاحة تجاريا والتي عادة ما يتم تحسينها للوحة محدودة من المستضدات.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos