فبراير 9, 2024
يتميز هذا البروتوكول بمجموعة من المقايسات الوظيفية للعدلات لاستخدامها كطريقة فحص لتغطية الوظائف من مسارات الإشارات المختلفة. يتضمن البروتوكول تقييما أوليا وبسيطا لصلاحية الخلية ، والنقاء ، وإنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية ، والهجرة في الوقت الفعلي ، والبلعمة ، واقتراح أولي لمصائد العدلات خارج الخلية.
يوفر بروتوكول NeutroFun Screen مجموعة من الاختبارات الوظيفية التي تستخدم مواد كيميائية منخفضة التكلفة ويمكن إجراؤها في تجربة واحدة من العدلات الطازجة. وهذا يسمح بإجراء تقييم أولي لبعض وظائف العدلات الرئيسية لتوجيه دراسات متابعة أكثر شاقة وتكلفة. تستخدم أبحاث العدلات ظروف تعديل مختلفة.
مثل السيتوكينات والببتيدات والمنتجات الميكروبية والمحفزات الفيزيائية. بالإضافة إلى ذلك ، يحلل قياس التدفق الخلوي ، multiomics ، أجهزة الموائع الدقيقة والكيمياء الخلوية المناعية. العلامة التجارية الواسعة من الظروف والمقايسات المستخدمة مجتمعة تجعل سير عمل أبحاث العدلات طويلا وشاقا ومكلفا.
عادة في هذه التخفيضات ، عدد الحالات التي تم اختبارها أو عدد الاختبارات التي تم إجراؤها ، تتطلب الأساليب الحالية الحديثة تكوينات واسعة النطاق والعديد من الخلايا وإجراءات التحضير الطويلة. يوفر بروتوكولنا NeutroFun Screen نهجا أسرع وأكثر فعالية من حيث التكلفة لتقييم وظائف الخلية مقارنة بالطرق الأخرى. ويتحقق ذلك من خلال الجمع بين التحليلات المختلفة داخل البروتوكول، مع الحفاظ على الدقة والشمولية في النتائج.
أجرى باحثان سير العمل هذا في وقت واحد للحصول على نظرة عامة سريعة على وظيفة العدلات. يقوم الباحث الأول بعزل PMNs ، وضبط التركيز واحتضان أنظمة التنشيط ، بينما يقوم الباحث الثاني بإعداد المواد للحالات اللاحقة. ثم يقوم الباحث الأول بإجراء البلعمة ، ومقايسات NBT اللونية بينما يقوم الباحث الثاني بإجراء اختبارات الهجرة في الوقت الفعلي واختبارات شرائح NBT.
يوفر بروتوكول فحص NeutroFun مجموعة من الاختبارات الوظيفية للخلايا المتعادلة، وذلك باستخدام مواد كيميائية منخفضة التكلفة في تجربة واحدة. ويسهل هذا البروتوكول إجراء تقييم أولي للوظائف الرئيسية للخلايا المتعادلة، مما يساعد في تصميم دراسات أكثر تفصيلاً.
يُعد الفرز السريع والمتعدد لوظائف الخلايا المتعادلة أمراً بالغ الأهمية في المراحل المبكرة من اكتشاف أدوية المناعة، مما يسمح باختبار الفرضيات بكفاءة وتقليل المخاطر الميكانيكية. يوفر بروتوكول NeutroFun Screen نظرة شاملة واقتصادية على حيوية الخلايا المتعادلة، وإنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS)، والهجرة، والبلعمة، وتكوين مصائد الخلايا خارج الخلوية (NET)، مما يدعم فرز المحافظ الدوائية وتحديد الأولويات. ويعمل هذا النهج على تحقيق أقصى استفادة من العينات وتسريع عملية اتخاذ القرار عند نقاط التحول الرئيسية في مرحلة الاكتشاف.
يأتي فحص NeutroFun Screen في المرحلة الفاصلة بين الاكتشاف المبكر وتحديد المركبات الرائدة، مما يتيح إجراء توصيف وظيفي سريع قبل البدء في الدراسات قبل السريرية التي تتطلب موارد كثيفة.