التحضير خارج الجسم الحي لشريحة الحبل الشوكي لتسجيل المشبك التصحيحي للخلية الكاملة في الخلايا العصبية الحركية أثناء تحفيز الحبل الشوكي
September 8th, 2023
يصف هذا البروتوكول طريقة تستخدم مشبك رقعة لدراسة الاستجابات الكهربائية للخلايا العصبية الحركية لتحفيز الحبل الشوكي (SCS) بدقة زمانية مكانية عالية ، والتي يمكن أن تساعد الباحثين على تحسين مهاراتهم في فصل الحبل الشوكي والحفاظ على صلاحية الخلية في وقت واحد.
يمكن أن يساعد تحفيز الحبل الشوكي المرضى على حل معظم وظائف الحركة بعد الإصابة. معظم الخلايا العصبية هي لتنفيذ سلوكيات الوضع الحسي. يمكن أن تساعد دراسة الاستجابة الكهربائية لمعظم الخلايا العصبية في فهم المنطق الأساسي للتعديل العصبي للحمل الشوكي.
مشبك التصحيح هو الطريقة القياسية الذهبية للتسجيلات الكهربية الخلوية ذات الدقة الزمانية المكانية العالية للغاية. لذلك ، تصف هذه الدراسة طريقة تستخدم مشبك رقعة لتسجيل خصائص تحفيز الأبهر والاستجابات الخلوية للخلايا العصبية الحركية على نطاق خلية واحدة في وقت واحد. بالمقارنة مع مشبك رقعة الدماغ ، فإن مشبك رقعة الحبل الشوكي أكثر صعوبة ، لأن الحبل الشوكي محمي جيدا بواسطة القناة الفقرية ذات الحجم الصغير.
لذلك ، يوفر هذا البروتوكول تفاصيل فنية في التشريح الدقيق السريع للحبل الشوكي والصيانة العكسية للحصول على صلاحية أفضل للخلية. يسمح مشبك التصحيح بفهم فريد لعمليات النقل المشبكية وفهم إمكانات الفعل وأنشطة نمط الترميز عن طريق تحفيز الحبل الشوكي.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
نظرة عامة
تقدم هذه الدراسة بروتوكولًا يستخدم تقنية تثبيت الرقعة للتحقيق في الاستجابات الكهربائية للخلايا العصبية الحركية بعد تحفيز النخاع الشوكي (SCS) بدقة مكانية زمانية عالية. تسهل الطريقة التسجيل المتزامن لخصائص التحفيز المختلفة والاستجابات الخلوية على نطاق خلية واحدة، وهو أمر حاسم لتعزيز فهم تعديل النخاع الشوكي الحركي.
مكونات الدراسة الرئيسية
مجال العلم
- علم الأعصاب
- الفيزيولوجيا الكهربية
- وظيفة الخلايا العصبية الحركية
الخلفية
- من المعروف أن تحفيز النخاع الشوكي (SCS) يساعد في التعافي من الحركة بعد الإصابة.
- الخلايا العصبية الحركية ضرورية لتنفيذ السلوكيات الحسية الحركية.
- توفر تقنية تثبيت الرقعة تسجيلات دقيقة للفيزيولوجيا الكهربية الخلوية.
- يمكن أن يكشف دراسة استجابات الخلايا العصبية الحركية عن آليات تعديل النخاع الشوكي الحركي.
غرض الدراسة
- تفصيل طريقة لتسجيل تثبيت الرقعة الفعّال من الخلايا العصبية الحركية الشوكية.
- للحفاظ على حيوية الخلية أثناء تشريح النخاع الشوكي.
- لتعزيز المعرفة عن عمليات النقل المشبكي وإمكانات الفعل.
الطرق المستخدمة
- تستخدم الدراسة طريقة تثبيت الرقعة.
- النموذج البيولوجي المستخدم هو الخلايا العصبية الحركية من أنسجة النخاع الشوكي للفئران.
- تشمل الخطوات الحرجة التجزيء المجهري للنخاع الشوكي والحفاظ على ظروف باردة جدًا.
- يتم تسجيل الخلايا العصبية عن طريق التثبيت عند -70 ملي فولت أثناء التحفيز بمختلف السعة.
- يتم توفير بروتوكولات مفصلة لتحضير العينات وتحديد موقع الإلكترودات.
النتائج الرئيسية
- تلتقط الطريقة بشكل فعال الاستجابات الخلوية المتنوعة لتحفيز النخاع الشوكي (SCS).
- يتم تسجيل إمكانات الفعل، مما يظهر خصائص إطلاق فورية ومتأخرة.
- بعد التحفيز، يتم ملاحظة إمكانات الفعل العفوية، مما يشير إلى قابلية الخلايا العصبية للاستثارة.
- تعزز النتائج فهم وظيفة الخلايا العصبية الحركية تحت ظروف التحفيز.
الاستنتاجات
- يعزز هذا البروتوكول القدرة على دراسة سلوك الخلايا العصبية الحركية واستجاباتها لتحفيز النخاع الشوكي.
- توفر النتائج رؤى حول الآليات العصبية الكامنة وراء التعافي من وظيفة الحركة.
- فهم هذه الآليات أمر حيوي لتطوير استراتيجيات علاجية لإصابات النخاع الشوكي.
الأسئلة الشائعة
Chapters in this video
0:00
Introdution
1:53
Spinal Cord Dissection for the Whole‐Cell Patch‐Clamp Recording in Motor Neurons
3:26
Preparation of Spinal Cord Slice for the Whole‐Cell Patch‐Clamp Recording in Motor Neurons
4:30
Patch‐Clamp Recording to Study the Electrical Responses of Motor Neurons to Spinal Cord Stimulation
