أكتوبر 20, 2023
يحدد هذا البروتوكول عزل الخلايا النجمية المنقاة والخلايا الدبقية الصغيرة من الحبل الشوكي للفأر البالغ ، مما يسهل التطبيقات اللاحقة مثل تحليل الحمض النووي الريبي وزراعة الخلايا. ويشمل طرق وإجراءات تفكك الخلايا التفصيلية المصممة لتحسين جودة وإنتاجية الخلايا المعزولة.
يهدف بحثنا إلى توصيف مجموعات معينة من الخلايا في الجهاز العصبي المركزي ، وتحديدا الحبل الشوكي ، باستخدام نماذج ما قبل السريرية للمرض. ونحن نحاول تحديد كيفية تأثر هذه الخلايا في ظل الظروف المرضية وفي نقاط زمنية مختلفة. قد يكون من الصعب تحليل الخلايا ، خاصة في الجهاز العصبي المركزي لأن الخلايا في الدماغ والحبل الشوكي تشكل مصفوفة معقدة للغاية وكل شيء متصل بإحكام شديد ، لذلك قد يكون من الصعب عزل هذه الخلايا دون الإضرار بالنظام.
يعالج بروتوكولنا القيود في الأساليب الحالية لدراسة أمراض الحبل الشوكي عن طريق عزل الخلايا النجمية الدبقية الصغيرة القابلة للحياة بكفاءة عن الحبل الشوكي للفأر البالغ الصغير الغني بالمايلين. وهذا يتيح إجراء البحوث في المختبر حول الأمراض المرتبطة بالحبل الشوكي في التحليل النهائي ، وسد فجوة بحثية حاسمة. يقدم هذا البروتوكول العديد من المزايا مثل تحليل الخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة في ظل الظروف المرضية وفي نقاط زمنية محددة.
كما أنه يركز بشكل فريد على عزل الخلايا الدبقية عن هذا الحبل الشوكي البالغ وحده ، باستثناء تورط الدماغ. هذا يسمح للباحثين بدراسة أمراض الحبل الشوكي على المستوى الخلوي.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تحدد هذه الدراسة خصائص مجموعات الخلايا في الجهاز العصبي المركزي، مع التركيز على عزل الخلايا النجمية والخلايا الميكروغليا من الحبل الشوكي للفأر البالغ. باستخدام بروتوكول محسن، يتيح البحث التطبيقات اللاحقة مثل تحليل الحمض النووي الريبي وزراعة الخلايا، مما يعالج التحديات في دراسة أمراض الحبل الشوكي.
Efficient isolation of pure astrocytes and microglia from adult mouse spinal cord enables disease-relevant, cell-specific analyses critical for neuroinflammation and neurodegeneration research. This capability supports mechanistic de-risking and predictive confidence at the discovery and preclinical interface, particularly for spinal cord pathologies. The protocol's focus on adult tissue and spinal cord specificity enhances translational continuity and portfolio decision-making for CNS-targeted therapeutics.
This protocol integrates into the discovery-to-preclinical continuum by supplying pure glial cell populations for hypothesis testing, assay development, and molecular characterization in spinal cord disease models.