تحليل الوقت الحقيقي للاتصال العصبي بين الأمعاء والدماغ: ديناميكيات الكالسيوم على نطاق واسع في القشرة استجابة لتحفيز الجلوكوز المعوي

يكشف نطاق بحثنا عن الاتصالات العصبية بين الأمعاء والدماغ ، وخاصة دورها في تفضيل الطعام. غالبا ما تم التعامل مع التجارب التي تضمنت العصب المبهم على أنه حزمة واحدة ، لكن الأبحاث الحديثة كشفت أنه يختار الخصائص وخصوصية العضو. لذلك أعتقد أن التحقيق في إحصائياته ، كما تعلمون ، سيجذب الانتباه في المستقبل.

هذه الطريقة لربط القسطرة بالقناة الهضمية مناسبة بتكلفة منخفضة وأقل توغلا وأسهل من الطريقة المقترحة سابقا. تقليديا ، تم ربط القسطرة بالقناة الهضمية عن طريق الخياطة. هنا قمنا بتخفيف الضرر الجراحي للفئران عن طريق استبدال الخياطة بمرفق غراء سيانواكريلات.

في مختبرنا ، نستكشف آلية كيفية تأثير الإجهاد الجسدي والنفسي على التواصل العصبي بين الأمعاء والدماغ في الفئران. للبدء ، استخدم المقص لقطع أنبوب السيليكون بطول دقيق يبلغ سبعة سنتيمترات. باستخدام غراء cyanoacrylate ، قم بإصلاح الخرز البلاستيكي الضئيل ، حوالي ثلاثة ملليمترات من نهاية أنبوب السيليكون.

استئصال قمة إبرة قياس 23 وقطع 1.5 سم من طرف الإبرة. أدخل الجزء المقطوع من الإبرة على الجانب الآخر من الخرزة في أنبوب السيليكون. باستخدام كماشة ، استقط سنتيمترا واحدا من طرف الإبرة.

قم بتوصيل إبرة الحقن المعدلة عيار 23 بحقنة سعة 2.5 ملليلتر. غمد أنبوب سيليكون بطول 15 سم فوق إبرة الحقن قياس 23. اقطع إبرة الحقن 1.5 سم من الحافة وأربطها بأنبوب السيليكون.

للبدء ، ضع الفأر المخدر على طاولة الجراحة ، وقم بمحاذاة فمه القريب من جهاز الاستنشاق. باستخدام شريط لاصق ، قم بتأمين تجويف فم الفأر والساقين الأماميتين والساقين الخلفية على طاولة الجراحة. ضعي كريم إزالة الشعر لإزالة الشعر من الجزء العلوي الأيسر من البطن.

قم بعمل شق جلدي بطول 1.5 سم على الجانب الأيمن من البطن وخمسة ملليمترات أسفل عملية الخنجري. ثم قم بعمل شق بطول 1.5 سم في جدار البطن في نفس موقع شق الجلد الأولي. حرك الفص الكبدي الأيسر برفق بشكل جانبي باستخدام ملقط غير حاد لكشف المعدة.

الآن ، ارفع المعدة وقم بإزالتها برفق من خلال الشق. باستخدام مقص ، قم بإنشاء ثقب ضئيل في البواب. أدخل نهاية القسطرة بحبة في الثقب.

بعد التأكد من الارتباط القوي للقسطرة بالمعدة ، أعد وضع المعدة بعناية إلى وضعها الأصلي. خياطة جدار البطن ، مما يسمح للقسطرة بالخروج خارجيا. ثم أغلق شق الجلد بطريقة مماثلة لإغلاق البطن.

نظف المنطقة التي يتم تشغيلها بمحلول غلوكونات الكلورهيكسيدين وضع الفأر في قفص معقم. للبدء ، قم بتأمين الماوس المخدر على منصة تجسيمية باستخدام قضبان الأذن المساعدة للتخفيف من آثار النبض والتنفس. باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية أو كريم لإزالة الشعر ، قم بإزالة الشعر بعناية من فروة الرأس.

تطهير سطح فروة الرأس بمحلول غلوكونات الكلورهيكسيدين من 0.1 إلى 0.5٪. ضع جل مخدر موضعي على فروة الرأس وانتظر لمدة خمس إلى 10 دقائق. بعد ذلك ، باستخدام المقص ، قم بعمل قطع مستقيم من مؤخرة الرأس إلى الجبهة.

استخدم المشابك لسحب أي جلد زائد يعرض الجمجمة. قم بإزالة النسيج الضام للسمحاق بقطعة قطن. ضع الأسمنت الأكريليكي على الفور على الجمجمة وانتظر لمدة خمس دقائق حتى يجف الأسمنت.

حرك الماوس تحت مجهر استريو مضان. للتصوير ، استخدم مرشح مضان أزرق عريض النطاق مع مصدر ضوء الزئبق. بعد ذلك ، قم بإزالة إبرة القسطرة من نهاية القسطرة.

قم بتطهير أي محتوى متبقي داخل القسطرة الجانبية للماوس باستخدام حوالي 0.03 مل من المحلول الملحي. ثم قم بإزالة القسطرة من الماوس. استنشق الجرعة المناسبة من محلول الجلوكوز بنسبة 10٪ في المحقنة وإرفاقها بالقسطرة.

في برنامج التصوير ، تحقق من التعرف على الكاميرا واضبط معدل الإطارات على 10 هرتز. اضبط الدقة على 512 × 512 بكسل والعمق على 16 بت. انقر فوق زر عملية التسجيل واحصل على بيانات تلقائية لمدة 50 ثانية.

أخيرا ، مع التسريب التدريجي لمحلول الجلوكوز ، سجل بيانات الحالة الفسيولوجية للفأر. كشف النشاط العصبي التلقائي عن تذبذبات عشوائية في الكالسيوم في جميع أنحاء القشرة. أظهرت تغيرات شدة التألق الزمني تذبذبات الكالسيوم بعد نمط قمع الانفجار.

أظهر حقن الجلوكوز تغيرات كبيرة في ديناميكيات الكالسيوم القشرية في غضون أربع إلى ثماني ثوان بعد الانتهاء من إعطاء الجلوكوز مع التنشيط الفوري في القشرة الحركية الثانوية. ومع ذلك ، لم يلاحظ أي تغييرات بعد إدارة المياه. بالمقارنة مع إعطاء الماء ، لوحظت تغيرات كبيرة في نسب شدة التألق في منطقة القشرة الحركية الثانوية بعد حقن الجلوكوز.

أظهرت مستويات التنشيط في مناطق قشرية مختلفة بعد الحقن اختلافات كبيرة فقط في منطقة القشرة الحركية الثانوية.