تحسين نموذج فأر التهاب دواعم السن الناتج عن الرباط للأبحاث قبل السريرية

يبحث مختبرنا في أمراض اللثة، ويفحص كيف يسبب الالتهاب تلف اللثة والعظام في مجموعات مختلفة من الأفراد. نهدف إلى عرقلة التهاب اللثة والتهاب دواعم الأسنان من خلال استهداف لاعبين جدد ومسارات جديدة للمرض. يستخدم نموذج الفأر المبسط الناتج عن الرباط خيطا واحدا مزدوج العقد بين الأسنان، باستخدام أدوات مطبوعة ثلاثية الأبعاد، وسرير الأسنان للفأر، وحامل الربط، الذي يصادف أنه أقل تعقيدا من النماذج التقليدية.

يستخدم هذا النهج تقنية استنشاق التخدير، والتي تؤدي إلى تعافي أسرع للفئران، أقل من 10 دقائق، مقارنة بالنماذج التقليدية التي تستخدم التخدير الحقني، حيث يمكن أن يكون وقت التعافي حوالي 30 دقيقة. لتحضير تجميع سرير الأسنان للفأر، ضع جميع أجزاء سرير الأسنان والغراء على منصة العمل. ثم ثبت قطع تثبيت الرأس في مكانها باستخدام الغراء.

باستخدام شفرة رقم ثلاثة على مقبض شفرة مشرط 15C، قم بتشويش الحواف الحادة في الجزء الخارجي من حامل الربط بزاوية 45 درجة لتقليل الانزعاج أثناء القفل أو الفتح. اربط أي زوايا مستديرة داخلية على قفل حامل الربط. أزل الفلاش من الحواف العلوية والسفلية للطباعة ثلاثية الأبعاد، وقم بإحراط هذه الحواف بزاوية 45 درجة.

قم بإزالة شريحة من كل طرف من حامل الربط بزاوية 45 درجة لمنع إصابة خطيرة للأنسجة الرخوة. تأكد من أن كل طرف في حامل الربط يحتوي على شق على شكل حرف V. إذا كان هذا الشق على شكل حرف V مرئيا، ضع شفرة مشرط 15C برفق في قاعدة الشق.

الآن، وجه الشفرة بعناية نحو السطح الخارجي للطرف وقم بتنقيح قاعدة الشق على شكل حرف V على الحافة الخارجية. إذا لم يكن الشق على شكل حرف V مرئيا، ضع شفرة مشرط 15C في منتصف طرف حامل الربط، وبحركة واحدة متعمدة، قم بقطع ضحل لتكوين شق على شكل V. أثناء تمرير الرباط في الأخاديد، تأكد من أن عقدتين في المنتصف ومستويان عند النظر إليهما من مقدمة حامل الربط.

باستخدام مستكشف الأسنان، تأكد من أن الربط يرتد إلى مكانه دون أن ينزلق عند تطبيق قوة لطيفة بين العقد. لوضع الربط، ضع الفأر المخدر في سرير الأسنان مع ظهره على السرير والأنف قريبا من مخروط الأنف. باستخدام الأربطة المطاطية، ثبت رأس الفأرة وافتح فمه.

لوضع رباط على الجانب الأيمن، أمسك حامل الرباط في اليد اليمنى والمستكشف في اليد اليسرى. ضع طرف المستكشف بلطف تحت التلامس القريب بين الضرس الأول والثاني على الجانب الحنكي. باستخدام طرف المستكشف، المس الأسنان أولا، ثم انزلق للأسفل واستند إلى اللثة لتجنب إلحاق الصدمة بالأنسجة الرخوة.

ضع مقبض المستكشف بزاوية أفقية بمجرد وضعه بشكل صحيح. تأكد من الاستخدام الصحيح لرأس المستكشف لوضع الربط. اربط المستكشف بمنطقة الاتصال القريبة، وثبت الرأس ضد القوى الرجعية.

اسحب الخد باستخدام حامل الربط، ووضع الرباط فوق التلامس القريب بين الضرس الأول والثاني. بعد ذلك، قم بتدوير مقبض حامل الربط حتى 45 درجة، وبمزيج من التأرجح اللطيف والانزلاق، ادفع الرباط عبر نقطة التلامس. باستخدام ملقط إبرة دقيقة، ثبت الخيط الزائد المتصل بالعقدة على الجانب الأيمن.

اسحب الخيط عبر الأسنان باتجاه اليسار، وامرر المقص على طول الخيط حتى يوضع على بعد حوالي 1.5 ملم من العقدة قبل القطع. لتحليل الأشعة المقطعية الدقيقة، افتح البرنامج واضغط على ملف، ثم استيراد صورة. في القائمة المنبثقة، انقر على التصفح.

اذهب إلى المجلد الذي يحتوي على ملفات DICOM لمسح واحد واختر الملف الأول. انقر على الفحص للعثور على أي ملفات أخرى داخل المجلد لنفس العينة الممسوحة ضوئيا واختيارها. ثم، اضغط على موافق. بمجرد بدء تحميل الصور، انقر على Visualize وIsosurface.

غير عتبة الصورة إلى 5,000 وعامل جودة السطح بنسبة مئوية إلى 55. ضع مربعات اختيار لتمكين تلطيف الصورة وسطح القص مع عائد الاستثمار الحالي، ثم انقر على التحديث. لتعديل خصائص المستوى، انقر بزر الفأرة الأيمن على نافذة/مستوى في الأسفل، ثم انقر على تعديل خصائص النافذة/المستوى.

اضبط قيمة كثافة العظام على 2,000 وحافظ عليها ثابتة لجميع القياسات. لتحريك المستويات، استخدم اختصارات لوحة المفاتيح مثل IJK Hide and Show للمستويات الثلاث المختلفة. انقر بزر الفأرة الأيمن وحرك المؤشر للتكبير والتصغير.

اضغط على زر Shift ثم انقر بزر اليسار للتحريك. ثم اضغط على Slice للتحرك وتدوير المستويات. بعد ذلك، انقر على مركز الطائرة لتحريك الطائرة للأمام أو إلى الخلف.

بدلا من ذلك، ضع المؤشر في وسط المستوى المطلوب، واستخدم مفاتيح الأسهم للأعلى والأسفل لتحريك الطائرة شريحة تلو الأخرى. انقر على حافة الطائرة لتدور حول خط مواز لهذه الحافة في مركز المستوى. انقر على زاوية الطائرة للدوران حول الطائرة.

بعد ذلك، وجه شريحة Z، التي تظهر باللون الأزرق في أعلى الشاشة، بحيث تصبح أسطح الأسنان الثلاثة مرئية في نفس الوقت أو بالقرب قدر الإمكان. ثم تمر عبر نفس مستوى شريحة Z حتى تصبح جذور الأضراس الأولى والثانية مرئية، مما يضمن أن التشريح المحيط والقنوات محددة جيدا. محاذاة المحور x مع الجذور الشدية للضرس الأول والثاني عبر الجزء المركزي من كل قناة جذر.

بدلا من ذلك، محاذاة عبر الجذر الظدري للضرس الأول والجذر الدستوبوكي للضرس الثاني. بعد ذلك، استخدم اتجاه شريحة X كمرجع لمحاذاة شريحة Y. محاذاة شريحة Y عموديا موازية عبر جذر الضرس الأول في لوحة شريحة X.

قم بتدوير المستوى لتوجيه الجذر عموديا، ولاحظ أن الخطوط الزرقاء تعبر منتصف الجذر. في لوحة الشريحة Y، لقياس المسافة من وصلة الأسمنتو والمينا، أو CEJ، إلى قمة العظم السنخية أو ABC، ضع المؤشر في أعمق نقطة من الأخدود عند CEJ واضغط 1. ثم ضع المؤشر في النقطة الأقرب إلى ABC واضغط 2.

السهم الأزرق يدل على النقطة الأولى، والنقطة الثانية ترمز إليها بسهم أخضر. إذا لم تظهر الأسهم التي تشير إلى نقاط القياس فورا، مرر السهم فوق المناطق المطلوبة واضغط على مفاتيح الأرقام على لوحة المفاتيح. إذا كان من الصعب تحديد CEJ، استخدم مفاتيح الأسهم للأعلى والأسفل للتمرير بين الشرائح المجاورة لتأكيد موقعها.

عندما يكون تحديد أقرب نقطة في ABC صعبا، قم بقياس عدة نقاط لضمان القياس المتسق. على الرغم من نجاحنا في ورقة البروتوكولات، إلا أن باحثين جدد وجدوا صعوبة في تجميع واستخدام الأدوات المطبوعة ثلاثية الأبعاد، مثل سرير الأسنان للفأر، وحامل الربط. ولمعالجة ذلك، أنشأنا فيديو خطوة بخطوة يشرح للباحثين كيفية تجميع واستخدام هذه الأدوات المطبوعة ثلاثية الأبعاد حتى يمكن استخدامها في بيئة مختبرية.

استخدم فريقنا البحثي دراسات سريرية ونموذج التهاب دواعم السن الناتج عن الرباط المبسط لاكتشاف كيف يمكن استخدام مجموعة من البروتينات المسماة إنفلاماسوم لوقف تطور الالتهاب والتهاب دواعم السن.