-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

AR

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ar

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
تصور بؤر الحمض النووي المفردة التي تقطعت بها السبل في المرحلة G1 من دورة الخلية
تصور بؤر الحمض النووي المفردة التي تقطعت بها السبل في المرحلة G1 من دورة الخلية
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Visualizing Single-Stranded DNA Foci in the G1 Phase of the Cell Cycle

تصور بؤر الحمض النووي المفردة التي تقطعت بها السبل في المرحلة G1 من دورة الخلية

Full Text
3,419 Views
08:30 min
December 22, 2023

DOI: 10.3791/65926-v

Qingyue Zhang1,2, Marc A. Kerzhnerman1,2, Nelson García-Vázquez1,2,3, Gergely Rona1,2,4,5

1Department of Biochemistry and Molecular Pharmacology,NYU Grossman School of Medicine, 2The Laura and Isaac Perlmutter Cancer Center,NYU Langone Health, 3Department of Cell Biology,NYU Grossman School of Medicine, 4Howard Hughes Medical Institute,NYU Grossman School of Medicine, 5Institute of Enzymology, Centre of Excellence of the Hungarian Academy of Sciences,HUN-REN Research Centre for Natural Sciences

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study addresses the detection of single-stranded DNA foci during the G1 phase of the cell cycle, emphasizing the importance of DNA repair mechanisms. Utilizing cell cycle synchronization and RPA2 immunofluorescent staining, the method provides a robust way to visualize DNA damage across various cell cycle stages.

Key Study Components

Research Area

  • DNA damage response
  • Cell cycle synchronization
  • Immunofluorescent staining

Background

  • Importance of DNA repair in maintaining genome stability
  • Limitations of traditional BrdU antibody methods for single-stranded DNA detection
  • Need for better understanding of DNA repair in non-replicating cells

Methods Used

  • RPA2 immunofluorescent staining
  • RPE1 cells as the biological model
  • Cell cycle synchronization followed by hydrogen peroxide treatment

Main Results

  • Successful visualization of RPA2 foci in different cell cycle phases
  • Demonstrated increased foci formation in response to DNA damaging agents
  • Clear distinction from traditional BrdU methods with no observed antibody cross-reactivity

Conclusions

  • The study provides a novel method for visualizing single-stranded DNA foci throughout the cell cycle.
  • This advancement has significant implications for understanding DNA repair processes and their relevance to cancer and aging research.

Frequently Asked Questions

What is the main purpose of this study?
To develop a method for detecting single-stranded DNA foci during the G1 phase of the cell cycle.
How does this method improve upon traditional approaches?
It provides a higher signal-to-noise ratio without the limitations of antibody cross-reactivity seen with BrdU.
What biological model is used in this research?
RPE1 cells are utilized for the experiments.
What are RPA2 foci?
RPA2 foci are markers indicating the presence of single-stranded DNA during repair processes.
Why is it important to study DNA repair in non-replicating cells?
Understanding DNA repair mechanisms can illuminate pathways relevant to diseases like cancer and neurological disorders.
What treatment is used to induce DNA damage in the study?
Hydrogen peroxide is used to induce DNA damage in the cells.
What are the potential applications of this research?
The findings could inform therapeutic strategies for treating various diseases associated with DNA damage.

يقدم البروتوكول التالي الكشف عن بؤر الحمض النووي التي تقطعت بها السبل في المرحلة G1 من دورة الخلية باستخدام مزامنة دورة الخلية متبوعة بتلطيخ RPA2 المناعي.

استجابة تلف الحمض النووي أمر لا غنى عنه للحياة. نظرا لأن الحمض النووي يتعرض باستمرار للعديد من المحركات الضارة ، فإن عدم إصلاحها يؤدي إلى عدم استقرار الجينوم والأمراض. لقد طورنا طريقة تعتمد على الخاصية البيولوجية ل RPA2 ، لتصور مسار الحمض النووي أحادي الشريط أثناء إصلاح الحمض النووي في مراحل دورة الخلية المختلفة.

الطريقة التقليدية للكشف عن الحمض النووي أحادي الشريط تستخدم الأجسام المضادة BrdU. يمكن استخدام هذا النهج لتكرار الخلايا بنشاط. بالإضافة إلى ذلك ، يميل هذا الجسم المضاد إلى التفاعل المتبادل مع نظائر النوكليوتيدات الأخرى ، مما يحد من استخدامها.

على عكس BRDU ، فإن نهجنا لديه نسبة إشارة إلى ضوضاء أعلى ، مما يجعله قابلا للاستخدام في كل مرحلة من مراحل الدورة. يعد فهم عمل مسارات إصلاح الحمض النووي المختلفة في مراحل دورة الخلية المختلفة والخلايا التي يحتمل أن تكون غير قابلة للتكاثر أمرا بالغ الأهمية. يوفر بروتوكولنا نهجا وأداة جديدة لتصور بؤر الحمض النووي المفردة التي تقطعت بها السبل ، حيث تكون الأساليب الكلاسيكية التي تستخدم BrdU محدودة.

يمكن أن يكون الفهم الشامل لعمليات إصلاح الحمض النووي بمثابة أهداف علاجية لعلاج السرطان والشيخوخة والأمراض العصبية. معظم خلايانا متمايزة نهائيا؛ ومن ثم لا تتضاعف وتنقسم. من الأهمية بمكان الحصول على فهم أفضل لكيفية إصلاح هذه الخلايا لآفات الحمض النووي المختلفة.

لذلك ، سيركز مختبرنا بشكل أساسي على عمليات إصلاح الحمض النووي بعد النسخ المتماثل وتطوير أدوات جديدة لدراستها.

Explore More Videos

هذا الشهر في JoVE العدد 202

Related Videos

عامين والتصوير الثلاثي الابعاد لايف خلية من البروتينات DNA الاستجابة الأضرار

10:24

عامين والتصوير الثلاثي الابعاد لايف خلية من البروتينات DNA الاستجابة الأضرار

Related Videos

14.6K Views

تصور miniSOG معلم البروتينات إصلاح الحمض النووي في الجمع مع الكترون طيفية تصوير (ESI)

13:06

تصور miniSOG معلم البروتينات إصلاح الحمض النووي في الجمع مع الكترون طيفية تصوير (ESI)

Related Videos

10.5K Views

تقنيات الفحص المجهري [كنفوكل] لدراسة تفاعلات البروتين البروتين وحركية في الحمض النووي آفات متقدمة

12:43

تقنيات الفحص المجهري [كنفوكل] لدراسة تفاعلات البروتين البروتين وحركية في الحمض النووي آفات متقدمة

Related Videos

11.5K Views

الجمع بين الخلية الانقسامية المزامنة وعالية الدقة [كنفوكل] الفحص المجهري لدراسة دور البروتينات المتعددة الوظائف دورة الخلية أثناء الانقسام

08:33

الجمع بين الخلية الانقسامية المزامنة وعالية الدقة [كنفوكل] الفحص المجهري لدراسة دور البروتينات المتعددة الوظائف دورة الخلية أثناء الانقسام

Related Videos

15K Views

وصف عمليات إصلاح الحمض النووي في فواصل الحمض النووي عابرة وطويلة الأمد مزدوجة-حبلا مجهر الفلورة

08:31

وصف عمليات إصلاح الحمض النووي في فواصل الحمض النووي عابرة وطويلة الأمد مزدوجة-حبلا مجهر الفلورة

Related Videos

9.7K Views

التصوير بالخلايا الحية لتقييم ديناميات توقيت الطور ومصير الخلية بعد اضطرابات المغزل الميتوتيك

07:14

التصوير بالخلايا الحية لتقييم ديناميات توقيت الطور ومصير الخلية بعد اضطرابات المغزل الميتوتيك

Related Videos

8.8K Views

التصور من الحمض النووي إصلاح البروتينات التفاعل من قبل immunofluorescence

07:55

التصور من الحمض النووي إصلاح البروتينات التفاعل من قبل immunofluorescence

Related Videos

11.2K Views

تقييم استئصال نهاية الحمض النووي المزدوج العالمي باستخدام وسم الحمض النووي BrdU إلى جانب تصوير تمييز دورة الخلية

06:44

تقييم استئصال نهاية الحمض النووي المزدوج العالمي باستخدام وسم الحمض النووي BrdU إلى جانب تصوير تمييز دورة الخلية

Related Videos

4.6K Views

رسم خرائط كثافة الحمض النووي المطلقة في نوى الخلية باستخدام الفحص المجهري للتوطين أحادي الجزيء

10:57

رسم خرائط كثافة الحمض النووي المطلقة في نوى الخلية باستخدام الفحص المجهري للتوطين أحادي الجزيء

Related Videos

837 Views

تحديد مدة المرحلة S باستخدام 5-Ethynyl-2'-deoxyuridine Inincorporated في Saccharomyces cerevisiae

08:40

تحديد مدة المرحلة S باستخدام 5-Ethynyl-2'-deoxyuridine Inincorporated في Saccharomyces cerevisiae

Related Videos

1.9K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code