RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ar
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/65926-v
Qingyue Zhang1,2, Marc A. Kerzhnerman1,2, Nelson García-Vázquez1,2,3, Gergely Rona1,2,4,5
1Department of Biochemistry and Molecular Pharmacology,NYU Grossman School of Medicine, 2The Laura and Isaac Perlmutter Cancer Center,NYU Langone Health, 3Department of Cell Biology,NYU Grossman School of Medicine, 4Howard Hughes Medical Institute,NYU Grossman School of Medicine, 5Institute of Enzymology, Centre of Excellence of the Hungarian Academy of Sciences,HUN-REN Research Centre for Natural Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study addresses the detection of single-stranded DNA foci during the G1 phase of the cell cycle, emphasizing the importance of DNA repair mechanisms. Utilizing cell cycle synchronization and RPA2 immunofluorescent staining, the method provides a robust way to visualize DNA damage across various cell cycle stages.
يقدم البروتوكول التالي الكشف عن بؤر الحمض النووي التي تقطعت بها السبل في المرحلة G1 من دورة الخلية باستخدام مزامنة دورة الخلية متبوعة بتلطيخ RPA2 المناعي.
استجابة تلف الحمض النووي أمر لا غنى عنه للحياة. نظرا لأن الحمض النووي يتعرض باستمرار للعديد من المحركات الضارة ، فإن عدم إصلاحها يؤدي إلى عدم استقرار الجينوم والأمراض. لقد طورنا طريقة تعتمد على الخاصية البيولوجية ل RPA2 ، لتصور مسار الحمض النووي أحادي الشريط أثناء إصلاح الحمض النووي في مراحل دورة الخلية المختلفة.
الطريقة التقليدية للكشف عن الحمض النووي أحادي الشريط تستخدم الأجسام المضادة BrdU. يمكن استخدام هذا النهج لتكرار الخلايا بنشاط. بالإضافة إلى ذلك ، يميل هذا الجسم المضاد إلى التفاعل المتبادل مع نظائر النوكليوتيدات الأخرى ، مما يحد من استخدامها.
على عكس BRDU ، فإن نهجنا لديه نسبة إشارة إلى ضوضاء أعلى ، مما يجعله قابلا للاستخدام في كل مرحلة من مراحل الدورة. يعد فهم عمل مسارات إصلاح الحمض النووي المختلفة في مراحل دورة الخلية المختلفة والخلايا التي يحتمل أن تكون غير قابلة للتكاثر أمرا بالغ الأهمية. يوفر بروتوكولنا نهجا وأداة جديدة لتصور بؤر الحمض النووي المفردة التي تقطعت بها السبل ، حيث تكون الأساليب الكلاسيكية التي تستخدم BrdU محدودة.
يمكن أن يكون الفهم الشامل لعمليات إصلاح الحمض النووي بمثابة أهداف علاجية لعلاج السرطان والشيخوخة والأمراض العصبية. معظم خلايانا متمايزة نهائيا؛ ومن ثم لا تتضاعف وتنقسم. من الأهمية بمكان الحصول على فهم أفضل لكيفية إصلاح هذه الخلايا لآفات الحمض النووي المختلفة.
لذلك ، سيركز مختبرنا بشكل أساسي على عمليات إصلاح الحمض النووي بعد النسخ المتماثل وتطوير أدوات جديدة لدراستها.
Related Videos
10:24
Related Videos
14.6K Views
13:06
Related Videos
10.5K Views
12:43
Related Videos
11.5K Views
08:33
Related Videos
15K Views
08:31
Related Videos
9.7K Views
07:14
Related Videos
8.8K Views
07:55
Related Videos
11.2K Views
06:44
Related Videos
4.6K Views
10:57
Related Videos
837 Views
08:40
Related Videos
1.9K Views