يونيو 14, 2024
هنا ، نصف نظام nucleofection المصمم لتعزيز كفاءة توصيل الجينات في الخلايا الجذعية العصبية الموسعة (NSCs) المعزولة من منطقة تحت البطين للفئران البالغة. تظهر النتائج أن هذه الطريقة تحسن بشكل كبير اضطراب الجينات في NSCs ، متجاوزة فعالية بروتوكولات النقل التقليدية وتعزز معدل بقاء الخلية.
يركز بحثنا على دراسة كيفية تنظيم مجموعة الخلايا الجذعية العصبية في دماغ الثدييات البالغة. يعد فهم الآليات الجزيئية الداخلية والخارجية التي تنظم الخلايا الجذعية العصبية داخل المنافذ العصبية أمرا مهما لفهم البيولوجيا وتطوير التطبيقات العلاجية المحتملة في المستقبل. لدراسة سلوك الخلايا الجذعية العصبية ، يتم استخدام كل من الأساليب في الجسم الحي وفي المختبر على نطاق واسع.
توفر مزارع الخلايا الجذعية العصبية في المختبر بيئات خاضعة للرقابة وإمكانية التعامل بسهولة مع هذه المجموعة من الخلايا ومراقبتها. تقنيات الحفاظ على التعبير الجيني في المختبر هي نهج متعدد الاستخدامات لدراسة الآليات الجزيئية التي تحكم بيولوجيا الخلية. ومع ذلك ، فإن طريقة فعالة وقابلة للتكرار للإفراط في التعبير عن الجينات المرشحة وهدمها في الخلايا الجذعية العصبية لا تزال صعبة في هذا المجال.
أثبتت طرق النقل التقليدية لتوصيل الجينات فعاليتها في خلايا الجهاز العصبي المركزي. علاوة على ذلك ، تؤثر هذه الطرق على صلاحية الخلية ووظائفها. وبالتالي ، فإن تحسين الأساليب البديلة أمر بالغ الأهمية لمعالجة التعبير الجيني في الخلايا الجذعية العصبية.
مع هذا البروتوكول ، نقدم نظاما محسنا للنواة يحقق كفاءة عالية في توصيل الجينات في مزارع الخلايا الجذعية العصبية من منطقة البطين تحت البطين البالغة ، إلى جانب معدلات بقاء أعلى من 80٪
تقدم هذه الدراسة نظامًا جديدًا للنوكليوفكشن يهدف إلى تعزيز كفاءة توصيل الجينات في الخلايا الجذعية العصبية (NSCs) المشتقة من المنطقة تحت البطينية للفئران البالغة. تظهر النتائج تحسينات كبيرة في اضطراب الجينات ومعدلات بقاء الخلايا مقارنة بطرق التلقيح التقليدية.
Efficient gene delivery and manipulation in adult neural stem cells (NSCs) is a critical bottleneck for neurobiology-focused drug discovery and target validation. The improved nucleofection protocol for NSCs from the adult murine subventricular zone enables robust gene perturbation with high cell viability, directly supporting mechanistic de-risking and predictive confidence in early discovery. This capability strengthens translational continuity for CNS target exploration and functional genomics in preclinical pipelines.
This nucleofection protocol integrates into the discovery-to-preclinical continuum, enabling gene function studies from early target validation through lead identification in CNS research.