Name: أخذ عينات الدم وقياس الهرمونات لتحديد المرحلة في دورة المبيض في Marmosets (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-05T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: تعلم بروتوكول أخذ عينات الدم لقياس مستويات الهرمونات في المارموست لتحديد مرحلة الإباضة بدقة. هذه الطريقة تُحسّن الوصول للأوردة وتدعم إدارة التكاثر في الأبحاث البيولوجية التناسلية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>تقييم دورة المبيض في Marmosets عن طريق جمع الدم وتحليل الهرمونات

<ol><li>Kholkute, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+progesterone+levels+throughout+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Primates%22%5BJournal%5D)">Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> Primates. 25 (1), 123-126 (1984).</li>
<li>Harding, R. D., Hulme, M. J., Lunn, S. F., Henderson, C., Aitken, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+progesterone+levels+throughout+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> J Med Primatol. 11 (1), 43-51 (1982).</li>
<li>Gilchrist, R. B., Wicherek, M., Heistermann, M., Nayudu, P. L., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+follicle-stimulating+hormone+and+follicle+populations+during+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Changes in follicle-stimulating hormone and follicle populations during the ovarian cycle of the common marmoset.</a> Biol Reprod. 64 (1), 127-135 (2001).</li>
<li>Gromoll, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+subclass+of+the+luteinizing+hormone%2Fchorionic+gonadotropin+receptor+lacking+exon+10+messenger+RNA+in+the+New+World+monkey+%28Platyrrhini%29+lineage%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">A new subclass of the luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptor lacking exon 10 messenger RNA in the New World monkey (Platyrrhini) lineage.</a> Biol Reprod. 69 (1), 75-80 (2003).</li>
<li>Müller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chorionic+gonadotrophin+beta+subunit+mRNA+but+not+luteinising+hormone+beta+subunit+mRNA+is+expressed+in+the+pituitary+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Chorionic gonadotrophin beta subunit mRNA but not luteinising hormone beta subunit mRNA is expressed in the pituitary of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> J Mol Endocrinol. 32 (1), 115-128 (2004).</li>
<li>Pacchiarotti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+stimulation+protocol+in+IVF%3A+an+up-to-date+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Pharm+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Ovarian stimulation protocol in IVF: an up-to-date review of the literature.</a> Curr Pharm Biotechnol. 17 (4), 303-315 (2016).</li>
<li>Ezcurra, D., Humaidan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+luteinising+hormone+and+human+chorionic+gonadotropin+when+used+in+assisted+reproductive+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">A review of luteinising hormone and human chorionic gonadotropin when used in assisted reproductive technology.</a> Reprod Biol Endocrinol. 12, 95(2014).</li>
<li>Lopez-Gatius, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+response+to+prostaglandin+F%282alpha%29+in+lactating+dairy+cows%3A+A+clinical+update%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Dev%22%5BJournal%5D)">Ovarian response to prostaglandin F(2alpha) in lactating dairy cows: A clinical update.</a> J Reprod Dev. 68 (2), 104-109 (2022).</li>
<li>Marini, R. P., Wachtman, L. M., Tardif, S. D., Mansfield, K., Fox, J. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMarini%2C+RP+%22The+Common+Marmoset+in+Captivity+and+Biomedical+Research%22">The Common Marmoset in Captivity and Biomedical Research</a>. , Elsevier Science. (2018).</li>
<li>Schultz-Darken, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+collection+and+restraint+techniques+used+for+common+marmosets+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Sample collection and restraint techniques used for common marmosets (Callithrix jacchus).</a> Comp Med. 53 (4), 360-363 (2003).</li>
<li>Hopper, J. Common marmosets. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHopper%2C+J+%22Handbook+of+Exotic+Pet%22">Handbook of Exotic Pet</a>. Kubik, M. , 27-42 (2020).</li>
<li>Harlow, C. R., Hearn, J. P., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovulation+in+the+marmoset+monkey%3A+endocrinology%2C+prediction+and+detection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Ovulation in the marmoset monkey: endocrinology, prediction and detection.</a> J Endocrinol. 103 (1), 17-24 (1984).</li>
<li>Ludlage, E., Mansfield, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+care+and+diseases+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Clinical care and diseases of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> Comp Med. 53 (4), 369-382 (2003).</li>
<li>Summers, P. M., Wennink, C. J., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloprostenol-induced+luteolysis+in+the+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Cloprostenol-induced luteolysis in the marmoset monkey (Callithrix jacchus).</a> J Reprod Fertil. 73 (1), 133-138 (1985).</li>
<li>Takahashi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birth+of+healthy+offspring+following+ICSI+in+in+vitro-matured+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Birth of healthy offspring following ICSI in in vitro-matured common marmoset (Callithrix jacchus) oocytes.</a> PLoS One. 9 (4), e95560(2014).</li>
<li>Tomioka, I., Takahashi, T., Shimada, A., Yoshioka, K., Sasaki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birth+of+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29+offspring+derived+from+in+vitro-matured+oocytes+in+chemically+defined+medium%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Birth of common marmoset (Callithrix jacchus) offspring derived from in vitro-matured oocytes in chemically defined medium.</a> Theriogenology. 78 (7), 1487-1493 (2012).</li>
<li>Abe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+marmoset+genome+engineering+by+autologous+embryo+transfer+and+CRISPR%2FCas9+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient marmoset genome engineering by autologous embryo transfer and CRISPR/Cas9 technology.</a> Sci Rep. 11 (1), 20234(2021).</li>
<li>Summers, P. M., Shephard, A. M., Taylor, C. T., Hearn, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+cryopreservation+and+transfer+on+embryonic+development+in+the+common+marmoset+monkey%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">The effects of cryopreservation and transfer on embryonic development in the common marmoset monkey, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 79 (1), 241-250 (1987).</li>
<li>Thomson, J. A., Kalishman, J., Hearn, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsurgical+uterine+stage+preimplantation+embryo+collection+from+the+common+marmoset%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Nonsurgical uterine stage preimplantation embryo collection from the common marmoset.</a> J Med Primatol. 23 (6), 333-336 (1994).</li>
<li>Hanazawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+transabdominal+collection+of+preimplantation+embryos+from+the+common+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive transabdominal collection of preimplantation embryos from the common marmoset monkey (Callithrix jacchus).</a> Theriogenology. 78 (4), 811-816 (2012).</li>
<li>Ishibashi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+embryo+transfer+in+the+common+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29+with+a+reduced+transfer+volume%3A+a+non-surgical+approach+with+cryopreserved+late-stage+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Efficient embryo transfer in the common marmoset monkey (Callithrix jacchus) with a reduced transfer volume: a non-surgical approach with cryopreserved late-stage embryos.</a> Biol Reprod. 88 (5), 115(2013).</li>
<li>Kishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+novel+common+marmoset+embryonic+stem+cell+lines+under+various+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Establishment of novel common marmoset embryonic stem cell lines under various conditions.</a> Stem Cell Res. 53, 102252(2021).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Daskalaki, M., Drummer, C., Behr, R., Heistermann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+alfaxalone+for+short-term+anesthesia+can+confound+serum+progesterone+measurements+in+the+common+marmoset%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Primate+Biol%22%5BJournal%5D)">The use of alfaxalone for short-term anesthesia can confound serum progesterone measurements in the common marmoset: a case report.</a> Primate Biol. 9 (2), 23-28 (2022).</li>
<li>Hodges, J. K., Cottingham, P. G., Summers, P. M., Liang, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+ovulation+in+the+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29+with+human+chorionic+gonadotropin+following+prostaglandin-induced+luteal+regression%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Controlled ovulation in the marmoset monkey (Callithrix jacchus) with human chorionic gonadotropin following prostaglandin-induced luteal regression.</a> Fertil Steril. 48 (2), 299-305 (1987).</li>
<li>Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+reproductive+suppression+by+pheromonal+cues+in+subordinate+female+marmoset+monkeys%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Extension of reproductive suppression by pheromonal cues in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 90 (2), 411-418 (1990).</li>
<li>Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+cues+and+the+suppression+of+reproduction+in+subordinate+female+marmoset+monkeys%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Sensory cues and the suppression of reproduction in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 97 (1), 301-310 (1993).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>AIA-360</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0019945</td><td>قياس الهرمونات (P4 / E2) مركز</td></tr> <tr><td>التخفيف AIA-pack</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0020956</td><td>قياس الهرمونات (P4 / E2) مجموعة</td></tr> <tr><td>الركيزة AIA-pack II</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0020968</td><td>قياس الهرمونات (P4 / E2)</td></tr> <tr><td>AIA-PACK WASH CONCENTRATE</td><td>TOSOH CORPORATION</td><td>0020955</td> قياس <td>الهرمونات (P4 / E2)</td></tr> <tr><td>CMS-1</td><td>CLEA اليابان</td><td></td><td>Marmoset food</td></tr><tr><td>Estrumate</td><td>MSD صحة</td><td></td> <td>PGF2alpha التناظرية (كلوبروستنول)</td></tr> <tr><td>Gonal-f الحقن تحت الجلد 150</td><td>Merck Biopharma Co.، Ltd.</td><td></td><td>FSH</td></tr><tr><td>Gonatropin للحقن العضلي 1000</td><td>ASKA Pharmaceutical Co.، Ltd.</td><td>872413</td><td>hCG</td></tr><tr><td>محلول حقن الصوديوم الهيبارين 5,000 وحدة / 5 مل</td><td>Mochida Pharmaceutical Co.، Ltd.</td><td>224122458</td><td></td></tr><tr><td>مجموعة اختبار الكروماتوجرافي المناعي لجمع الدم للكشف عن موجهة الغدد التناسلية المشيمية الشائعة (المدقق المزدوج)</td> <td>CLEA Japan، Inc.</td><td></td><td>تحديد مستوى CG</td></tr><tr><td>إضاءة مجهر مزدوج الذراع منخفض المستوى LPF-SD</td><td>SHIOKAZE GIKEN</td><td></td><td>مصباح مكتبي لجمع الدم</td></tr> جهاز ضبط جمع <tr><td>الدم Marmoset</td><td>JIC Japan</td><td>JM-1006</td><td>جمع الدم http://www.jic-japan.jp/prd/marmoset/prd016.html البريد الإلكتروني: vi@jic-japan.jp</td></tr><tr><td>Metacam 0.05٪</td> <td>Boehringer Ingelheim Animal Health Japan Co. ، المحدوده.</td><td></td> كوب عينة <td>لعلاج الورم</td></tr><tr><td>الدموي ، 3 مل ، PS ، لقياس الهرمونات Tosoh 360 و AIA-600 II ، 1000 / كيس</td><td>Globe Scientific</td><td></td><td>110913 قياس الهرمونات (P4 / E2)</td></tr> <tr><td>ST AIA-PACK iE2</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025224</td><td>قياس الهرمونات (P4 / E2)</td></tr> <tr><td>ST AIA-PACK iE2 مجموعة معاير</td><td>Tosoh</td><td>Corporation 0025324</td> قياس <td>الهرمونات (P4 / E2)</td></tr> <tr><td>محلول تخفيف العينة ST AIA-PACK iE2</td> قياس الهرمونات <td>0025524</td> <td>شركة توسوه</td><td>(P4 / E2)</td></tr> <tr><td>ST AIA-PACK PROGIII</td><td>Tosoh Corporation</td><td></td><td>0025240 قياس الهرمونات (P4 / E2) مجموعة</td></tr> <tr><td>معايرة ST AIA-PACK PROGIII</td> قياس <td>الهرمونات Tosoh Corporation</td><td>0025340</td><td>(P4 / E2)</td></tr> <tr><td>ST AIA-PACK PROGIII SAMPLE FILATING SOLUTION</td><td>Tosoh Corporation</td> <td>&nbsp ؛ 0025540</td><td>قياس الهرمونات (P4 / E2)</td></tr> <tr><td>حقنة بإبرة 25 جم (0.50 × 25 مم)</td><td>TERUMO</td><td>SS-01T2525</td><td>جمع الدم</td></tr><tr><td>Tensolvet 5.000 IE gel.</td><td>Dechra Pharmaceuticals</td><td>14033492</td><td>علاج الورم</td></tr><tr><td>الدموي مجموعة Tosoh متعددة الضوابط</td><td>Tosoh Corporation</td><td>قياس الهرمونات 0015965</td><td>(P4 / E2)</td></tr></tbody></table>

أخذ عينات الدم وقياس الهرمونات لتحديد المرحلة في دورة المبيض في marmosets

Blood Sampling and Hormone Measurement for Determining the Stage in the Ovarian Cycle in Marmosets

التفاصيل المتعلقة بالحيوانات المستخدمة في هذه الدراسة مذكورة في الجدول 1.
التحاليل التشريحية للوريد الفخذي تم إجراء التحليلات التشريحية للوريد الفخذي باستخدام ذكر من الذكور يبلغ من العمر 2 (I 7713M) يخضع للقتل الرحيم. تقع الأوردة والشرايين الفخذية في مثلث الفخذ. يتكون المثلث الفخذي عند الحدود بين جدار البطن وعضلات الفخذ (الشكل 1B-D). عند قاعدة الفخذ ، يمر الوريد الكبير عبر مركز المثلث المقلوب ، ويمتد الشريان بالتوازي خارج الوريد. في المنطقة السفلية ، تصبح الأوردة والشرايين أرق وتتداخل ، مع وضع الشرايين أعلى الأوردة (الشكل 1 د).
لأخذ عينات الدم ، يجب استهداف الوريد لأن إصابة الشرايين يمكن أن تسبب ورم دموي في الشريان الفخذي ، مما قد يؤدي إلى صدمة قلبية وعائية عندما يكون النزف شديدا13. على الرغم من أنه يمكن سحب الدم من أي جزء من الوريد في المثلث ومنطقته البعيدة ، يوصى ببزل الوريد من الموقع القريب من مثلث الفخذ بسبب الحجم الكبير للوريد وتداخله القليل على ما يبدو مع الشريان. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الوريد في الموقع القريب سطحي ، مما يسمح بتحديد الموقع بسهولة باستخدام إبرة. نظرا لأنه ينبض ، يتم تحديد الشريان الموجود في مثلث الفخذ أحيانا بصريا أو عن طريق الجس ، ويمتد الوريد إليه فقط من الإنسي. وبالتالي ، فإن مراقبة نبض الشريان يساعد على التنبؤ بموقع الوريد.
علاوة على ذلك ، عادة ما يتم ملاحظة اللون الأزرق الذي يشير إلى الوريد تحت الجلد في الجزء العلوي من المثلث (الشكل 1B ، C). ومع ذلك ، غالبا ما توجد الغدد الليمفاوية في المثلث بالقرب من الوريد وتظهر لونا أزرق داكنا ، لذلك يكون مظهرها مشابها. لحسن الحظ ، يمكن تمييزها عن طريق حركتها: الوريد ثابت ، والغدد الليمفاوية متحركة. وبالتالي ، فإن نبض الشريان واللون الأزرق للوريد هما دليلان رئيسيان يستخدمان لتحديد موقع الوريد ، على الرغم من أنه قد يكون من الضروري حلق الشعر لتصورهما.
تحديد المرحلة في دورة المبيض تم رصد مستويات P4 و E2 في ست إناث من (تتراوح أعمارهن من 1 إلى 3 سنوات) للتحقيق في مدة المراحل الجرابية والأصفر. أظهرت النتائج متوسط مدة 11.58 يوما (ن = 6 من أربعة مارموسيت) و 16.8 يوما (ن = 5 من ثلاث مارموسيت) للمراحل الجرابية والصفراء ، على التوالي (الجدول 2). في ما يلي ، يتم وصف ديناميكيات P4 و E2 لواحد (I6751F ، 3 سنوات) من الستة بالتفصيل. تم إجراء أخذ عينات الدم والقياسات الهرمونية في هذا كل بضعة أيام لمدة 38 يوما (الجدول 3).
المرحلة الصفراء (الأيام 1-10) تم تعيين يوم بدء القياس على أنه اليوم 1. استنادا إلى مستوى P4 (21 نانوغرام / مل) ، كان على الأرجح في المرحلة الصفراء. لوحظ ارتفاع مستوى P4 من الأيام 1 إلى 10 (≥21 نانوغرام / مل) ، مما يشير إلى المرحلة الصفراء. في اليوم 12 ، انخفض بشكل حاد إلى 4 نانوغرام / مل. يشير هذا الانخفاض الكبير إلى الانتقال من المرحلة الصفراء إلى المرحلة المسامية. كما دعم هذا الانتقال انخفاض في مستوى E2 من اليوم 10 (241 نانوغرام / مل) إلى 12 (189 نانوغرام / مل).
المرحلة الجرابية (الأيام 12-22) بعد الانتقال إلى المرحلة الجرابية ، ظل مستوى P4 منخفضا (4-6 نانوغرام / مل) حتى اليوم 19 ثم زاد قليلا من اليوم 19 إلى 24 (اليوم 19 ، 6 نانوغرام / مل ؛ اليوم 22 ، 8 نانوغرام / مل ؛ اليوم 24 ، 9 نانوغرام / مل). وعلى النقيض من ذلك، ارتفع مستوى E2 زيادة كبيرة من اليوم 19 (94 نانوغرام/مل) إلى 22 (322 نانوغرام/مل) ثم انخفض من اليوم 22 إلى 24 (158 نانوغرام/مل). بناء على زيادة مستويات P4 وانخفاض مستويات E2 ، كان من المتوقع أن يحدث الإباضة بين اليومين 22 و 24 ، والانتقال من المرحلة الجرابية إلى المرحلة الصفراء.
المرحلة الصفراء (الأيام 24-36) بعد الإباضة ، ظل مستوى P4 مرتفعا حتى اليوم 36 ثم انخفض إلى 3 نانوغرام / مل في اليوم 38. وبالتالي ، فمن المحتمل أن يكون الانتقال من المرحلة الصفراء إلى المرحلة الجرابية قد حدث بين الأيام 36-38. واتساقا مع هذا التحول، انخفض مستوى E2 خلال هذه الفترة (اليوم 36، 2517 نانوغرام/مل؛ اليوم 38، 73 نانوغرام/مل).
التنبؤ وتحديد توقيت الإباضة
لفحص العلاقة بين مستوى CG في البول وتاريخ الإباضة ، تم تحضير سبعة قمر (رقم 1-7). تم حقن كلوبروستينول لإعادة ضبط دورة التبويض (اليوم 0). بعد ذلك ، تم إجراء مراقبة مستويات الدم P4 / E2 ومستويات CG في البول من اليوم 7. تم جمع البول مباشرة بعد الإضاءة. تم أخذ عينات الدم بشكل أساسي في الصباح. كان من المفترض أن الإباضة تحدث عندما انخفض مستوى E2 إلى حد كبير مقارنة باليوم السابق كما ورد في17. في ذلك اليوم ، لوحظ بالفعل تمزق الجريبي على سطح المبايض ، ووجود زيجوت / بويضات في قنوات البيض (الجدول 4).
تم اكتشاف CG لأول مرة خلال الأيام من 7 إلى 11 (اليوم 7 ، N = 1 ؛ اليوم 8 ، N = 2 ؛ اليوم 9 ، N = 1 ؛ اليوم 10 ، N = 2 ؛ اليوم 11 ، N = 1) (الجدول 4). لوحظ انخفاض كبير في مستويات E2 (إشارة الإباضة) بعد 0-3 أيام من إشارة CG الأولى. بدت المدة من أول اكتشاف CG إلى انخفاض E2 كبيرة عندما كان أول اكتشاف CG في وقت سابق (الشكل 3A). على سبيل المثال ، أظهر واحد (رقم 1) انخفاضا في إشارة E2 بعد 3 أيام من اكتشاف CG الأول في اليوم 7 (الجدول 4). في المقابل ، لوحظ تزامن أول اكتشاف CG وانخفاض إشارة E2 في واحد (رقم 2) في اليوم 10. وهكذا ، على الرغم من أن أول اكتشاف CG والإباضة لوحظ في نفس اليوم في أحد الخمسة ، حدث الإباضة في غضون أيام قليلة بعد الكشف الأول عن CG.
تم تصميم مجموعة اختبار الكروماتوجرافي المناعي ل marmoset CG لاستخدام البول للاختبار. عادة ما يصاحب فحص مستوى CG تحديد مستويات P4 / E2 باستخدام بلازما الدم. سيكون من المفيد إذا كان من الممكن استخدام بلازما الدم ، بدلا من البول ، لاختبار CG. لاختبار ذلك ، تم فحص بلازما الدم التي تركت بعد قياس مستوى P4 / E2 في التجارب المذكورة أعلاه. تم جمع بلازما الدم والبول من الحيوانات الأربعة في أي من أيام التجارب المذكورة أعلاه (تمت الإشارة إلى أيام الفحص بعلامات نجمية مزدوجة [**] في الجدول 4). باستخدام البول ، أظهر اثنان من الحيوانات الأربعة نتائج إيجابية (الدرجات 5 و 3) ، وأظهر الآخران نتائج سلبية (النتيجة 1). أظهرت بلازما الدم بشكل أساسي نفس نتائج البول (الشكل 3 ب). تم الحصول على إشارة أقوى باستخدام بلازما الدم. لذلك ، عند استخدام بلازما الدم ، يجب أن يصدر الحكم قبل 10 دقائق ، والتي يتم تعيينها للبول.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig01.jpg"> الشكل 1: جمع الدم من المرموسيت. (أ) يستخدم المقيد لجمع الدم. ب: المرموسيت أعلى الفخذ. ج: مثلث الفخذ والأوعية الدموية. غالبا ما يكون الشريان الفخذي في المثلث مرئيا ويظهر النبض. يظهر اللون الأزرق للوريد الفخذي أحيانا في المنطقة القريبة من المثلث (يشار إليه باسم موقع الفصد). الغدد الليمفاوية تظهر أيضا اللون الأزرق. ومع ذلك ، فإن الغدد الليمفاوية متحركة حيث ترتبط الغدد الليمفاوية بالجلد. د: منظر تشريحي لفخذ الذي قتل رحيما. يشار إلى موقع الشريان والوريد والفصد. يظهر نفس في B-D. ه: جمع الدم باستخدام مقيد. يظهر وضع تثبيت ساقي المرموسيت والدم الذي يتم سحبه. (و) جمع البول من حيوان المرموسيت. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig01large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig02.jpg"> الشكل 2: الأنماط النموذجية لمستويات P4 و E2 و CG أثناء دورة المبيض في marmosets. يشار إلى النقاط الزمنية لحقن FSH و hCG و PGF2α. تظهر الخطوط المتقطعة النمط الهرموني المتوقع بعد حقن PGF2α. الاختصارات: P4 = البروجسترون. E2 = استراديول ؛ CG = موجهة الغدد التناسلية المشيمية. FSH = هرمون محفز للجريب. قوات حرس السواحل الهايتية = موجهة الغدد التناسلية المشيمية البشرية. PGF2α = البروستاجلاندين F2α. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig02large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig03.jpg"> الشكل 3: تحديد مستوى CG للتنبؤ بحدوث التبويض. (أ) العلاقة المحتملة بين اليوم الأول للكشف عن CG (الدرجة &gt; 1) والمدة حتى الإباضة (انخفاض E2). (ب) يمكن استخدام بلازما الدم في اختبارات CG الكروماتوجرافية المناعية. نتيجة تمثيلية لكل درجة (أعلى). تم تحديد النتيجة بعد 10 دقائق من تحميل العينة. النتيجة 2 لا تمثل أي فرقة في غضون 5 دقائق ولكن ظهور فرقة في غضون 10 دقائق. تم جمع الدم بعد وقت قصير من جمع البول. تم فحص أربعة مارموسيت (رقم 1 ، 2 ، 3 ، 5 في الجدول S4). يشار إلى العينات المستخدمة هنا كعلامات نجمية مزدوجة في الجدول 4. تم تخفيف بلازما الدم إلى 50٪ عن طريق المخزن المؤقت للتخفيف المستخدم لقياس E2. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig03large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
الجدول 1: المستخدمة في هذه الدراسة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_Table%201v2.xlsx" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الجدول.</a>
الجدول 2: مدة المراحل الجرابية والأصفر. تم تحديد المرحلة بناء على مستوى P4 (المرحلة الجرابية P4 ≤ 8 ، المرحلة الصفراء P4 &gt; 8). عندما لوحظ تغير الطور بين القياسات ، تم تحديد نقطة المنتصف بين تواريخ القياس لتكون نقطة التغيير. اعتبرت المدة بين نقطتي التغيير مراحل مسامية أو صفراء. ولضمان قياس مدة مرحلة واحدة، لم تستخدم في التحليلات البيانات ذات الفاصل الزمني الطويل (≥7 أيام) أو مرتين من ≥6 أيام في نفس المرحلة، بما في ذلك عند تغطية المرحلتين. فقط عندما تم إجراء قياسين في نفس المرحلة ، تم استخدام البيانات. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_240320_Table2_rev.zip" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الجدول.</a>
الجدول 3: نتائج قياسات P4 و E2 لمدة 38 يوما في مارموسيت واحد.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_240320_Table3_rev.zip" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الجدول.</a>
الجدول 4: تحديد أيام التبويض والتنبؤ بها. اعتبرت آثار الإباضة موجودة إذا لوحظت مواقع النزيف أو مواقع التمزق في المبايض. تشير البويضة / الزيجوت إلى مراحل البويضة / الزيجوت التي تم الحصول عليها من قنوات البيض في يوم انخفاض E2. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_Table%204_revv2.xlsx" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لتنزيل هذا الجدول.</a>

أخذ عينات الدم وقياس الهرمونات لتحديد المرحلة في دورة المبيض في Marmosets

Common marmosets are small New World monkeys. Since many of their biological mechanisms are similar to those of humans, marmosets are potentially useful ...

blood-sampling-hormone-measurement-for-determining-stage-ovarian

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

هنا، نحن تصف كيفية تحديد المرحلة من الفئران الإنجابية (مقدمات الوداق، شبق، تلية الوداق، أو هجوع الودق) من خلال جمع بسيطة غير الغازية، وتقييم الخلوي لعينات مسحة المهبل. وصفنا علم الخلايا المهبلية كذلك كيف يعكس تعميم مستويات الهرمونات التي تقوم عليها من خلال الانتقال التناسلي للدورة الفئران.

أداء الغسل المهبلي، كريستال تلوين بنفسجي، والتقييم النسيجية المهبلية لتحديد دورة دقي الماوس التدريج

تعدل هرمونات الغدد التناسلية مثل هرمون الاستروجين تكوين الذاكرة في عدد من النماذج التجريبية بما في ذلك ذاكرة انقراض الخوف. يصف هذا البروتوكول مجموعة من الطرق للتحقيق في تأثير هرمونات الغدد التناسلية على وجه التحديد أثناء الانقراض في الإناث اللواتي يركبن الدراجات بشكل طبيعي ، بما في ذلك مراقبة دورة الشبق وإعطاء هرمون الاستروجين الخارجي.

بروتوكول لدراسة الانقراض من الخوف مشروطة في ركوب الدراجات وبطبيعة الحال إناث الفئران

نقدم هنا بروتوكول أخذ عينات دم الذيل-نصيحة لجمع العينات متكررة في الفئران غير المقيد. هذا الأسلوب مفيداً لتقييم أنماط من إفراز الهرمون نابض ويمكن تكييفه لتحليل للعوامل الأخرى المتداولة.

كثرة أخذ عينات الدم الذيل-نصيحة في الفئران للتقييم لإفراز الهرمون نابض

يصف لنا تطوير نموذج الماوس مثل متلازمة تكيس المبايض العجاف مع بيليه ديهدروتستوسترون لدراسة الفسيولوجيا المرضية لمتلازمة تكيس المبايض والذرية من هذه السدود مثل متلازمة تكيس المبايض.

نموذج الماوس هايبراندروجينيك لدراسة متلازمة تكيس المبيض

توفر دراسة البيولوجيا البرمائية معلومات قيمة عن العمليات الإنجابية والفسيولوجية والجنينية والتنموية التي تدفع الكائنات الحية في العديد من المجموعات التصنيفية. هنا، نقدم دليلا شاملا على المنهجيات المختلفة التي يمكن استخدامها لدراسة مراقبة المبيض والرصد في البرمائيات.

التقنيات الإنجابية لرصد المبيض والسيطرة عليه في البرمائيات

تفصل هذه الدراسة العوامل الحاسمة التي يجب مراعاتها في التصاميم التجريبية التي تشمل إناث الفئران. وبمعنى أوسع، تعمل هذه البيانات على تقليل وصمة العار والمساعدة في تطوير أدوات تشخيص وتدخل أكثر شمولا.

مراقبة دورة القوارض الحثالة باستخدام غسل المهبل: لا يوجد شيء مثل الدورة العادية

هنا ، نصف طريقة تربية يدوية لتربية المرموسيت في حاضنة. تزيد هذه الطريقة بشكل كبير من معدل بقاء الرضع المرموسيت ، مما يوفر الفرصة لدراسة تطور أطفال المرموسيت ذوي الخلفيات الوراثية المماثلة التي نشأت في بيئات مختلفة بعد الولادة.

طريقة التربية اليدوية لصغار المرموسيت

نبض هرمون اللوتين (LH) هو السمة المميزة للوظيفة الإنجابية. وصفنا بروتوكولا للتنشيط عن بعد لمجموعات عصبية محددة مرتبطة بجمع الدم الآلي التسلسلي. تسمح هذه التقنية بالتعديل الهرموني الموقوت ، وتعدد الإرسال ، وتقليل تأثيرات التلاعب على مستويات LH في الواعية التي تتحرك بحرية ، وغير المضطربة.

التنشيط العصبي عن بعد إلى جانب أخذ عينات الدم الآلي للحث على قياس هرمون اللوتين المتداول في الفئران وقياسه

هنا ، نصف طرق العلاج المعدلة لإهدار متلازمة المرموسيت (WMS ، المعروف أيضا باسم مرض التهاب الأمعاء (IBD) الشبيه) بحمض الترانيكساميك. نقدم أيضا كيفية إدارة العوامل العلاجية عن طريق الفم وتحت الجلد والوريد.

تعديل طرق علاج هزال متلازمة المرموسيت بحمض الترانيكساميك والتدابير الداعمة

التغيرات في تدفق دم المبيض خلال فترة ما قبل الإباضة ضرورية للإباضة. تم استخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر في البشر الكبيرة لتقييم ديناميكا الدم في المبيض والتروية. يتم تقديم بروتوكول لتطبيق التصوير بالموجات فوق الصوتية دوبلر لتقييم ديناميكا الدم المبيض خلال مرحلتي ما قبل الإباضة وحوائط الإباضة في الفئران.

تصوير دوبلر بالموجات فوق الصوتية للتصوير الحي والقياس الكمي لوظيفة الأوعية الدموية للمبيض في الفئران

تعلم بروتوكول أخذ عينات الدم لقياس مستويات الهرمونات في المارموست لتحديد مرحلة الإباضة بدقة. هذه الطريقة تُحسّن الوصول للأوردة وتدعم إدارة التكاثر في الأبحاث البيولوجية التناسلية.

أخذ عينات الدم وقياس الهرمونات لتحديد المرحلة في دورة المبيض في Marmosets

استكشف المزيد من الفيديوهات