Name: تقنية الإعطاء داخل الأنف لمجاميع α-Synuclein (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 49 s
Description: اكتشف طريقة الإعطاء داخل الأنف لمجاميع α-Synuclein في نموذج الفأر لدراسة انتشارها من الغشاء الشمي إلى البصلة الشمية في مرض باركنسون. تساعد هذه التقنية الباحثين على فهم آليات تطور المرض.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>انتشار α-Synuclein: الإدارة داخل الأنف في مرض باركنسون

<ol><li>Tysnes, O. B., Storstein, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neural+Transm+%28Vienna%29%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of Parkinson's disease.</a> J Neural Transm (Vienna). 124 (8), 901-905 (2017).</li>
<li>Goedert, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-synuclein+and+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Alpha-synuclein and neurodegenerative diseases.</a> Nature Rev Neurosci. 2, 492-501 (2001).</li>
<li>Conway, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acceleration+of+oligomerization%2C+not+fibrillization%2C+is+a+shared+property+of+both+alpha-synuclein+mutations+linked+to+early-onset+Parkinson%27s+disease%3A+implications+for+pathogenesis+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Acceleration of oligomerization, not fibrillization, is a shared property of both alpha-synuclein mutations linked to early-onset Parkinson's disease: implications for pathogenesis and therapy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97 (2), 571-576 (2000).</li>
<li>Braak, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Staging+of+brain+pathology+related+to+sporadic+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Staging of brain pathology related to sporadic Parkinson's disease.</a> Neurobiol Aging. 24 (2), 197-211 (2003).</li>
<li>Braak, H., Rüb, U., Gai, W. P., Del Tredici, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Idiopathic+Parkinson%27s+disease%3A+possible+routes+by+which+vulnerable+neuronal+types+may+be+subject+to+neuroinvasion+by+an+unknown+pathogen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neural+Transm+%28Vienna%29%22%5BJournal%5D)">Idiopathic Parkinson's disease: possible routes by which vulnerable neuronal types may be subject to neuroinvasion by an unknown pathogen.</a> J Neural Transm (Vienna). 110 (5), 517-536 (2003).</li>
<li>Kordower, J. H., Chu, Y., Hauser, R. A., Freeman, T., Olanow, C. W. Lewy body-like pathology in long-term embryonic nigral transplants in Parkinson's disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKordower%2C+JH+%22Nat+Med%22">Nat Med</a>. 14 (5), 504-506 (2008).</li>
<li>Li, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+bodies+in+grafted+neurons+in+subjects+with+Parkinson%27s+disease+suggest+host-to-graft+disease+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Lewy bodies in grafted neurons in subjects with Parkinson's disease suggest host-to-graft disease propagation.</a> Nat Med. 14 (5), 501-503 (2008).</li>
<li>Luk, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathological+%CE%B1-synuclein+transmission+initiates+Parkinson-like+neurodegeneration+in+nontransgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Pathological α-synuclein transmission initiates Parkinson-like neurodegeneration in nontransgenic mice.</a> Science. 338, 949-953 (2012).</li>
<li>Desplats, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inclusion+formation+and+neuronal+cell+death+through+neuron-to-neuron+transmission+of+alpha-synuclein%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Inclusion formation and neuronal cell death through neuron-to-neuron transmission of alpha-synuclein.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (31), 13010-13015 (2009).</li>
<li>Sawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+body+disease+primate+model+with+%CE%B1-Synuclein+propagation+from+the+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Lewy body disease primate model with α-Synuclein propagation from the olfactory bulb.</a> Mov Disord. 37 (10), 2033-2044 (2022).</li>
<li>Uemura, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inoculation+of+%CE%B1-synuclein+preformed+fibrils+into+the+mouse+gastrointestinal+tract+induces+Lewy+body-like+aggregates+in+the+brainstem+via+the+vagus+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Inoculation of α-synuclein preformed fibrils into the mouse gastrointestinal tract induces Lewy body-like aggregates in the brainstem via the vagus nerve.</a> Mol Neurodegener. 13 (1), 21(2018).</li>
<li>Rey, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+transneuronal+propagation+of+alpha-synucleinopathy+triggered+in+olfactory+bulb+mimics+prodromal+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Widespread transneuronal propagation of alpha-synucleinopathy triggered in olfactory bulb mimics prodromal Parkinson's disease.</a> J Exp Med. 213 (9), 1759-1778 (2016).</li>
<li>Rey, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spread+of+aggregates+after+olfactory+bulb+injection+of+%CE%B1-synuclein+fibrils+is+associated+with+early+neuronal+loss+and+is+reduced+long+term%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol%22%5BJournal%5D)">Spread of aggregates after olfactory bulb injection of α-synuclein fibrils is associated with early neuronal loss and is reduced long term.</a> Acta Neuropathol. 135 (1), 65-83 (2018).</li>
<li>Uemura, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1-Synuclein+spread+from+olfactory+bulb+causes+hyposmia%2C+anxiety%2C+and+memory+loss+in+BAC-SNCA+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">α-Synuclein spread from olfactory bulb causes hyposmia, anxiety, and memory loss in BAC-SNCA mice.</a> Mov Disord. 36 (9), 2036-2047 (2021).</li>
<li>Saito, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lewy+body+pathology+involves+the+olfactory+cells+in+Parkinson%27s+disease+and+related+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Lewy body pathology involves the olfactory cells in Parkinson's disease and related disorders.</a> Mov Disord. 31 (1), 135-138 (2016).</li>
<li>De Luca, C. M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+RT-QuIC+seeding+activity+for+%CE%B1-synuclein+in+olfactory+mucosa+samples+of+patients+with+Parkinson%27s+disease+and+multiple+system+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Efficient RT-QuIC seeding activity for α-synuclein in olfactory mucosa samples of patients with Parkinson's disease and multiple system atrophy.</a> Transl Neurodegener. 8, 24(2019).</li>
<li>Stefani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-synuclein+seeds+in+olfactory+mucosa+of+patients+with+isolated+REM+sleep+behaviour+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Alpha-synuclein seeds in olfactory mucosa of patients with isolated REM sleep behaviour disorder.</a> Brain. 144 (4), 1118-1126 (2021).</li>
<li>Ucciferri, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scoring+central+nervous+system+inflammation%2C+demyelination%2C+and+axon+injury+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Scoring central nervous system inflammation, demyelination, and axon injury in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> J Vis Exp. (204), e65738(2024).</li>
<li>Masuda-Suzukake, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prion-like+spreading+of+pathological+%CE%B1-synuclein+in+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Prion-like spreading of pathological α-synuclein in brain.</a> Brain. 136 (Pt 4), 1128-1138 (2013).</li>
<li>Sawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-dose+intranasal+administration+of+%CE%B1-syn+PFFs+induce+lewy+neurite-like+pathology+in+olfactory+bulbs%5BTitle%5D)+AND+%22Parkinsonism+Relat+Disord%22%5BJournal%5D)">Single-dose intranasal administration of α-syn PFFs induce lewy neurite-like pathology in olfactory bulbs.</a> Parkinsonism Relat Disord. 112, 105440(2023).</li>
<li>Guo, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intranasal+administration+of+%CE%B1-synuclein+preformed+fibrils+triggers+microglial+iron+deposition+in+the+substantia+nigra+of+Macaca+fascicularis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Intranasal administration of α-synuclein preformed fibrils triggers microglial iron deposition in the substantia nigra of Macaca fascicularis.</a> Cell Death Dis. 12 (1), 81(2021).</li>
<li>Macdonald, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assembly+of+%CE%B1-synuclein+and+neurodegeneration+in+the+central+nervous+system+of+heterozygous+M83+mice+following+the+peripheral+administration+of+%CE%B1-synuclein+seeds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">Assembly of α-synuclein and neurodegeneration in the central nervous system of heterozygous M83 mice following the peripheral administration of α-synuclein seeds.</a> Acta Neuropathol Commun. 9 (1), 189(2021).</li>
<li>Abdelmotilib, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B1-Synuclein+fibril-induced+inclusion+spread+in+rats+and+mice+correlates+with+dopaminergic+Neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">α-Synuclein fibril-induced inclusion spread in rats and mice correlates with dopaminergic Neurodegeneration.</a> Neurobiol Dis. 105, 84-98 (2017).</li>
<li>Tarutani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+fragmented+pathogenic+%CE%B1-Synuclein+seeds+on+prion-like+propagation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The effect of fragmented pathogenic α-Synuclein seeds on prion-like propagation.</a> J Biol Chem. 291 (36), 18675-18688 (2016).</li>
<li>Taguchi, T., Ikuno, M., Yamakado, H., Takahashi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+model+for+prodromal+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Animal model for prodromal Parkinson's disease.</a> Int J Mol Sci. 21 (6), 1961(2020).</li>
<li>Bousset, L., Brundin, P., Böckmann, A., Meier, B., Melki, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+efficient+procedure+for+removal+and+inactivation+of+alpha-Synuclein+assemblies+from+laboratory+materials%5BTitle%5D)+AND+%22J+Parkinsons+Dis%22%5BJournal%5D)">An efficient procedure for removal and inactivation of alpha-Synuclein assemblies from laboratory materials.</a> J Parkinsons Dis. 6 (1), 143-151 (2016).</li>
<li>Fenyi, A., Coens, A., Bellande, T., Melki, R., Bousset, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+efficacy+of+different+procedures+that+remove+and+disassemble+alpha-synuclein%2C+tau+and+A-beta+fibrils+from+laboratory+material+and+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Assessment of the efficacy of different procedures that remove and disassemble alpha-synuclein, tau and A-beta fibrils from laboratory material and surfaces.</a> Sci Rep. 8, 10788(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>مجهر مضان الكل في واحد BZ-X710</td><td>KEYENCE</td><td>N / A</td><td>مجهر الكل في واحد</td></tr><tr><td>ملح الصوديوم</td><td>Nacalai tesque</td><td>02739-32</td><td></td></tr><tr><td>Bioruptor II</td><td>Sonicbio</td><td>BR2006A</td><td>سونيكاتور نوع حمام مائي</td></tr><tr><td>بوتورفانول طرطرات</td><td>ميجي سيكا فارما</td><td>WAK-52850</td><td></td></tr><tr><td>أنبوب السليلوز</td><td>MISUMI</td><td>UC20-32-100</td><td></td></tr><tr><td>DeepWellMaximizer</td><td>TAITEC</td><td>MBR-022UP</td><td>شاكر</td></tr><tr><td>DynaEfficient Cells Zip BL21 (DE3)</td> <td>BioDynamics Laboratory Inc.</td><td>DS255</td><td>خلية مختصة</td></tr><tr><td>Entellan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>107961</td><td>وسيط تركيب سريع للفحص المجهري</td></tr><tr><td>Graefe ملقط دقيق للغاية منحني مسنن</td><td>FST</td><td>11152-10 &nbsp ؛</td><td>ملقط</td></tr><tr><td>مقص ناعم مقوى</td><td>FST</td><td>14090-09</td><td>مقص</td></tr><tr><td>هيستوفين ماوس وصمة عار بسيط MAX-PO (R)</td> <td>Nichirei Bioscience</td><td>414341</td><td>العالمي المناعي بيروكسيداز بوليمر ، صورة مضادة للأرانب</td></tr><tr><td>J ver 1.52p</td><td>NA</td><td></td><td>NA https://imagej.net/</td></tr> <tr><td>innova4200</td><td>نيو برونزويك 9105085 علمي</td><td></td><td>حاضنة شاكر</td></tr><tr><td>الأيزوبروبيل - & بيتا ؛ - D-thiogalactopyranoside</td><td>Nacalai tesque</td><td>19742-94</td><td></td></tr><tr><td>مرق LB ، Lennox</td><td>Nacalai tesque</td><td>20066-24</td><td></td></tr><tr><td>Leica EG 1150 H</td><td>Leica</td><td>14 0388 86 108</td><td>مركز تضمين الأنسجة المعيارية</td></tr><tr><td>Leica TP 1020</td><td>Leica</td><td>14 0422 85108</td><td>معالج الأنسجة الأوتوماتيكي &nbsp;</td></tr><tr><td>ميديتوميدين</td><td>فوجي فيلم</td><td>135-17473</td><td></td></tr><tr><td>ميكروم HM325 الروتاري ميكروتوم</td><td>حراري علمي</td><td>902100</td><td></td></tr><tr><td>ميدازولام</td><td>مارويشي سياكو</td><td>4987-211-76210-0</td><td></td></tr><tr><td>هيماتوكسيلين جديد من النوع G</td><td>موتو</td><td>65-9197-38</td><td>محلول هيماتوكسيلين</td></tr><tr><td>إبرة مجنحة عادية للوريد نوع D ، إبرة 25G</td><td>TERUMO</td><td>NN2332R</td><td>25G</td></tr><tr><td>Optima TLX Ultra Centrifuge</td><td>Beckman Couler</td><td>8043-30-1197</td><td>ماصة الطرد المركزي</td></tr><tr><td>الفائق P10</td><td>جيلسون</td><td>FA10002P</td><td></td></tr><tr><td>البارافين</td><td>لايكا</td><td>39601095</td><td></td></tr><tr><td>بارافورمالدهايد</td><td>ناكالاي تيسك</td><td>30525-89-4</td><td></td></tr><tr><td>طقم بقع البيروكسيديز DAB</td><td>Nacalai tesque</td><td>25985-50</td><td></td></tr><tr><td>أطقم فحص البروتين BCA Pirece</td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>BCA assay</td></tr><tr><td>pRK172</td><td>Addgene</td> <td># 134504</td><td>البلازميد</td></tr><tr><td>Q-Sepharose Fast Flow.&nbsp;</td><td>سيتيفا</td><td>17051001</td><td>راتنج التبادل الأيوني</td></tr></tbody></table>

تقنية الإعطاء داخل الأنف لمجاميع α-synuclein

Technique for Intranasal Administration of &#945;-Synuclein Aggregates

يوضح الشكل 3 عدة أمثلة على مجاميع α-Syn في OB. في هذه الدراسة ، قمنا بإعطاء مجاميع α-Syn في فتحة الأنف أحادية الجانب. يتم فصل تجويف الأنف عن طريق الحاجز الأنفي ، ويقوم كل OB بعرض الخلايا العصبية الحسية الشمية على كل تجويف أنفي على حدة. لذلك ، يمكن استخدام OB على الجانب المقابل كعنصر تحكم.
لم يلاحظ علم أمراض P-α-Syn في OB على الجانب المعالج بعد 1 و 3 أشهر (الشكل 3 أ ، ب). لوحظت مجاميع p-α-Syn الشبيهة بالعصبية ليوي في الكبيبات على الجانب المعالج بعد 6 و 12 شهرا. (الشكل 3 ج ، د ، و ، ز). لم يتم ملاحظة هذه المجاميع في OB على جانب التحكم (الشكل 3E).
يمكننا تقدير علم الأمراض α-Syn عن طريق عد مجاميع α-Syn أو فحص الحجم ، وما إلى ذلك ، باستخدام ImageJ (جدول المواد). على سبيل المثال، قمنا سابقا بحساب عدد مجاميع α-Syn والإبلاغ عنه في هذا النموذج20. في OB على الجانب المعالج ، زادت المجاميع الشبيهة بالنيوريت ليوي في OB بشكل ملحوظ على مدى 12 شهرا (ANOVA أحادي الاتجاه ، متبوعا باختبار Dunnett ، ص &lt; 0.01 ؛ الشكل 3 ح). في OB على جانب التحكم ، هناك عدد قليل من مجاميع α-Syn.
أظهرت دراسة سابقة أن PFFs المحقونة في دماغ الفأر قد تحللت في غضون أسبوع ، وتم تحويل α-Syn للفأر الداخلي إلى مجاميع α-Syn19. في هذه الدراسة ، تشير الزيادة في علم أمراض α-Syn بمرور الوقت إلى أن α-Syn للفأر الداخلي قد تم تحويله إلى مجاميع α-Syn عن طريق إعطاء جرعة واحدة داخل الأنف من PFFs. أشارت هذه النتائج إلى أن علم أمراض α-Syn يمكن أن ينتشر من الغشاء المخاطي الشمي إلى OB.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig01.jpg"> 
الشكل 1: طريقة إدارة تجويف الأنف في الفأر. (أ) يتم وضع الفأر في وضع ضعيف مع إمالة الرأس قليلا إلى الأسفل. (ب) يشار إلى فتحات الأنف من الفأر برؤوس سهام صفراء. (ج، د) يتم إسقاط محلول الألياف α-Syn في فتحة أنف الفأر (C ، السهم الأحمر) ويتم استنشاقه بسرعة (D ، الأسهم الحمراء). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig01large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig02.jpg"> 
الشكل 2: مخطط خطوات الحصول على المصابيح الشمية السليمة. (أ) باستخدام المقص ، شق عظم الجمجمة سهمي وجانبيا (خط اندفاعة أصفر). (ب) قم بإزالة عظم الجمجمة على البصيلات الشمية (OBs) تماما. (ج) اقلب الرأس وأزل الدماغ بعناية. قطع أعصاب الدماغ. (د) قطع الأعصاب الشمية المرتبطة بعظم الجمجمة. (ه) الدماغ كله مع OBs السليمة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig02large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66943/66943fig03.jpg"> 
الشكل 3: مجاميع P-α-Syn في كبيبات البصلة الشمية. (AGE) P -α-Syn (EP1536Y) الكيمياء المناعية ل OB على (A-D) الجانب المعالج 1 و 3 و 6 و 12 شهرا (1 م و 3 م و 6 م و 12 م على التوالي) بعد الإعطاء داخل الأنف و (E) الجانب الضابط بعد 12 شهرا من الإعطاء داخل الأنف. (ج، د) تظهر مجاميع α-Syn الشبيهة بالخيوط الشبيهة بالخيوط حول الكبيبات. (F ، G) الصور المكبرة هي صور عالية التكبير ل p-α-Syn الشبيهة ب Lewy neurite بعد 6 و 12 شهرا من الإعطاء داخل الأنف. (ح) مقدار ترسب p-α-Syn الشبيه ب Lewy neurite في OB على الجانبين المعالج والتحكم (ن = 4-5). تظهر الرسوم البيانية يعني ± SEM. ANOVA أحادي الاتجاه متبوعا باختبار Dunnett ؛ **&lt;0.01. وقد عدل هذا الرقم من تقرير سابق20. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66943/66943fig03large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

تقنية الإعطاء داخل الأنف لمجاميع α-Synuclein

Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder characterized by the presence of Lewy bodies, which are aggregates of &#945;-synuclein ...

technique-for-intranasal-administration-of-synuclein-aggregates

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

وقد ارتبط مرض باركنسون إلى التعرض للمبيدات الحشرية. هنا نعرض طريقة لتقديم المبيدات الحشرية باستخدام أنبوب إلى المعدة في التركيز المطلوب وطريقة لتحليل أثرها في تراكم synuclein ألفا في الجهاز العصبي المعوي.

الشفوي إدارة روتنون باستخدام بالتزقيم وتحليل صورة الفا synuclein الادراج في الجهاز العصبي المعوي

يوصف أسلوب لإدارة المخدرات على الفئران الأنف مستيقظا لغرض استهداف الدماغ. هذا الأسلوب يسمح للتكرار الجرعات على مدى فترات طويلة داخل الأنف باستخدام إدارة المخدرات من دون تخدير، والأنف إلى الدماغ مع التعرض تسليم النظامية الحد الأدنى.

الأنف التداوي إدارة CNS على الفئران استيقظ

يوضح هذا الفيديو التلوين المناعي للخلايا العصبية المعالجة بمجاميع ألفا سينوكلين (αS). تتم معالجة الخلايا العصبية أولا بمجاميع αS. ثم يتم إصلاحها ونفاذها ومعالجتها بمحلول منع. تضاف الأجسام المضادة الأولية ، تليها أجسام مضادة ثانوية مصنفة بالفلورسنت وصبغة نووية. ثم يتم تركيب العينة ومراقبتها تحت المجهر.

التلوين المناعي للخلايا العصبية المعالجة بمجاميع ألفا سينوكلين

يوضح هذا الفيديو حقن ألياف ألفا سينوكلين في الفأر للحث على التهاب الأعصاب. يتم حقن الألياف داخل الصفاق في فأر معدل وراثيا يعبر عن بروتينات ألفا سينوكلين الطافرة. عند الوصول إلى الجهاز العصبي المركزي ، تدخل الألياف الخلايا العصبية وتحفز تراكم البروتينات الطافرة. تنتشر الركام إلى الخلايا العصبية المجاورة والخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا النجمية. يؤدي التعرف على المجاميع إلى تحفيز الخلايا الدبقية الصغيرة للحث على التهاب الأعصاب ، مما يؤدي إلى إتلاف الخلايا العصبية.

تحريض الالتهاب العصبي في الفئران عن طريق حقن ألياف ألفا سينوكلين

المصدر: Ullah, I., et.al. جهاز تحديد المواقع لوضع الفئران أثناء توصيل الحمض النووي الريبي داخل الأنف إلى الجهاز العصبي المركزي. J. Vis. Exp. (2019)يوضح هذا الفيديو تقنية دقيقة للإدارة داخل الأنف لإيصال مجمعات الببتيد siRNA التي تستهدف الخلايا العصبية إلى دماغ الفأر باستخدام جهاز تحديد المواقع المتخصص. يتم تأمين الفئران المخدرة في وضع الرأس لأسفل وللأمام لتحسين استنشاق الحمض النووي الريبي مع منع تصريف الرئة. يسهل الببتيد المستهدف امتصاص المستقبلات بوساطة الخلايا العصبية ، مما يتيح توصيل siRNA...

توصيل الحمض النووي الريبي داخل الأنف إلى دماغ الفأر باستخدام جهاز تحديد المواقع

المصدر: Kanazawa, T., et al. طرق جديدة للإعطاء داخل الأنف تحت التخدير الاستنشاقي لتقييم توصيل الأدوية من الأنف إلى الدماغ. J. Vis. Exp. (2018)يوضح هذا الفيديو إعطاء الأدوية المصنفة بالإشعاع داخل الأنف في فأر مخدر لتحقيق توصيل الأدوية من الأنف إلى الدماغ. يشرح كيف تعبر المخدرات ظهارة الأنف وتنتقل عبر المسارات العصبية للوصول إلى الدماغ ، وكذلك كيف تؤثر الحركة الهبية على الاحتفاظ بالمخدرات وإزالتها. بالإضافة إلى ذلك ، يصف الفيديو طريقة بديلة للقنية العكسية ، والتي تتضمن إدخال قنية عبر المريء...

إعطاء الأدوية داخل الأنف في الفئران عن طريق الماصة والقنية العكسية لتوصيل الأدوية من الأنف إلى الدماغ

حقن الطرفية من الألياف، synuclein ألفا في الصفاق أو اللسان من تيراغرام (M83 +/-: GFAP -luc +/-) الفئران، التي تعبر عن الإنسان ألفا synuclein مع الطفرة A53T العائلية واليراع وسيفيراز، يمكن أن تحفز الأعصاب، بما في ذلك neuroinflammation في الجهاز العصبي المركزي الخاصة بهم.

التصوير تلألؤ بيولوجي من Neuroinflammation في الفئران المعدلة وراثيا بعد الطرفية تلقيح ألفا Synuclein الألياف

والهدف من هذا البروتوكول هو توفير نظام يستند إلى الخلية أن يعيد تشكيل ألفا سينوكلين المجاميع في فيفو. هي تبذر تضمينات سينوكلين ألفا داخل الخلايا في الخلايا العصبية الأولية بالاستيعاب ونشر خارجية تدار المجاميع الأصلية المرتبطة ميكروسوميس ألفا-سينوكلين المعزولة من المريضة ألفا-سينوكلين الفئران المعدلة وراثيا.

إدارة خارجية من المجاميع المرتبطة ميكروسوميس ألفا-سينوكلين إلى الخلايا العصبية الأولية كنموذج خلية قوية لتشكيل ييفات

هنا، نقدم بروتوكول باستخدام جهاز تحديد المواقع الماوس التي تمكن من وضع المناسبة للفئران للإدارة داخل الأنف من الدماغ استهداف الببتيد-siRNA صياغة تمكين إسكات الجينات فعالة في الجهاز العصبي المركزي.

جهاز تحديد المواقع لوضع الفئران أثناء تسليم siRNA داخل الأنف إلى الجهاز العصبي المركزي

والهدف من هذه المادة هو الخطوط العريضة للخطوات اللازمة لتوليد الفيفيلز من مونوميريك الفا-synuclein ، ومراقبه الجودة اللاحقة ، واستخدام ألياف الليفية التي تم تشكيلها في الجسم المجري.

جيل من الورم الليفي الفا Synuclein المكونة مسبقا من مونومرات واستخدامها في فيفو

يقدم هذا البروتوكول تفكك رايلي كعملية خفيفة لتحويل ناقلات mRNA غير الفيروسية. يتم تقييم الترسيب الإقليمي لمتجهات mRNA المهووسة بمحرك ألبرتا (AINI). يمثل تعبير بروتين الفلورة الخضراء (GFP) في خلايا الرئة البشرية الحفاظ على الوظائف الفيزيائية-الكيميائية والبيولوجية لناقلات mRNA بعد التهوية.

توصيل بوليبلكس mRNA عبر الأنف عبر هباء رايلي المنفصل: طريقة في المختبر لترسيب الأنف والاختبار الوظيفي

اكتشف طريقة الإعطاء داخل الأنف لمجاميع α-Synuclein في نموذج الفأر لدراسة انتشارها من الغشاء الشمي إلى البصلة الشمية في مرض باركنسون. تساعد هذه التقنية الباحثين على فهم آليات تطور المرض.

تقنية الإعطاء داخل الأنف لمجاميع α-Synuclein

استكشف المزيد من الفيديوهات